HPLC Fundamentos (Fase normal y Fase reversa)
Summary
TLDREl script explica la cromatografía líquida de alta presión (HPLC), una técnica de separación y análisis químico. Se describen las fases normal y reversa, donde la interacción entre la fase móvil y estacionaria determina la separación de compuestos. La fase estacionaria en HPLC suele ser no polar (C18), y la fase móvil polar, lo que favorece la retención de compuestos polares. Se mencionan detectores específicos y la importancia de la polaridad en la separación de componentes químicos.
Takeaways
- 🌐 La cromatografía es una técnica de separación que puede utilizarse para separar prácticamente cualquier tipo de muestra.
- 🔄 La fase normal y la fase reversa son dos modos principales de cromatografía líquida que se diferencian en la polaridad de las fases móvil y estacionaria.
- 🚀 La HPLC (alta presión liquid chromatography), también conocida como cromatografía de alta resolución, utiliza presión para mejorar la separación y resolución de las muestras.
- 🧪 La automatización de la cromatografía ha permitido una separación más rápida y precisa de componentes en una muestra.
- 📊 Los picos en un cromatógrafo representan compuestos químicos separados, y su altura indica la concentración del compuesto.
- 🔬 La elección del detector en cromatografía depende del tipo de compuestos que se desean identificar y cuantificar.
- 💧 La fase móvil en la cromatografía puede variar en polaridad para controlar la selectividad y la eficiencia de la separación.
- 🧲 En la fase normal, la fase estacionaria es polar y la fase móvil no polar, lo que favorece la retención de compuestos polares.
- 🔀 En la fase reversa, la fase estacionaria es no polar y la fase móvil polar, lo que resulta en la retención de compuestos no polares.
- 📈 La cromatografía en fase reversa es la más comúnmente utilizada y permite un mayor control sobre la separación de compuestos a través de la composición de la fase móvil.
Q & A
¿Qué es la cromatografía y cómo se relaciona con la fase normal y la fase reversa?
-La cromatografía es una técnica analítica que se utiliza para separar componentes de una muestra. La fase normal y la fase reversa son dos modos de cromatografía donde la polaridad de la fase móvil y la fase estacionaria es diferente. En la fase normal, la fase estacionaria es polar y la fase móvil no polar, mientras que en la fase reversa, la fase estacionaria es no polar y la fase móvil es polar.
¿Qué significan las siglas HPLC y cómo evolucionaron?
-HPLC significa 'High Pressure Liquid Chromatography' (cromatografía de alta presión de líquidos). Originalmente, se refería a la cromatografía de alta presión debido al uso de presiones para empujar la fase móvil a través de la columna. Sin embargo, con el tiempo, la tecnología evolucionó y las siglas comenzaron a representar 'High Performance Liquid Chromatography' (cromatografía de alta resolución de líquidos), indicando un enfoque en la resolución y rendimiento del método.
¿Por qué en HPLC no se utilizan columnas de vidrio?
-En HPLC no se utilizan columnas de vidrio debido a que las altas presiones que se aplican para hacer fluir la fase móvil podrían romper el vidrio. Por lo tanto, se prefieren columnas de acero u otros materiales resistentes.
¿Qué es un cromatógrafo y qué función cumple?
-Un cromatógrafo es el instrumento que utiliza el principio de la cromatografía para realizar separaciones automáticas. Su función principal es la separación, identificación y cuantificación de componentes en una muestra.
¿Qué representan los picos en un cromatógrafo?
-Los picos en un cromatógrafo representan a los compuestos químicos que han sido separados dentro de la columna. Cada pico indica la presencia de un compuesto específico, y su altura puede estar relacionada con la concentración de ese compuesto en la muestra.
¿Cuáles son las tres etapas principales del proceso cromatográfico instrumental?
-Las tres etapas principales del proceso cromatográfico instrumental son: 1) inyección de la muestra, 2) proceso de separación dentro de la columna y 3) detección y análisis de los componentes separados.
¿Qué es un detector en cromatografía y cómo funciona?
-Un detector en cromatografía es un dispositivo que recibe los componentes que salen de la columna y transforma la información química de estos componentes en señales que luego se interpretan como picos en el cromatógrafo. La elección del detector depende del tipo de compuestos que se quieren detectar.
¿Qué es la fase estacionaria y cómo se relaciona con la fase móvil en la cromatografía?
-La fase estacionaria es la que permanece en su lugar durante la separación, y es con la que interactúan los componentes de la muestra. La fase móvil es la que pasa por la columna y lleva consigo a los componentes de la muestra. La interacción entre la fase estacionaria y los componentes de la muestra, junto con la fase móvil, determina la separación de los compuestos.
¿Cómo se selecciona la fase móvil en la cromatografía y cuál es su importancia?
-La fase móvil se selecciona basándose en la naturaleza de los compuestos que se desean separar. Es crucial porque su polaridad y composición pueden influir en la separación y la resolución de los componentes. La fase móvil puede ser modificada para mejorar la eficiencia de la separación.
¿Qué es el tiempo de migración y cómo se determina?
-El tiempo de migración es el tiempo que tarda un compuesto en pasar por la columna desde el momento de la inyección hasta que es detectado. Se determina observando el pico correspondiente al compuesto en el cromatógrafo.
¿Cómo se pueden mejorar las separaciones en cromatografía?
-Las separaciones en cromatografía pueden mejorarse modificando la composición de la fase móvil, cambiando la naturaleza de la fase estacionaria, ajustando las condiciones de la fase móvil (como su polaridad), o seleccionando una columna más adecuada para los compuestos específicos que se desean separar.
Outlines
🌟 Introducción a la Cromatografía Líquida de Alta Presión
El primer párrafo introduce la cromatografía, enfocándose en la diferencia entre la fase normal y la fase reversa. Se explican las siglas 'HPLC', que significan Cromatografía Líquida de Alta Presión, y cómo se ha evolucionado para representar Cromatografía Líquida de Alta Resolución. Se menciona que en HPLC se utilizan columnas de acero en lugar de vidrio debido a las altas presiones que se aplican. Además, se describe el proceso de separación y se menciona que el instrumento utilizado es un cromatógrafo, que automatiza el proceso de separación y permite la identificación y cuantificación de compuestos químicos.
🔎 Proceso de Cromatografía y Detección de Componentes
El segundo párrafo detalla los pasos del proceso cromatográfico, que incluyen la inyección de la muestra, el proceso de separación dentro de la columna y la detección. Se destaca la importancia de la automatización en la disminución del tiempo de separación y se menciona la variedad de detectores disponibles, cada uno específico para diferentes tipos de análisis. Se ilustra cómo la interacción entre la fase móvil y la fase estacionaria provoca la separación de los componentes de la muestra.
📊 Modos de Cromatografía: Fase Normal y Fase Reversa
Este párrafo explora los dos modos principales de cromatografía: la fase normal y la fase reversa. Se describe cómo en la fase normal, la fase estacionaria es polar y la fase móvil no polar, lo que favorece la retención de compuestos polares. En cambio, en la fase reversa, la fase estacionaria es no polar y la fase móvil es polar, lo que resulta en la retención de compuestos no polares. Se mencionan ejemplos de fases móviles y estacionarias y se explica cómo la naturaleza de estos componentes afecta la separación.
🔬 Detalles de los Detectores y la Separación de Compuestos
El cuarto párrafo se enfoca en los detectores utilizados en la cromatografía y cómo funcionan para detectar y medir compuestos específicos. Se menciona un detector UV a 280 nanómetros y cómo los compuestos químicos son registrados como picos en el cromatógrafo. Además, se discute la diferencia entre la fase normal y la fase reversa en términos de la retención de compuestos polares y no polares, respectivamente.
🌡 Control de Selectividad en la Cromatografía
Este párrafo explica cómo se controla la selectividad en la cromatografía a través de la composición de la fase móvil. Se sugiere que cambiar la polaridad de la fase móvil puede ayudar a mejorar la separación de los componentes. Se presentan ejemplos de cómo se puede modificar la fase móvil para lograr una mejor separación y se menciona la importancia de la fase estacionaria en la separación de compuestos.
🌀 Fase Estacionaria y Animación de Proceso Cromatográfico
El sexto y último párrafo habla sobre la fase estacionaria en la cromatografía, mencionando la fase C18 como un ejemplo común de fase estacionaria no polar. Se describen los compuestos benzopireno y sulfato de tilo para ilustrar cómo la naturaleza polar o no polar de un compuesto afecta su tiempo de retención en la columna. Finalmente, se presenta una animación para resumir el proceso de la cromatografía en fases normal y reversa.
Mindmap
Keywords
💡cromatografía
💡fase normal
💡fase reversa
💡HPLC
💡detector
💡compuestos químicos
💡柱子
💡presión
💡picos
💡separación
💡interacción selectiva
Highlights
Introducción al tema de cromatografía y sus fundamentos.
Explicación de las fases en cromatografía: fase normal y fase reversa.
Mencion de las siglas HPLC y su significado en cromatografía.
Diferenciación entre cromatografía de alta presión y de alta resolución.
Importancia de las columnas de acero en HPLC debido a las altas presiones.
Función del cromatógrafo y su rol en la separación y análisis de compuestos.
Proceso de inyección de muestra y su papel en la cromatografía.
Descripción del proceso de separación dentro de la columna cromatográfica.
Importancia de la detección en la identificación y cuantificación de compuestos.
Evolución de la cromatografía líquida de alta resolución y su impacto en la separación de componentes.
Función de la fase móvil y su interacción con la fase estacionaria en la separación de compuestos.
Diferenciación entre fase normal y fase reversa en términos de polaridad.
Explicación de la retención de compuestos polares en fase normal y no polares en fase reversa.
Importancia de la fase móvil en la selectividad de la separación en cromatografía.
Descripción de la fase estacionaria en cromatografía y su rol en la separación de compuestos.
Mencion de la fase estacionaria C18 y su aplicación en la cromatografía de fase reversa.
Comparación entre la cromatografía en fase normal y en fase reversa en términos de retención de compuestos.
Importancia de la modificación química de la fase estacionaria para obtener polaridad en cromatografía normal.
Resumen de la presentación y créditos al canal de YouTube 'Mister Simple Science' por la animación didáctica.
Transcripts
hola que tal continuando con el tema de
cromatografía vamos a ver en esta
ocasión lo que es el fundamento
instrumental y las fases que se conocen
en cromatografía las cuales son
comúnmente denominadas como fase normal
y fase reversa
bien dentro de la cromatografía existen
unas siglas que son ampliamente
conocidas las cuales se denominan h plc
nosotros en el análisis químico cuando
encontramos estas letras sin estas
siglas hacemos referencia inmediatamente
que se trata de un método cromatográfico
estas siglas son del inglés high
pressure liquid chromatography el cual
surgió en un inicio es decir
fotografía líquida de alta presión que
nos indica esto que utilizamos ya no
solamente la ilusión de la fase móvil
por medio de la fuerza de gravedad sino
que se está aplicando una presión chill
a esa fase móvil para hacerla fluir
dentro de la columna en temas anteriores
les había comentado que tenía un
limitante es el uso de columnas de
vidrio en este caso de la h plc no se
utilizan columnas de vidrio debido a que
si se utilizan presiones altas se
quiebra dicho material
entonces las columnas acá que se
utilizan son columnas normalmente de
acero
bien esas siglas de h plc surgen como
una cromatografía líquida de alta
resolución actualmente conforme ha
avanzado la instrumentación y también la
tecnología evidentemente se hace
referencia a que ya no es cromatografía
líquida de alta presión sino
cromatografía líquida de alta resolución
es decir high performance la p ya no nos
representa presión sino nos representa
un performance una resolución y lo que
observamos aquí en esta imagen es un
claro claro ejemplo de el instrumento
que se le conoce como cromatógrafo bien
ese cromatógrafo como tal es el
instrumento que utiliza el fundamento de
toda la cromatografía pero ya utilizando
partes instrumentales y de tal forma que
se automatiza
y dentistas separaciones en primer lugar
no olvidemos que el proceso
cromatográfico es el primer en primera
instancia un proceso de separación y ya
posteriormente podemos hacer una
identificación y cuantificación
el equipo entonces se llama cromatógrafo
y el gráfico que nosotros obtenemos de
un cromatógrafo se denomina cromatógrafo
y veremos algunos ejemplos de prometo
grama en nuestra sesión aquí en la
figura observamos un cromatógrafo el
cual nos está dando el el formato back
dentro de él observamos algunos picos
nosotros identificamos aquí unos picos
vamos a hablar también de que
representan estos picos en verdad
esos picos son compuestos químicos que
están separados dentro de la columna
entonces bueno
la instrumentación de la cromatografía
surge en el momento que se le aplicó
presión a las columnas para que pudieran
efectuarse una separaciones más rápidas
y con mejor resolución ahí surge la
cromatografía líquida de alta resolución
y que comúnmente ustedes lo van a
encontrar en todas las fuentes que
consulten como hp lc que actualmente
haciendo un resumen h plc quiere decir
que mató grafía líquida de alta
resolución aunque en un inicio hacía
referencia a que era de alta presión
porque porque se aplicaba con diversos
partes como bombas la presión dentro de
la columna para favorecer la resolución
bien en esta diapositiva observamos una
figura la cual nos hace referencia a
unas columnas
no tenemos que olvidar nunca que la
cromatografía es esencialmente técnica
de separación
ok que nos puede separar prácticamente
todo obtenemos muy pocas limitantes de
las cuales no podemos separar nosotros
por medio de una columna cromatografía
cómo se separan ya hemos visto a través
de interacciones selectivas entre la
muestra y con la fase estacionaria
cuando se hace pasar una fase móvil a
través de ellos
este proceso cromatográfico ha sido
mejorado debido a la automatización de
esa automatización nos favorece la
separación de componentes disminuye
también el tiempo de separación un
proceso cromatográfico instrumental y es
decir utilizando ya equipos son
instrumentos lo podemos resumir en tres
etapas la primera que va a ser la
inyección de la muestra ok la segunda
etapa la cual va a ser el proceso de
separación
y ese proceso de separación donde se
efectúa dentro de la columna
finalmente la etapa
es de detección ok con la cual nosotros
podemos identificar y en sesiones
posteriores veremos cómo cuantificar
cada uno de estos compuestos que se sepa
entonces bueno en esta imagen que es lo
que observamos una muestra que se
inyecta dentro de la columna y simula
ser una muestra con coloración morada no
para fines pedagógicos nada más después
que va a pasar ya que está la muestra
dentro de la columna vamos a hacer pasar
una fase móvil y la interacción entre
esa fase móvil con la muestra y la fase
estacionaria va a provocar que existan
separaciones de los componentes de la
muestra
en esta figura conforme conforme
avanzamos a la derecha observamos que se
empiezan
a separar componentes individuales que
están presentes en la muestra
para que finalmente
el huyan es decir
van a salir de la columna y por medio de
un instrumento también vamos a ver
después qué instrumentos son que este
componente es perdón del instrumento son
que se conocen como detectores hay
diversos tipos de detectores no existe
un detector universal depende de lo que
nosotros queramos cuantificar es el
detector que vamos a utilizar de forma
general si queremos detectar a sus pares
pues es un detector específico en
comparación con si queremos detectar
polifenoles antioxidantes en alimentos
por mencionar algunos de los casos
dentro de esta instrumentación
los componentes que van eligiendo y que
van saliendo de la columna al pasar por
el detector lo que se ve héctor hace es
registrar una señal y esta señal al
final la a la va a interpretar por medio
de picos entonces cada pico nos va a
representar un compuesto estos picos en
donde los vamos a observar en el
programa programa que viene siendo el
gráfico que nosotros obtenemos de un
promotor
en estas figuritas que tenemos en esta
diapositiva podemos observar de forma
muy general lo que es un sistema
cromatográfico o los componentes que
lleva un sistema cromatográfico entre
ellos destacan lo que es el disolvente
que viene siendo el disolvente la fase
móvil ya lo hemos visto que después
algunos algunos este diagramas digamos
de de estos cromatógrafos nos dicen que
tiene un
des gasificado ok veremos por qué es
importante descalificar la fase móvil
pero de formas generales para que no se
dañen tanto la bomba como la columna
posteriormente ese desgasificar ahí si
viene o existe unas bombas las cuales
cuál es la función bueno precisamente
inyectar con cierta presión la fase
móvil dentro de la columna y después de
esta bomba
tenemos el inyector de la muestra que
está dado en esta parte acá en este otro
diagrama acá lo tenemos
también veremos qué tipos de inyecciones
hay inclusive hay algunos auto más
creadores que también veremos algunos
vídeos en sesiones posteriores y
posteriormente a esta inyección de
muestra que ocurre la parte medular de
la cromatografía que viene siendo la
columna
diversos tipos de columna vamos a tener
nosotros de acuerdo a lo que queramos
separar al igual como les mencioné que
no exista un detector universal en
cromatografía hamburgo exista una
columna universal tiene que ser
específica a las necesidades que
nosotros tengamos
posteriormente
vamos a atender de forma muy general un
detector
el cual va a estar recibiendo y
transformando la información de los
compuestos que sabemos en estos
compuestos van a interpretarse por medio
de un cromatógrafo que vienen siendo un
gráfico con picos de diversas alturas de
acuerdo a las concentraciones y a la
naturaleza de los componentes que
nosotros estemos separando de nuestra
muestra
ahora bien
en cromatografía líquida se conoce
dos modos de cromatografía en dos fases
y una conocida como fase normal y otra
con fase reversa sí a que hace
referencia a esto bien a la polaridad
que utilizamos tanto de la fase móvil
como de la fase estacionaria
observamos aquí en la diapositiva que en
el modo normal o en la fase normal
la partición de líquido líquido la fase
estacionaria es de naturaleza polar ok y
se utiliza una fase móvil de naturaleza
no polar existiendo muchísimos ejemplos
no uno de ellos bueno el hexano podemos
utilizar el té de petróleo o cualquier
éste
cualquier hidrocarburo que generalmente
se consideran no polares
esto favorece la retención de compuestos
polares
y la ilusión de compuestos no polares
a esto se le denomina fase normal si
esta parte de favorecer la retención de
compuestos polares y que luchan los
compuestos no polares pareciera de
momento y medio confuso pero es muy
sencillo de entender vamos a ver en
diapositivas más a ver la impresión a
pequeña animación a qué se refiere esto
y por qué es que se quedan retenidos los
compuestos polares en una fase normal
mientras que en la fase reversa es todo
lo contrario es decir en una fase
reversa la fase estacionaria de la
cromatografía es de naturaleza no polar
y la fase móvil es de naturaleza polar
sin pudiéndose utilizar alcohol es agua
mezclas de ellos etcétera etcétera el
punto es que va a tener una naturaleza
polar la fase móvil y esto va a provocar
que los compuestos no polares sean
retenidos mientras que los compuestos
polares
sean fluidos o sean arrastrados por la
fase móvil y esta es la denominada fase
reversa en cromatografía y que de forma
mi experiencia es la que más se utiliza
en cromatografía la fase de reversión
observamos también los en las dos
figuras de abajo de la presentación dos
ejemplos claros de un cromatógrafo que
componentes identificamos nosotros en un
cromatógrafo bien existe un tiempo en
este caso minutos
normalmente se expresa en minutos ampay
algunas columnas y una técnica que se
llama h plc en la cual son prácticamente
segundos en los que se separan los
componentes o menos de cinco minutos
tenemos toda la separación pero también
tenemos separaciones de forma general
estar dadas que pueden oscilar una hora
de análisis sobre separación entonces
tenemos el tiempo como uno de los
componentes de un croma programa también
tenemos dependiendo del detector
una absorban cya en este caso observamos
que la respuesta viene siendo una
corriente
esa corriente que la genera en un
detector específico que está absorban
cya es muy posiblemente un detector
conocido como arreglo de diodos o
detector ultravioleta en el cual me dice
que a 280 nanómetros
yo tengo diferentes absorban cias
ocasionada por cada uno de estos picos o
estas señales que no perdamos de vista
que químicamente son compuestos que se
están separando dentro de la columna y
que
el detector los está registrando
estos detectores los veremos a detalle
existen detectores de índice de
refracción también de pulsos am pero
méxico ultravioleta arreglos de diodos
dependiendo las naturales aquí en el día
en el cromato grama del lado derecho
observamos que la separación se está
efectuando para diversos azúcares y no
si todo el distrito
manny todo el sorbitol si hasta la
sacarosa en la cual fluye a los cercanos
a los 34 minutos
es decir a cada sacarosa tenemos que se
está obteniendo la parte central del
pico y ese sería su tiempo de migración
bien entonces en específico ya sabemos
que existen dos fases la fase normal y
la fase de reversa siendo la fase
reversa de las que más son utilizadas en
la cromatografía de forma resumida la
fase estacionaria es a polar y la fase
móvil es polar y esa es la
característica principal de una
cromatografía en fase reversa no se les
olviden los compuestos más retenidos son
los más polares ok por qué porque granos
es que son los que se retienen durante
mayor tiempo bueno yo creo que todos en
algún momento han escuchado
que lo polar dice el globo polar y lo no
polar disuelve lo no polar si ese es el
origen de la de por qué se quedan más
tiempo en la columna en el paso de la
fase reversa
los compuestos a polares porque porque
estamos haciendo pasar sobre la columna
una fase móvil polar y entonces no va a
tener digamos le hacía afinidad estos
compuestos a polares con esta fase de
móvil polar por ponerles un ejemplo
burdo pero para que lo entiendan es como
si tuviéramos aceite que tiene un aceite
vegetal que está hecho de diversos
ácidos
orgánicos son de naturaleza no polares
oa polares también llamados y si
utilizamos de fase móvil algo polar como
por ejemplo el agua vuelve a no ustedes
creen que esa fase móvil va a arrastrar
a los palos este aceite es que tengamos
dentro de la columna no esa fase móvil
de naturaleza polar precisamente va a
arrastrar a a luiz en primer lugar los
compuestos de naturaleza polar es decir
los que sean afines a ella mientras que
ya una vez que leyeron todos los
compuestos polares
nosotros podemos cambiar el gradiente de
la fase móvil y arrastrar a horas y
entonces los compuestos no polares
aquí nos menciona que la selectividad se
controlan fundamentalmente con la
composición de la fase móvil especial en
una la práctica no crean ustedes que si
no tenemos una separación de tres
compuestos vamos a empezar a cambiar la
columna no sólo pase usted lo que se
empieza a cambiar va a modificar es la
fase móvil es decir se puede implementar
polaridades o disminuir la polaridad de
la fase móvil algunos autores le
denominan a esto hacer series él u otro
picas es decir para ver para probar las
diferentes polaridades y cómo influyen
cada uno de estos componentes
[Música]
para obtener una fase móvil de fuerza de
ilusión óptima si se ensayan mezclas de
comúnmente en etanol a 2000 o pedro
forana en agua etcétera etcétera et el
punto es jugar con esas polaridades que
tienen la fase móvil para favorecer
nosotros la separación de los
componentes ahora
fase estacionaria estamos diciendo que
es una es la naturaleza no polar una
fase estacionaria muy común que se le
conoce en el análisis instrumental en la
cromatografía evidentemente es la
denominada c18 ok
esta cromatografía o esta fase
estacionaria perdón se 18 hace
referencia a que en nuestra fase
estacionaria
tiene unidos por medio de modificaciones
químicas o tratamientos químicos que se
le hizo tiene unidos grupos químicos de
18 átomos de carbono y entonces al tener
nosotros 18 átomos de carbono que es lo
que estamos generando que la fase
estacionaria tenga una naturaleza no
polar es como si tuviéramos
hidrocarburos
en la superficie de esa fase
estacionaria ok y aquí tenemos dos
compuestos de ejemplos el benzopireno y
el sulfato de estilo de estos dos
compuestos el sulfato de tilo
es el que tiene una naturaleza o es más
polar digámoslo así simplemente en
comparación con el benzopireno entonces
en una cromatografía en fase reversa el
sulfato de tilo valdría primero de la
columna es decir nosotros lo
detectaríamos primero en el cromato
grama sería el primer tipo que
obtuviéramos en comparación con el
benzopireno que es
- polar y que estaría un mayor tiempo
retenido dentro de la columna y que
entonces en un croma programa sería el
segundo pico que obtuviéramos en
tardaría más tiempo en el wef este
benzopireno y todo gracias a la
selectividad que existe entre la fase
estacionaria la fase móvil y los
componentes que nos interesan se parte
bien por el otro lado en la
cromatografía en fase normal que a
diferencia de la fase de reversa la fase
estacionaria es de naturaleza polar y la
fase móvil de naturaleza a polar 1 polar
las fases estacionarias se obtienen
haciendo reaccionar químicamente es
decir por tratamientos químicos los
centros y la no des activos de la sílice
con diversos tratamientos en uno de los
compuestos que principalmente hacen
reaccionar con la sílice es el trial
kill clorofila no lo cual genera una
fase estacionaria de naturaleza polar
la retención también como la falsa
reversa tiene lugar en esa especie de
capa líquida que va a estar
y depositada químicamente como
consecuencia de la distinta sólo me
libra relativa de la fase estacionaria
que en este caso en la fase normal te
damos que es de naturaleza polar y de la
fase móvil que es a polar donde él
analizó menos polar será el primero que
se luche y el más polar va a ser el
último en el oír es decir va a ser el
último en salir de la columna y si
estamos hablando de un la parte
instrumental es decir de que estamos
utilizando un cromatógrafo web en
nuestro producto grama bien
él analizó menos polar lo estaríamos
obteniendo en los primeros minutos en
mientras que el más polar va a ser el
pico con un tiempo de erupción más alto
bien para finalizar me gusta incluir les
alguna pequeña animación en esta en esta
ocasión
darle créditos al canal de youtube
mister simple science el cual tiene un
pequeño vídeo totalmente didáctico no no
no creen que es así de fácil
de lo que ocurre en la realidad pero
pues nos sirve para poder hacer un
resumen de lo que nosotros estamos
viendo en este tema directo marco del
sil
entonces vamos a
observar
este vídeo no tiene no tiene sonido no a
los otros entonces bueno en la fase aquí
nos hace la animación de lo que ocurre
en una fase normal en el cual la fase
móvil es de naturaleza no polar mientras
que la fase estacionaria aquí esté
coloreada de color azul nos viene siendo
polar
menciona que la columna está llena con
partículas de sílice
la síndica utiliza como tales de nada
la cíclica como tales de naturaleza
polar
y entonces existe una interacción entre
los compuestos polares de nuestra
muestra con esa fase estacionaria
permitiendo que el huyan primero
aquellos no polares
mientras que en la fase reversa ya
ocurre lo contrario es decir la fase
móvil es polar la fase estacionaria va a
ser de naturaleza no polar también
denominada hidrofóbica
y en este caso tenemos que la basílica
ha sido modificada con estas moléculas
que yo les decía denominadas c18 bueno
la más común y seriación no puede ir
desde ese 8 hace referencia al número de
carbonos que tiene ésta
esta fase estacionaria y eso lo
convierte en una fase estacionaria de
naturaleza no polar por lo tanto los
compuestos no polares van a
interaccionar a interaccionar más fuerte
con la fase estacionaria y esto que va a
provocar que sean los últimos en eludir
bien bueno pues hasta acá está esta
presentación espero que les haya quedado
claro si lo el fundamento de la
instrumentación que veremos a ver
también en posteriores sesiones cada uno
de los componentes del cromatógrafo y
ejemplos aplicativos de la cromatografía
tienen alguna duda no dejen no olviden
empezarlo aquí en los comentarios o a mi
correo
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