QUÍMICA ANALÍTICA: Cromatografía (parte 2)

Summary

En este video, se explica detalladamente el proceso de cromatografía, enfocándose en la cromatografía en columna, la cromatografía líquida y la cromatografía de intercambio iónico. Se abordan temas como la separación de compuestos según su polaridad, el uso de diferentes disolventes, la importancia del tiempo de retención y cómo la presión afecta la eficiencia de la separación. Además, se presenta la cromatografía de alta resolución (HPLC) y sus aplicaciones en diversas industrias. El video también incluye una demostración práctica de purificación mediante cromatografía en columna, mostrando cómo se separan los compuestos fluorescentes.

Takeaways

• 😀 La cromatografía en columna se usa para la separación y purificación de compuestos, utilizando una fase estacionaria comúnmente hecha de sílice, alúmina o flor y zinc.
• 😀 Los compuestos se separan en la columna cromatográfica según su polaridad: los menos polares salen primero, mientras que los más polares quedan retenidos por más tiempo.
• 😀 El tiempo de retención es una característica única de cada compuesto en la cromatografía y depende de varios factores como el tipo de absorbente, disolvente y presión.
• 😀 La cromatografía en columna puede realizarse por gravedad o a media presión, lo que mejora el flujo de disolvente y la separación de compuestos.
• 😀 El disolvente utilizado en la cromatografía debe ser elegido cuidadosamente para lograr una buena separación de los componentes de la muestra.
• 😀 La cromatografía en alta resolución (HPLC) utiliza presión para aumentar la velocidad de los compuestos y mejorar la resolución de la separación.
• 😀 Los disolventes más comunes en la cromatografía HPLC son el agua, el metano y el acetonitrilo, que pueden contener aditivos para mejorar la separación.
• 😀 En la cromatografía de fase inversa, la fase estacionaria es apolar y la fase móvil tiene una polaridad moderada, lo que afecta el tiempo de retención de los compuestos.
• 😀 El pH de la fase móvil influye en la retención de los compuestos, y se utilizan tampones para controlar el pH y mejorar la separación.
• 😀 La cromatografía de intercambio iónico se basa en la atracción electrostática entre iones y cargas inmovilizadas en la fase estacionaria, y se utiliza para aplicaciones como purificación de agua y proteínas.

Q & A

¿Qué es la cromatografía en columna?

La cromatografía en columna es un método utilizado para separar y purificar compuestos, donde la fase estacionaria (como el sílice o la alúmina) se coloca dentro de una columna de vidrio, y la fase móvil arrastra los compuestos a través de ella para separarlos en función de sus propiedades químicas.

¿Qué materiales se usan comúnmente como fase estacionaria en la cromatografía en columna?

Los materiales más comunes utilizados como fase estacionaria en cromatografía en columna son el sílice, la alúmina y el florisil.

¿Cómo influye la polaridad de los disolventes en la cromatografía en columna?

La polaridad de los disolventes afecta la velocidad con la que los compuestos se desplazan por la columna. Los compuestos menos polares salen primero, mientras que los más polares se retienen más tiempo, lo que requiere ajustar la polaridad del disolvente para una correcta separación.

¿Qué es el tiempo de retención en cromatografía?

El tiempo de retención es el tiempo que tarda un compuesto en pasar por la columna cromatográfica. Es una propiedad característica que depende de la naturaleza del compuesto, la fase estacionaria, la fase móvil, y otros factores como la presión o el diámetro de la columna.

¿Cuáles son las diferencias entre cromatografía por gravedad y a presión media?

En la cromatografía por gravedad, el flujo de la fase móvil se produce por la acción de la gravedad, mientras que en la cromatografía a presión media, se utiliza aire comprimido para acelerar el flujo de la fase móvil a través de la columna.

¿Cómo se determina el disolvente adecuado para una cromatografía en columna?

Se realiza una cromatografía en capa fina de la muestra para analizar el comportamiento de los compuestos. El disolvente debe producir una buena separación de los componentes, y se puede usar una mezcla de disolventes con polaridad variable para mejorar la separación.

¿Qué es la cromatografía de alta resolución (HPLC)?

La cromatografía de alta resolución (HPLC) es un tipo de cromatografía en columna que utiliza presión para hacer pasar disolventes a alta velocidad a través de la columna, mejorando la resolución y la velocidad de separación de los compuestos en la muestra.

¿Qué factores afectan la retención en la cromatografía de fase inversa?

En la cromatografía de fase inversa, los factores que afectan la retención son la polaridad de los compuestos, el pH de la fase móvil y la hidrofobicidad de los compuestos. Las moléculas menos polares tienen mayor tiempo de retención.

¿Qué es la cromatografía de intercambio iónico y cómo funciona?

La cromatografía de intercambio iónico se basa en la atracción electrostática entre los iones de la muestra y los iones inmovilizados en la fase estacionaria. Los iones con carga opuesta son retenidos por la columna, mientras que los iones con la misma carga son excluidos.

¿En qué aplicaciones se utiliza la cromatografía de intercambio iónico?

La cromatografía de intercambio iónico se utiliza ampliamente en la purificación de agua, concentración de componentes traza, purificación de proteínas, carbohidratos y oligosacáridos, entre otros.