Técnicas de siembra- Microbiología

Sección de Laboratorios y Equipos UDENAR

3 Nov 202014:25

Summary

TLDREste vídeo tutorial detalla técnicas de cultivo microbiológico, incluyendo la desinfección de áreas de trabajo, selección y transferencia de bacterias como E. coli mediante técnicas de estrella y agotamiento, así como la siembra en medios sólidos y líquidos. Se aborda también la incubación y observación de crecimiento, con énfasis en la esterilización de herramientas y la identificación de cepas. Además, se incluye la siembra de hongos, como Fusarium sp., destacando la importancia de la esterilidad y el manejo de muestras para un cultivo exitoso.

Takeaways

🔍 Se debe desinfectar el área de trabajo con alcohol al 70% antes de comenzar con las técnicas de cultivo.
🌡️ La incubación de los cultivos se realiza a 37 grados centígrados durante 24 horas para bacterias como E. coli.
🔥 El uso de un mechero para esterilizar las asas es esencial para evitar contaminación durante el proceso de cultivo.
🌟 La técnica de estrellado se utiliza para dispersar las colonias bacterianas en el agar nutritivo.
📝 Es importante marcar las cajas Petri con la cepa, la fecha y el medio de cultivo para identificación posterior.
🔬 Se pueden observar patrones de crecimiento y coloración en los cultivos después de la incubación.
🍄 Para cultivar hongos como Fusarium sp., se utilizan técnicas similares pero con un tiempo de incubación extendido a 8 días.
🔪 Se cortan fragmentos de hongo periféricos para su cultivo en medios de agar invertido.
🧫 El cultivo en caldo nutritivo se realiza insertando la asa esterilizada directamente en el tubo de caldo.
📋 Se sellan las cajas Petri con papel para mantener un ambiente estéril durante la incubación.

Q & A

¿Qué es lo primero que se debe hacer antes de comenzar con las técnicas de cultivo en el video?
-Primero se debe desinfectar toda el área de trabajo con alcohol al 70%.
¿Cómo se selecciona la cepa de E. coli para el cultivo?
-Se selecciona un cultivo de E. coli donde se evidencia la formación de colonias.
¿Qué herramienta se utiliza para esterilizar el asa antes de tomar una colonia de E. coli?
-Se utiliza un mechero para esterilizar una asa redonda hasta que se ponga roja.
¿Cómo se realiza la técnica de estrellado en un agar nutritivo?
-Se toma una caja de agar nutritivo sin cultivar, se hace la primera estrella, se tapa la caja y se gira, y se inicia la siguiente estrella desde el final de la anterior.
¿Cuál es el propósito de sellar la caja petri con papel mini p después de realizar el estrellado?
-El papel mini p se utiliza para sellar la caja petri y evitar la contaminación durante la incubación.
¿Cuánto tiempo se incuba la placa petri con la cepa de E. coli a 37 grados centígrados?
-La placa petri se incuba por 24 horas a 37 grados centígrados.
¿Qué se hace después de seleccionar un cultivo de coli para la siembra masiva?
-Se toma una asa redonda, se esteriliza en el mechero, se encierra la caja pétriz cerca del mechero y se encierra la asa en una sección de lagar donde no hayan colonias.
¿Cómo se realiza la siembra en medio solido?
-Se selecciona un cultivo de E. coli, se toma un asa recta y se esteriliza en el mechero. Luego se abre el tubo de medio, se inserta el asa lo más recto posible y se planea el tubo para cerrar.
¿Qué se debe hacer para asegurar que la cepa de hongos en la siembra en medio solido esté en contacto directo con el agar?
-Se coloca el fragmento de hongo en el centro del medio invertido de modo que el hongo quede en contacto directo con el agar.
¿Cuánto tiempo se incuba la placa petri con la cepa de hongos a temperatura ambiente?
-La placa petri con la cepa de hongos se incuba por 8 días a temperatura ambiente.

Outlines

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🔬 Procedimiento de Inoculación y Cultivo de E. Coli

Este párrafo describe un método para el cultivo de bacterias E. Coli. Comienza con la desinfección de la zona de trabajo con alcohol al 70%. Se selecciona una cepa de E. Coli que muestra formación de colonias. Se utiliza una inoculadora redonda para transferir una colonia a un plato de agar nutritivo, siguiendo un patrón de estrellas. El plato se sella y se incuba durante 24 horas a 37 grados centígrados. Posteriormente, se esteriliza la inoculadora y se marca el plato con la identificación de la cepa y la fecha.

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🌡 Observación y Análisis de Cultivos de E. Coli

Este segmento detalla el proceso de observación de los cultivos de E. Coli después de la incubación. Se selecciona una cepa que muestra formación de colonias y se utiliza una inoculadora redonda para replicar la cepa en un patrón de líneas. Se enfatiza la importancia de esterilizar la inoculadora entre cada paso para evitar la contaminación. Los cultivos se incuban nuevamente durante 24 horas a 37 grados centígrados y se observan los resultados.

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🍄 Cultivo de Hongos y E. Coli en Diferentes Medios

En este párrafo se describen diferentes técnicas de cultivo para bacterias E. Coli y hongos. Se menciona el cultivo de E. Coli en caldo nutritivo y la técnica de inyección para transferir la cepa. Además, se explica el cultivo de hongos Fusarium sp., donde se selecciona una porción joven del hongo y se coloca en un medio de cultivo. Los cultivos se incuban a temperatura ambiente durante 8 días para observar el crecimiento y desarrollo de los organismos.

Mindmap

Keywords

💡Desinfectar

Desinfectar se refiere al proceso de eliminar o reducir significativamente el número de gérmenes presentes en una superficie o en el aire. En el video, es un paso crucial al comienzo para asegurar que el área de trabajo esté libre de contaminación, lo que es esencial para el éxito de los cultivos microbiológicos. Se menciona que se debe usar alcohol al 70% para desinfectar toda el área de trabajo.

💡E. coli

Escherichia coli (E. coli) es una bacteria comúnmente encontrada en el intestino de los mamíferos, incluyendo humanos. En el contexto del video, E. coli se utiliza como un cultivo modelo para demostrar técnicas de cultivo microbiológico. Se selecciona un cultivo de E. coli donde se evidencia la formación de colonias para iniciar el proceso de siembra.

💡Agar

El agar es un gelificante derivado de algas marinas que se utiliza en biología para solidificar medios de cultivo. Es fundamental en la microbiología para el crecimiento de bacterias y otros microorganismos. En el video, se menciona el uso de agar nutritivo para el cultivo de E. coli y otros microorganismos.

💡Estéril

La esterilización es el proceso de destruir todos los microorganismos, incluyendo bacterias, hongos y esporas, presentes en un objeto o superficie. En el video, se describe el proceso de esterilizar herramientas como asas, utilizando el fuego para alcanzar temperaturas lo suficientemente altas para matar a cualquier microorganismo que pudiera estar presente.

💡Inoculación

La inoculación es el proceso de introducir microorganismos en un medio de cultivo para su crecimiento y reproducción. En el video, se muestra cómo se realiza la inoculación mediante el uso de asas esterilizadas para transferir colonias de E. coli a un medio de cultivo.

💡Incubación

La incubación es el proceso de mantener condiciones controladas de temperatura y humedad para fomentar el crecimiento de microorganismos en un medio de cultivo. En el video, se menciona que los cultivos se incuban a 37 grados centígrados durante 24 horas, lo que es típico para el crecimiento de E. coli.

💡Cepa

Una cepa es un grupo de microorganismos o plantas que provienen de una misma fuente original y que poseen características genéticas similares. En el video, se hace referencia a la identificación de cepas específicas de E. coli y otros microorganismos para el cultivo.

💡Hongos

Los hongos son un grupo de organismos eucarioticos que incluyen hongos verdaderos, levaduras y champiñones. En el video, se menciona el cultivo de hongos como Fusarium sp., lo que indica que también se cubren técnicas de cultivo para este grupo de microorganismos.

💡Medio de cultivo

Un medio de cultivo es una preparación que proporciona los nutrientes y las condiciones adecuadas para el crecimiento de microorganismos. Puede ser un agar, un caldo o cualquier otro tipo de sustrato. En el video, se describen diferentes tipos de medios de cultivo, como los agars nutritivos y los caldos, utilizados para el crecimiento de diferentes microorganismos.

💡Siembra en caldo

La siembra en caldo es una técnica de cultivo en la que los microorganismos son introducidos en un medio líquido que proporciona nutrientes. En el video, se describe cómo se realiza la siembra en caldo para E. coli, lo que implica agitar la muestra en el caldo para que se desprenda de la asa y se distribuya uniformemente.

💡Observación

La observación es el proceso de examinar y analizar los cultivos microbiológicos después de la incubación para evaluar su crecimiento y características. En el video, se menciona que después de la incubación, los cultivos se observan para determinar si han crecido y desarrollado correctamente.

Highlights

Inicio del vídeo con la desinfección del área de trabajo con alcohol al 70%.

Selección de un cultivo de E.coli para demostrar la formación de colonias.

Esterilización de la asa redonda en el mechero hasta que se ponga roja.

Abierto la caja de agar Pétriz cerca del mechero para evitar contaminación.

Tomado una colonia de E.coli con la asa esterilizada y transferida a un agar nutritivo.

Inicio de la técnica de estrellado en el agar para dispersión de la bacteria.

Cierre de la caja de agar Pétriz y rotación para propagar la bacteria uniformemente.

Esterilización de la asa después de cada uso para evitar la contaminación cruzada.

Marcaje de la caja Pétriz con la cepa, fecha y medio de cultivo para identificación.

Incubación de las cajas de agar Pétriz a 37 grados centígrados por 24 horas.

Observación de la siembra masiva en cultivos de E.coli.

Selección de un cultivo de E.coli con formación de color para la siembra en caldo nutritivo.

Transferencia de la bacteria de la placa de agar a un tubo de caldo nutritivo.

Esterilización y manipulación de la asa para evitar la contaminación en la siembra en caldo.

Incubación del tubo de caldo nutritivo a 37 grados centígrados por 24 horas.

Selección de un cultivo de hongos Fusarium sp. para la siembra en agar.

Esterilización de la asa recta y selección de un fragmento periférico del hongo.

Inserción del fragmento de hongo en el medio de agar y incubación a temperatura ambiente por 8 días.

Observación final de los cultivos de hongos después de la incubación.