Preparación medios de cultivo - Microbiología

Summary

Este script detalla el proceso de preparación de medios de cultivo, esenciales para el crecimiento y multiplicación de microorganismos en laboratorios. Se discuten diferentes tipos de medios, incluyendo los líquidos y sólidos, y cómo se utilizan para aislar y estudiar bacterias específicas. Los medios se clasifican como sintéticos o naturales, simples o enriquecidos, y selectivos o diferenciales, cada uno con usos y preparaciones específicas. El procedimiento práctico incluye cálculos para la cantidad de medio a preparar, la esterilización y el servicio de los mismos en diferentes recipientes como cajas Petri y tubos de vidrio. La esterilización es crucial y se realiza en un autoclave, con medidas de seguridad y control de presión y temperatura. Finalmente, se describe la transferencia y manipulación de los medios a una cabina de flujo laminar para evitar la contaminación y asegurar la calidad del cultivo.

Takeaways

• 🌱 Los medios de cultivo son sustrato o solución de nutrientes donde crecen y se multiplican microorganismos en laboratorio.
• 🔬 El objetivo es aislar y identificar diferentes especies bacterianas y realizar estudios complementarios.
• 🍲 Los medios de cultivo pueden ser líquidos o sólidos, y el agar es una sustancia polisacáridos que proporciona solidez.
• 🧪 Los medios sintéticos están compuestos por productos químicos conocidos y se usan para estudios metabólicos.
• 🌿 Los medios naturales o no definidos se preparan con sustancias naturales, como de origen animal o vegetal.
• 📈 Los medios simples tienen los requisitos nutricionales básicos para el desarrollo de bacterias.
• 📒 Los medios enriquecidos se añaden elementos tales como sangre, suero, huevo, glucosa y vitaminas.
• 🚫 Los medios selectivos contienen compuestos químicos nocivos para bacterias indeseadas.
• 🔍 Los medios diferenciales permiten observar propiedades de crecimiento específicas para diferenciar especies bacterianas.
• ⚖️ La preparación de los medios de cultivo requiere cálculos precisos para el volumen deseado.
• 🔥 La esterilización es un proceso crucial que implica el uso de un autoclave para matar todas las bacterias presentes.
• 🧊 Una vez esterilizados y solidificados, los medios se refrigeran y se almacenan para su uso posterior.

Q & A

¿Qué es un cultivo microbiológico y para qué se utilizan?

Un cultivo microbiológico es un sustrato o solución de nutrientes en los que crecen y se multiplican los microorganismos en el laboratorio. Se utilizan con el objetivo de aislar diferentes especies bacterianas con el fin de identificarlas y realizar estudios complementarios.

¿Cómo se clasifican los medios de cultivo según su consistencia?

Los medios de cultivo se clasifican en líquidos, que contienen nutrientes y a veces sustancias que mantienen el pH estable, y sólidos, que se obtienen debido a la presencia de agar, un polisacáridos que se obtiene de algas marinas.

¿Qué son los medios sintéticos o químicamente definidos?

Los medios sintéticos o químicamente definidos son aquellos compuestos por productos químicos conocidos y se utilizan para realizar estudios metabólicos específicos.

¿Cuáles son algunos ejemplos de medios naturales o químicamente no definidos?

Algunos ejemplos de medios naturales o químicamente no definidos incluyen la leche, el papa zanahoria y otros sustraños que provienen de origenes animales o vegetales.

¿Qué son los medios enriquecidos y para qué se utilizan?

Los medios enriquecidos son aquellos que son simples o comunes pero a los que se les añaden ciertos elementos como sangre, suero, huevo, glucosa, vitaminas, etc., lo que permite el aporte de factores de crecimiento o sustancias que neutralizan agentes inhibidores del crecimiento en bacterias exigentes nutricionalmente.

¿Cómo se consiguen los medios selectivos?

Los medios selectivos se consiguen añadiendo compuestos químicos nocivos para algunas bacterias cuyo crecimiento no es de interés o mediante una alteración de las condiciones físicas del medio.

¿Qué son los medios diferenciales y cómo funcionan?

Los medios diferenciales son aquellos que contienen sustancias que permiten que sólo crezcan ciertas bacterias y, al actuar sobre algunas de las sustancias adicionadas, permiten observar ciertas propiedades de crecimiento que ayudan a diferenciar sus colonias de otras especies.

¿Cómo se almacenan los medios de cultivo y qué información es crucial en su etiqueta?

Los medios de cultivo se almacenan en frascos plásticos con una etiqueta que contiene información sobre el medio, como su composición, fecha de vencimiento, pictogramas de peligro y la fórmula de preparación, que es crucial para el cálculo del volumen deseado a preparar.

¿Cómo se realiza el cálculo de los gramos necesarios para preparar un volumen específico de medio de cultivo?

Se utiliza la fórmula de la regla de 3, teniendo en cuenta el volumen que se desea preparar y la cantidad de medio necesaria para mil mililitros, para calcular la cantidad de medio necesaria para el volumen deseado.

¿Qué pasos se siguen para preparar los medios de cultivo?

Se pesa el medio en papel aluminio, se disuelve en agua destilada, se calienta y se agita continuamente hasta el primer hervor, se retira del calor y se repite el proceso tres veces, se tapa y se esterILIza en autoclave.

¿Cómo se realiza la esterilización de los medios de cultivo en autoclave?

Se verifica el nivel del agua, se conecta la autoclave, se ajusta la temperatura y la presión, se mantiene en condiciones de presión y temperatura por 20 minutos, se espera a que la presión baje, se abre la válvula de control de aire y se saca la carga esterilizada.

¿Cómo se sirven los medios de cultivo en las cajas Petri y tubos?

Se abren las cajas Petri y los tubos cerca del mechero, se flamea la boca del tubo de inyección, se sirve el medio y se dejan solidificar. Una vez solidificados, se cierran y se refrigeran.