Preparación de muestras para análisis microbiológicos | | UPV

Universitat Politècnica de València - UPV

12 Oct 201306:45

Summary

TLDRAna González, profesora de Biotecnología en la Universidad Politécnica de Valencia, presenta un tutorial para preparar muestras para análisis microbiológicos. Cubre cómo tomar, pesar y diluir muestras, realizar el triturado y homogeneizar, y preparar diluciones seriadas decimales. Detalla el uso de equipos como una balanza, mechero Bunsen, pinzas y espátulas, y un triturador homogeneizador. Expone la importancia de mantener condiciones asépticas y evitar la destrucción de microorganismos durante el proceso.

Takeaways

🧪 El objetivo principal es preparar muestras para análisis microbiológicos.
⚖️ Se debe aprender a tomar, pesar y diluir muestras correctamente para análisis posteriores.
🛠️ Los materiales necesarios incluyen balanza, mechero Bunsen, pinzas, espátulas y un triturador homogeneizador (Stomacher).
🔥 El mechero Bunsen se utiliza para trabajar en condiciones asépticas y esterilizar el material.
🌡️ Es importante esterilizar pinzas y espátulas con alcohol y flamearlas antes de su uso.
🥄 Las muestras deben ser representativas de la totalidad del alimento, considerando su composición.
💧 El diluyente debe añadirse en condiciones estériles y no alterar la biota de los alimentos.
⚙️ El triturador homogeneizador golpea la muestra para liberar las bacterias sin destruirlas.
🔄 Las diluciones decimales se preparan transferiendo un mililitro de la suspensión madre a tubos con nueve mililitros de agua destilada estéril.
⏳ Los análisis deben realizarse dentro de las dos horas siguientes a la preparación de las diluciones para obtener recuentos precisos.

Q & A

¿Quién es Ana González y qué profesión ejerce?
-Ana González es profesora del departamento de biotecnología de la Universidad Politécnica de Valencia.
¿Cuál es el objetivo principal del objeto de aprendizaje descrito en el guion?
-El objetivo principal es enseñar a preparar muestras para análisis microbiológicos.
¿Cuáles son los objetivos de aprendizaje específicos mencionados en el guion?
-Los objetivos de aprendizaje incluyen aprender a tomar, pesar y diluir muestras para su análisis posterior, realizar el triturado y homogeneizar las muestras y preparar diluciones seriadas decimales para recuentos microbianos.
¿Qué herramientas se necesitan para la preparación de las muestras según el guion?
-Se necesitan una balanza, mechero Bunsen, pinzas, espátulas, bolsas para pesar la muestra y un triturador homogeneizador, como un triturador de placas o stomacher.
¿Cómo se debe trabajar durante la preparación de las muestras para mantener las condiciones asépticas?
-Trabajar cerca de la llama del mechero Bunsen, utilizando material estéril y evitando la contaminación.
¿Qué pasos se siguen para tomar una muestra representativa de alimentos?
-Se deben usar pinzas y espátulas esterilizadas, tomar una fracción representativa del alimento de la totalidad de la muestra, y considerar tomar fracciones de cada componente si la muestra está compuesta por varios tipos.
¿Qué es un diluyente y cómo se añade a la muestra?
-Un diluyente es un líquido que se utiliza para disolver o diluir la muestra. Se añade cerca de la llama del mechero Bunsen, flameando la boca del bote para mantener condiciones estériles.
¿Cuál es la importancia de realizar un triturado y homogeneizar la muestra?
-Es necesario para obtener una mezcla homogénea que deje a las bacterias en suspensión, y evitar la destrucción de los microorganismos por rotura de su membrana o por calentamiento excesivo.
¿Cómo se preparan las diluciones seriadas decimales y para qué sirven?
-Se transfiere un mililitro de la suspensión madre a un tubo con nueve mililitros de agua destilada estéril, se homogeneiza y se repiten los pasos para obtener más diluciones. Sirven para iniciar las determinaciones que requieran recuentos microbianos.
¿Cuál es la recomendación para el tiempo que debe transcurrir desde la preparación de las diluciones hasta el análisis?
-Los análisis no deberían demorarse más de dos horas desde la preparación de las diluciones.

Outlines

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🧪 Introducción a la preparación de muestras para análisis microbiológicos

Ana González, profesora del Departamento de Biotecnología de la Universidad Politécnica de Valencia, introduce los objetivos del aprendizaje: aprender a preparar muestras para análisis microbiológicos. Los objetivos incluyen tomar, pesar, diluir muestras, triturarlas y homogeneizarlas, y preparar diluciones seriadas decimales para recuentos microbianos. Se describen los materiales necesarios como la balanza, mechero Bunsen, pinzas, espátulas, bolsas de muestras, y un triturador homogeneizador. Se explica el procedimiento aséptico necesario para la toma de muestras, el uso de alcohol para esterilización y la importancia de una muestra representativa. Posteriormente, se detalla cómo añadir el diluyente sin alterar la biota del alimento, y cómo realizar una dilución uno a diez, utilizando diferentes diluyentes comunes en microbiología.

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🔬 Realización de diluciones seriadas para análisis microbiológicos

Se continúa con la descripción del procedimiento para realizar diluciones seriadas. González explica cómo transferir un mililitro de la suspensión madre a tubos con nueve mililitros de agua destilada estéril. Se enfatiza la importancia de flamear las bocas de los tubos para mantener condiciones estériles y desechar las puntas entre diluciones. Después de cada transferencia, se agita la mezcla para homogeneizarla antes de realizar la siguiente dilución. El proceso continúa hasta alcanzar el número deseado de diluciones. Finalmente, se recalca la importancia de una manipulación aséptica rigurosa, el uso de materiales estériles, y la necesidad de evitar el daño de los microorganismos para obtener una distribución homogénea en las diluciones. Las diluciones se deben analizar en menos de dos horas para evitar pérdida de precisión en los recuentos microbianos.

Mindmap

Keywords

💡Muestras

Las muestras son porciones representativas del alimento que se van a analizar microbiológicamente. En el video, se menciona la importancia de que estas sean representativas de la totalidad del producto, especialmente si contiene diferentes componentes, para asegurar que el análisis sea preciso y relevante.

💡Análisis microbiológico

Es el proceso de estudiar la biota o los microorganismos presentes en las muestras de alimentos. En el video, el objetivo es preparar las muestras de forma que se mantenga la integridad de los microorganismos para poder realizar recuentos precisos de las bacterias presentes.

💡Triturado y homogeneizado

Este proceso consiste en desintegrar físicamente el alimento para liberar los microorganismos y dispersarlos de manera uniforme en una solución diluyente. Se utiliza un triturador de paletas, como el stomacher, que golpea rítmicamente la muestra para obtener una mezcla homogénea, lo que es esencial para garantizar un análisis preciso.

💡Diluciones seriadas decimales

Las diluciones seriadas decimales son una técnica para reducir progresivamente la concentración de microorganismos en una muestra, diluyendo una parte en un factor de 1:10. En el video, se describe cómo se prepara una dilución tomando 1 ml de la suspensión madre y añadiéndolo a 9 ml de diluyente, repitiendo el proceso para lograr diluciones sucesivas.

💡Condiciones asépticas

Se refiere a la necesidad de evitar la contaminación durante el manejo de las muestras. En el video, se insiste en trabajar cerca de la llama de un mechero Bunsen y usar materiales estériles para asegurar que no se introduzcan microorganismos externos que puedan alterar los resultados del análisis.

💡Diluyente

Es el líquido utilizado para diluir las muestras sin alterar la cantidad ni la calidad de los microorganismos presentes. En el video se mencionan ejemplos como el agua de triptona con sal, la solución de Ringer 1/4 y el agua de peptona tamponada, que son diluyentes comunes en microbiología alimentaria.

💡Suspensión madre

Es la mezcla inicial de la muestra triturada y diluyente. En el video, se explica cómo se prepara una suspensión madre añadiendo una cantidad específica de diluyente a la muestra triturada, y luego se utiliza esta mezcla para realizar las diluciones decimales posteriores.

💡Recuento microbiano

Es el proceso de contar el número de microorganismos presentes en una muestra diluida. En el video, se hace referencia a la importancia de las diluciones seriadas para que el número de microorganismos en una muestra sea lo suficientemente bajo como para poder contarse en análisis posteriores.

💡Materiales estériles

Son herramientas que han sido desinfectadas para eliminar cualquier microorganismo que pueda interferir con el análisis. En el video, se enfatiza el uso de pinzas y espátulas esterilizadas mediante flameado en la llama de un mechero Bunsen para asegurar que no se contaminen las muestras.

💡Homogeneización

Es el proceso de mezclar completamente una muestra para asegurar que los microorganismos se distribuyan uniformemente en la solución diluente. Esto es crucial para obtener resultados precisos en el análisis microbiológico, ya que permite que los microorganismos estén bien distribuidos antes de hacer las diluciones.

Highlights

Ana González es profesora del departamento de biotecnología de la Universidad Politécnica de Valencia.

El objetivo del aprendizaje es preparar muestras para análisis microbiológicos.

Los aprendices aprenderán a tomar, pesar y diluir muestras para su análisis.

Se enseña cómo realizar el triturado y homogeneizar muestras.

Se explica cómo preparar diluciones seriadas decimales para recuentos microbianos.

Se requiere una balanza, mechero Bunsen, pinzas y espátulas para la toma de muestra.

Se necesita un triturador homogeneizador, como un triturador de placas o stomacher.

Se deben trabajar en condiciones asépticas y con material estéril.

Se describe el proceso de tarar la muestra con la balanza.

Se detalla cómo esterilizar herramientas con alcohol y fuego.

Se explica la importancia de tomar fracciones representativas de la muestra.

Se menciona la necesidad de añadir el diluyente en condiciones estériles.

Se describe el proceso de triturado y homogeneización utilizando el triturador de paletas.

Se resalta la importancia de evitar la destrucción de microorganismos durante el proceso.

Se detalla cómo realizar las diluciones seriadas decimales con agua destilada estéril.

Se indica la necesidad de trabajar en condiciones estériles al preparar las diluciones.

Se enfatiza la importancia de obtener una mezcla homogénea para una distribución equilibrada de microorganismos.

Se menciona que los análisis microbiológicos no deben demorarse más de dos horas después de preparar las diluciones.