anticuerpos policlonales y monoclonales

Cynthia GA

2 Mar 201508:19

Summary

TLDREste video explora las técnicas de inmunoensayo y la producción de anticuerpos, esenciales para diagnóstico en laboratorios de inmunología. Se explica cómo se generan anticuerpos policlonales y monoclonales mediante la inyección de antígenos en animales como ratones y conejos. A través de varios pasos, se producen anticuerpos que reaccionan con antígenos específicos. Además, se destacan técnicas de amplificación mediante enzimas, sustancias fluorescentes o radioactivas. El video también plantea preguntas clave para reforzar el conocimiento sobre el uso de estos anticuerpos en distintas técnicas diagnósticas, como la aglutinación y la inmunofluorescencia.

Takeaways

🔬 Los inmunoensayos son técnicas fundamentales en laboratorios de inmunología y otras áreas, utilizadas para determinar concentraciones de sustancias o células a través de la reacción antigeno-anticuerpo.
🐁 Se pueden obtener anticuerpos policlonales o monoclonales; los primeros son producidos generalmente en conejos y los segundos en ratones.
💉 La producción de anticuerpos comienza con la inyección de un antígeno en un animal de laboratorio para inducir una respuesta inmunológica.
🔄 Se realizan inmunizaciones secundarias para obtener una respuesta inmunológica de memoria más potente, lo que resulta en una mayor producción de anticuerpos.
🧬 Los anticuerpos policlonales son una mezcla dirigida hacia diferentes epítopos del antígeno, mientras que los monoclonales son específicos de un único epitopo.
🧪 La fusión de células B con células tumorales (mieloma) da lugar a hibridomas, que son capaces de producir anticuerpos y crecer indefinidamente.
🌡 Se utiliza un medio selectivo para diferenciar a las células fusionadas (hibridomas) de las no fusionadas, permitiendo la selección de las células productoras de anticuerpos.
🧫 A través de la técnica de dilución límite, se identifican y aíslan clones específicos de hibridomas que producen anticuerpos de interés.
🔎 Se realizan inmunoensayos para evaluar la reacción de los clones con el antígeno de interés, determinando así los anticuerpos monoclonales adecuados para la técnica en desarrollo.
📈 Los anticuerpos monoclonales se pueden producir en grandes cantidades a través de la cultivación de hibridomas en incubadores o la inyección en líquido ascítico.

Q & A

¿Qué es un inmunoensayo y por qué es importante en el laboratorio de inmunología?
-Un inmunoensayo es una técnica que utiliza la reacción entre un antígeno y un anticuerpo para determinar concentraciones de distintas sustancias o células. Es fundamental en el laboratorio de inmunología porque permite la detección y cuantificación de antigenes específicos.
¿Cuáles son las características físicas que pueden ser utilizadas en técnicas de precipitación y aglutinación?
-Las características físicas utilizadas en técnicas de precipitación y aglutinación incluyen la capacidad de dispersar la luz, la turbidez que producen en suspensión y su capacidad de precipitar o aglutinar.
¿Cómo se pueden combinar los anticuerpos con otras sustancias para ampliar su uso?
-Los anticuerpos pueden combinarse con enzimas para realizar ensayos enzimáticos, con sustancias radioactivas, aunque estas técnicas están en desuso, o con sustancias fluorescentes para realizar exámenes al microscopio o mediante fluorímetros o citómetros.
¿Qué animales se utilizan comúnmente para la producción de anticuerpos policlonales y monoclonales?
-Para obtener anticuerpos monoclonales se utiliza generalmente un ratón, mientras que para anticuerpos policlonales se suelen emplear conejos, aunque también se pueden usar otras especies como cabras o ovejas.
¿Cuál es el objetivo de inyectar un antígeno en un animal de laboratorio?
-El objetivo es inducir una respuesta inmunológica en el animal, lo que resultará en la producción de anticuerpos específicos contra el antígeno inyectado.
¿Qué sucede después de la primera inmunización con un antígeno?
-Después de la primera inmunización, se espera que el animal produzca una respuesta inmunológica primaria. A los 7 a 10 días, se realiza una segunda inmunización para obtener una respuesta secundaria de memoria más potente.
¿Cómo se obtienen los anticuerpos monoclonales a partir de la sangre del animal?
-Después de la segunda inmunización, se extrae la sangre del animal y se separa el suero para obtener una mezcla de anticuerpos. Se fusionan las células B con células tumorales para formar hibridomas, que son clonados y seleccionados para producir anticuerpos monoclonales específicos.
¿Qué es un hibridoma y cuáles son sus características?
-Un hibridoma es una célula resultante de la fusión entre una célula B y una célula tumoral (mieloma). Tiene la capacidad de crecimiento permanente del tumor y la capacidad del linfocito B de producir anticuerpos.
¿Cómo se determina si una célula B es un hibridoma que produce anticuerpos de interés?
-Se utiliza una técnica de dilución límite para sembrar células B en placas y, después de incubar, se realizan inmunoensayos para identificar a los clones que producen anticuerpos específicos frente al epítopo de interés.
¿Cómo se obtiene una gran cantidad de anticuerpos monoclonales una vez identificados los clones productivos?
-Una vez identificados los clones productivos, se realizan resemblajes en gran cantidad de líquido y se incuban para obtener una elevada cantidad de células B productoras de anticuerpos. Alternativamente, se pueden reinyectar los hibridomas en líquido ascítico para obtener una concentración elevada de anticuerpos.

Outlines

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🧬 Introducción a la producción de anticuerpos

Este primer párrafo aborda el proceso de diagnóstico inmunológico, destacando la importancia de los anticuerpos en la inmunología. Se menciona que los anticuerpos pueden ser policlonales o monoclonales y cómo se pueden usar en diversas técnicas de laboratorio, como la dispersión de luz, la turbidez, la precipitación y la aglutinación. Además, se describe cómo se pueden combinar con enzimas, sustancias radiactivas o fluorescentes para ampliar su uso. Se explica que los anticuerpos se producen inyectando antígenos en animales de laboratorio, como ratones para anticuerpos monoclonales y conejos para policlonales, y se detalla el proceso de inmunización y producción de anticuerpos a través de la respuesta inmunológica.

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🔬 Procedimiento para obtener anticuerpos monoclonales

El segundo párrafo se centra en el método para producir anticuerpos monoclonales. Se describe la fusión de células B del animal con células tumorales (mieloma) para crear híbridomas, que son capaces de crecer indefinidamente y producir anticuerpos. Se explica el uso de un medio selectivo para identificar las células fusionadas y la técnica de dilución límite para seleccionar clones específicos que producen anticuerpos de interés. Se detalla el proceso de replicar estos clones en condiciones controladas y cómo se identifican los anticuerpos monoclonales a través de inmunoensayos. Finalmente, se mencionan las dos formas de obtener anticuerpos en grandes cantidades: la siembra de híbridomas en líquido y la reinyección en líquido ascítico. Además, se plantean preguntas para reflexionar sobre las técnicas de inmunoensayo y la producción de anticuerpos.

Mindmap

Keywords

💡Inmunodiagnóstico

El inmunodiagnóstico es un método de diagnóstico médico que se basa en la detección de antigenos o anticuerpos en la sangre o en otros fluidos corporales. En el vídeo, se menciona que es una técnica fundamental para el laboratorio de inmunología y se utiliza para determinar concentraciones de distintas sustancias o células, lo cual es crucial para el diagnóstico de enfermedades.

💡Anticuerpos

Los anticuerpos son proteínas producidas por el sistema inmunitario en respuesta a la invasión de antigenos. En el vídeo, se explica que los anticuerpos pueden ser policlonales o monoclonales y son esenciales para realizar inmunoensayos, ya que son la base para la detección de antigenes y, por ende, para el diagnóstico de enfermedades.

💡Inmunoensayo

Un inmunoensayo es una técnica que utiliza la interacción entre antigenes y anticuerpos para detectar la presencia de un antigene específico. En el vídeo, se destaca que el inmunoensayo es la técnica por excelencia para el laboratorio de inmunología y se puede manifestar a través de diferentes métodos como la precipitación, aglutinación, entre otros.

💡Policolonales

Los anticuerpos policlonales son una mezcla de anticuerpos que reconocen múltiples epítopos de un mismo antigene. En el vídeo, se menciona que para obtener anticuerpos policlonales se inyecta un antígeno en un conejo y se obtiene una respuesta inmunológica que produce una variedad de anticuerpos.

💡Monoclonales

Los anticuerpos monoclonales son anticuerpos que provienen de una sola克隆 y, por lo tanto, reconocen un único epitopo específico. En el vídeo, se describe el proceso de producción de anticuerpos monoclonales, que implica la fusión de células B con mielomas para obtener híbridomas que producen anticuerpos monoclonales.

💡Hibridomas

Los híbridomas son células resultantes de la fusión entre una célula B y una célula tumoral de mieloma. En el vídeo, se explica que los híbridomas se utilizan para producir anticuerpos monoclonales, ya que tienen la capacidad de crecer indefinidamente y producir anticuerpos específicos.

💡Inmunización

La inmunización es el proceso por el cual se introduce un antígeno en el organismo para inducir una respuesta inmunitaria. En el vídeo, se describe que se realiza una inmunización primaria seguido de una secundaria para obtener una respuesta inmunológica más potente y producir anticuerpos.

💡Dilución límite

La dilución límite es una técnica utilizada para determinar la presencia de anticuerpos en una muestra, sembrando una cantidad mínima de células B en un cultivo. En el vídeo, se menciona que se utiliza esta técnica para identificar qué clones de híbridomas producen anticuerpos de interés.

💡Epítopo

Un epitopo es una porción específica de un antigene que es reconocida por un anticuerpo. En el vídeo, se habla de la producción de anticuerpos dirigidos frente a diferentes epítopos de un antígeno, lo cual es fundamental para el desarrollo de inmunoensayos específicos.

💡Conjugación

La conjugación es el proceso de unir dos sustancias, como un anticuerpo con una enzima, una sustancia fluorescente o una sustancia radioactiva. En el vídeo, se menciona que los anticuerpos se pueden conjugar con diferentes sustancias para ampliar su uso en técnicas de diagnóstico avanzado.

Highlights

Inmunopul diagnóstico es una técnica fundamental en el laboratorio de inmunología.

Los anticuerpos son herramientas esenciales para realizar inmunoensayos.

Los anticuerpos pueden ser policlonales o monoclonales y se utilizan para determinar concentraciones de sustancias o células.

Las técnicas de precipitación y aglutinación son fundamentales en los inmunoensayos.

Los anticuerpos pueden combinarse con enzimas, sustancias radioactivas o fluorescentes para ampliar su uso.

La producción de anticuerpos en el laboratorio requiere la inyección de antígenos en animales de laboratorio.

Los ratones son utilizados para obtener anticuerpos monoclonales, mientras que los conejos para policlonales.

La inyección de antígenos en la cavidad peritoneal del animal desencadena una respuesta inmunológica.

Una segunda inmunización mejora la respuesta inmunológica y aumenta la producción de anticuerpos.

El suero sanguíneo contiene una mezcla de anticuerpos policlonales dirigidos a diferentes epítopos del antígeno.

Para obtener anticuerpos monoclonales, se fusionan células B con células tumorales para formar hibridomas.

Los hibridomas son células capaces de reproducirse indefinidamente y producir anticuerpos.

El medio selectivo ayuda a identificar las células B que han formado hibridomas.

La técnica de dilución límite se utiliza para identificar clones específicos de anticuerpos.

Los clones que producen anticuerpos de interés se identifican mediante inmunoensayos.

Los anticuerpos monoclonales se obtienen a partir de clones específicos que reaccionan con el antígeno de interés.

Los hibridomas se pueden cultivar en gran cantidad para producir una gran cantidad de anticuerpos.

Los anticuerpos pueden ser conjugados con enzimas, sustancias fluorescentes o radioactivas para diferentes técnicas diagnósticas.