Pembahasan Laboratory Case B3 : Spektrofotometer
Summary
TLDRIn this educational video, the presenter from the Biochemistry Department at Hasanuddin University discusses the application of spectrophotometry and enzymology in clinical chemistry. The video focuses on a case study of a 64-year-old male with type 2 diabetes, undergoing regular health check-ups and using SGLT inhibitors. The discussion revolves around the qualitative Benedict test for urine glucose concentration, its limitations, and how it can be converted into a quantitative method using spectrophotometry. The video also highlights the importance of accurate glucose measurement in clinical diagnosis and the superiority of quantitative analysis for diagnostic reliability.
Takeaways
- 😀 The video is an educational discussion by a staff member from the Biochemistry Department of Hasanuddin University's Faculty of Medicine.
- 🏥 The case study involves a 64-year-old male patient with a 12-year history of type 2 diabetes, who is on regular check-ups and medication.
- 💊 The patient is taking an SGLT2 inhibitor, a type of anti-diabetic medication that increases glucose excretion in urine, leading to high urinary glucose levels.
- 🔍 Routine urine tests are conducted using Benedict's reagent to monitor treatment effectiveness, which is qualitative and challenges doctors with color interpretation.
- 🌈 The difficulty in distinguishing between green, yellow-green, or orange hues in urine samples poses a problem for accurate glucose concentration estimation.
- 🧪 The video discusses various methods for measuring blood glucose levels, including qualitative, semi-quantitative, and quantitative approaches.
- 🔬 The qualitative Benedict's test can be converted into a quantitative method using spectrophotometry, which measures the absorbance of the color change caused by the reaction.
- 📈 The principle of spectrophotometry is based on the measurement of light absorbance, which correlates to the concentration of the substance in the sample.
- 📝 The video references a research paper that validates the quantification of Benedict's test results using spectrophotometry, improving diagnostic value.
- 📚 The educational content is aimed at laboratory technicians, emphasizing the importance of understanding the validated methods for quantifying glucose concentration.
Q & A
What is the main topic discussed in the video?
-The main topic discussed in the video is the qualitative and quantitative analysis of glucose levels in urine samples, particularly focusing on the use of Benedict's test and its modification for quantitative analysis using spectrophotometry.
Why is it challenging to differentiate between certain colors in Benedict's test?
-Differentiating between colors in Benedict's test can be challenging because the colors that form, such as greenish-yellow, yellowish-green, or light orange, are very similar and can be subjective to the human eye, making it difficult to accurately estimate glucose concentrations.
What is the significance of quantitative analysis in medical diagnosis?
-Quantitative analysis provides a numerical value for the concentration of a substance, which is more reliable and accurate than qualitative analysis. This high level of accuracy is crucial for medical diagnosis as it allows for precise measurement and assessment of health conditions.
How does the principle of spectrophotometry relate to the color change in Benedict's test?
-The principle of spectrophotometry is based on the measurement of light absorption by a colored solution. In Benedict's test, the color change that occurs due to the presence of reducing sugars can be quantified by measuring the absorbance of the solution at a specific wavelength using a spectrophotometer.
What is the role of CO2 in the modified Benedict's test for glucose quantification?
-In the modified Benedict's test, the actual substance measured for glucose concentration is CO2, not glucose directly. The presence of reducing sugars in the sample leads to the production of copper(II) oxide (Cu2O), which is then detected by the spectrophotometer, indicating the concentration of glucose.
What is the purpose of a blank in spectrophotometry?
-The purpose of a blank in spectrophotometry is to account for any background absorbance that may be present due to the reagents used. It helps to eliminate the influence of these reagents on the measurement, ensuring that the absorbance readings are specific to the sample being tested.
Why is it important to measure absorbance at the maximum wavelength (λmax) in spectrophotometry?
-Measuring absorbance at λmax is important because it is the wavelength at which the compound absorbs light most strongly. This ensures the most accurate and sensitive measurement of the compound's concentration in the sample.
What is the significance of a linear relationship between concentration and absorbance in spectrophotometry?
-A linear relationship between concentration and absorbance indicates that the method is reliable and that the absorbance readings can be directly proportional to the concentration of the analyte in the sample, allowing for accurate quantification.
What steps are involved in preparing samples and blanks for spectrophotometry analysis as described in the video?
-The steps include preparing the sample and blank solutions, ensuring the correct height of the liquid in cuvettes (3/4 full), and performing blanking in the spectrophotometer to account for any background absorbance before measuring the absorbance of the samples.
How does the video script describe the process of modifying Benedict's test for quantitative analysis?
-The video script describes the process of modifying Benedict's test by heating the sample to induce color change, followed by centrifugation to separate the precipitate from the supernatant. The supernatant is then used for spectrophotometric analysis, where the absorbance readings are taken at the maximum wavelength to quantify the glucose concentration.
Outlines
🧪 Biochemistry Department Introduction and Case Discussion
The speaker introduces themselves as a staff member from the Biochemistry Department at Hasanuddin University's Faculty of Medicine. They announce that the video will discuss two sub-topics related to spectrophotometry and enzymology. The first case study involves a 64-year-old male with a 12-year history of type 2 diabetes. The patient has been using SGLT2 inhibitors, which increase glucose excretion in urine, leading to high urinary glucose levels. The doctor conducts a routine urine test using Benedict's reagent to check for glucose concentration, resulting in a red color indicating high glucose levels. The discussion then explores the challenges of distinguishing colors in urine tests, which can be difficult in real life despite being clear in images. The importance of quantitative analysis over qualitative methods is emphasized, and various methods for measuring glucose levels in body fluids are mentioned, including blood and urine tests.
🌡 Understanding Qualitative and Quantitative Methods in Glucose Measurement
The speaker explains the difference between qualitative, semi-quantitative, and quantitative methods of glucose measurement. Qualitative methods provide a yes-or-no answer, semi-quantitative methods give a rough estimate, and quantitative methods offer precise measurements. The video discusses the possibility of converting the Benedict's test, which is qualitative, into a quantitative method using spectrophotometry. The principle behind this conversion is based on the color change in the urine sample, which can be measured for absorbance using a spectrophotometer. The speaker also addresses the subjective nature of qualitative tests and the higher diagnostic value of quantitative tests, explaining the working principle of a spectrophotometer and how it detects absorbance to measure glucose levels.
🔬 Research-Based Modifications of Benedict's Test for Glucose Quantification
The speaker references a research paper published in 2020 that attempts to quantify the results of Benedict's test using a spectrophotometer. The paper details a method that involves heating the sample with Benedict's reagent, followed by centrifugation to separate precipitates from the supernatant. The supernatant is then used for spectrophotometric analysis, which measures the absorbance that correlates with glucose concentration. The discussion highlights the specificity of the method, as it indirectly measures glucose through the detection of copper(II) oxide formed during the reaction.
📖 Detailed Procedure for Measuring Glucose Concentration Using Spectrophotometry
This section outlines the step-by-step procedure for measuring glucose concentration using the modified Benedict's test and spectrophotometry. It emphasizes the preparation of the sample and the blank, the importance of excluding interfering substances, and the correct filling of cuvettes to ensure accurate measurements. The process includes blanking the spectrophotometer with the blank solution, measuring the sample's absorbance, and determining the absorbance peak to find the maximum wavelength for accurate glucose concentration measurement.
📊 Absorbance Measurement and Wavelength Determination in Glucose Analysis
The speaker explains the importance of determining the maximum absorbance wavelength for accurate glucose concentration measurement. After blanking, the sample's absorbance is measured at the maximum wavelength, which is found to be 740 nanometers in the given example. The discussion includes the linear relationship between the concentration of copper(II) oxide and absorbance, indicating a direct correlation between glucose concentration and absorbance according to Beer's Law. The speaker also addresses how to handle multiple absorbance peaks and the need to measure absorbance at different wavelengths for a comprehensive analysis.
🔍 Observations and Calculations of Absorbance for Glucose Measurement
This part discusses the observations of absorbance at two maximum wavelengths and the calculations involved in determining glucose concentration. The speaker instructs on measuring absorbance twice at different wavelengths and emphasizes the need for accurate measurements to ensure reliable glucose concentration results. The summary concludes with a transition to the second case discussion, which involves enzymology.
Mindmap
Keywords
💡Sodium-glucose Transporter 2 (SGLT2) inhibitors
💡Benedict's test
💡Qualitative analysis
💡Quantitative analysis
💡Spectrophotometry
💡Enzymology
💡Colorimetric method
💡Glucose oxidase strip test
💡Linearity
💡Calibration curve
Highlights
Introduction to the discussion on spectrophotometry and enzymology basics.
Case study of a 64-year-old male with a 12-year history of type 2 diabetes.
Discussion on the use of SGLT2 inhibitors for diabetes management.
Routine urine tests to monitor treatment success using Benedict's reagent.
Challenges in distinguishing colors in urine test results for accurate glucose concentration estimation.
Differentiating between qualitative and quantitative methods in clinical biochemistry.
The limitations of qualitative methods and the advantages of quantitative methods for glucose measurement.
Principle of spectrophotometry and its application in quantifying glucose levels.
Conversion of Benedict's qualitative test into a quantitative method using spectrophotometry.
Importance of understanding the substances measured in glucose concentration tests.
The non-specificity of Benedict's test due to the detection of copper(II) oxide instead of glucose directly.
Research by Peter in 2020 on the quantification of Benedict's test results using spectrophotometry.
Description of the experimental procedure for measuring glucose concentration using the modified Benedict's test.
Preparation of samples and blanks for accurate spectrophotometric analysis.
The role of blanking in spectrophotometry to exclude interfering substances.
Calibration of spectrophotometers and the importance of measuring absorbance at the maximum wavelength.
Linear relationship between the concentration of copper(II) oxide and absorbance in the spectrophotometric analysis.
Practical application of the modified Benedict's test for glucose quantification in clinical settings.
Transcripts
Halo
assalamualaikum warahmatullahi
wabarakatuh perkenalkan saya lagi lancar
Olla saya merupakan staf dari
asisten dari Departemen biokimia
Fakultas Kedokteran Universitas
Hasanuddin
pada video kali ini
kami akan membahas cash discussion
pembahasan trust us atau skenario yang
terkait dengan 2 sub bahasan kita yaitu
spektrofotometri dan dasar enzimologi
baik kita masuk ke kasus yang pertama
atau kasus B3 bahwa pada kasus ini eh
dinyatakan ada seorang pria usia 64
tahun dimana ke dia sudah memiliki
riwayat diabetes
melitus tipe 2 sejak 12 tahun yang pun
Kemudian datang ke pusat kesehatan
masyarakat untuk regular check-up
mengontrol kadar gula darahnya
setahun belakangan ini pasien ada
mengonsumsi obat-obatan anti diabetes
golongan
sglt to inhibitor atau biasa kepanjangan
ini adalah sodium glukos Transporter tuh
inhibitor yaitu obat-obatan antidiabetes
yang menghambat reabsorpsi atau
menghambat penyerapan ulang daripada
glukosa pada sel tubulus daripada ginjal
sehingga
pasien pasien diabetes yang mengonsumsi
obat ini itu cenderung memiliki kadar
glukosa urin yang tinggi Nah untuk
memonitor atau mengevaluasi kesuksesan
pengobatan maka dokter ini melakukan
pemeriksaan urin rutin
untuk melihat konsentrasi glukosa secara
kita Thief menggunakan reagen benedict
nah hasilnya bisa dilihat sendiri bahwa
hasilnya ini
terbentuk warna yang kita sebut sebagai
webred ya warnanya ini interpretasinya
ini adalah high atau mengandung kadar
glukosa yang tinggi dengan estimasi itu
sekitar lebih dari 2 G persen baik Nah
kita lanjutkan
eh permasalahan daripada skenario ini
ini sebenarnya adalah
pembahasan permasalahan yang umum
bahwasanya
Eh
kalau misalnya warna yang terbentuk sama
seperti skenario ini yaitu warna merah
bata publik rap maka tidak ada masalah
kita bisa
mengidentifikasi kita bisa
warnanya tetapi yang menjadi masalah
adalah jika yang muncul itu adalah warna
hijau kekuningan atau kuning kehijauan
ataupun warna orange orange yang agak
pudar seperti ini tiga warna ini yang
menjadi tantangan bagi seorang dokter
untuk membedakan nah
eh Kena warnanya hampir-hampir mirip
pada keadaan nyata kalau dalam gambar
ini memang sangat sangat jelas
perbedaannya tetapi dalam keadaannya
dalam dunia nyata diri Los
sangat sulit untuk kita membedakan warna
sehingga
angka-angka yang ada di bawah ini itu
cenderung
sangat sulit untuk kita
melakukan penentuan atau estimasi kadar
glukosa karena warnanya yang hampir
mirip disinilah fungsi kuantifikasi
berperan Ayo kita harus betul-betul
mengetahui berapa angkanya berapa
konsentrasi glukosa Berdasarkan
perubahan warna nah
dalam eh biokimia klinik kita itu
mengenal beberapa metode dalam mengukur
kadar glukosa darah pada cairan tubuh
manusia ke cairan tubuh manusia yang
dimaksud Disini yang paling sering itu
adalah darah dan urine kita bisa
menggunakan benitez unfortunately the
dicas ini dia sifatnya adalah kualitatif
Kemudian yang kedua ini kita menggunakan
glukosa oksidase striptest ini biasanya
ada di urinalisis Yes trik urinalisis
Danti kalian akan melakukan praktikum
urinalisis di sistem urinarius nah eh
ini merupakan metode yaitu semi
aku anti tapi kemudian
yang adalah yang terakhir ini
calorimetric enzymes C ini adalah metode
yang sudah kuanti
punya ini jadi perbedaan antara
kualitatif dan kuantitatif kalau
kualitatif itu kita cuma hasil akhirnya
hanya positif atau negatif kalau
semikuantitatif sama seperti ini ya Ada
tentangnya tidak jelas Angkanya berapa
yang jelas ada tentangnya 0,5 sampai 100
sampai 1,5 lebih dari dua yaitu semi
kuantitatif sedangkan kalau kuantitatif
itu yang dihasilkan adalah
angkanya ya real concentration nya yang
langsung kita
hasilkan disini jadi ini yang yang
paling bagus eh delay kepercayaannya
atau nilai diagnostiknya yang paling
tinggi itu adalah pemeriksaan secara
kuantitatif Nah untuk mengukur glukosa
itu kita mengenal calorimetric enzyme
say dan ini menggunakan
spektrofotometri Jadi pertanyaan pertama
Apakah bisa kuantifikasi glukosa ini
kita lakukan secara spectrophotometric
jawabannya ia bisa nah sekarang
permasalahannya
yang menjadi
pvoc us pembahasan kita pada skenario
ini adalah tes Benedict nya apakah bisa
ke sebelah Dik yang Which is Benedict
kesini is qualitative method kita
konversi dia menjadi quantitative method
nah bagaimana caranya Apakah bisa pakai
spektrofotometri jawabannya bisa nah
baik kita lanjut Nah
apakah bisa menggunakan sistem metode
spektrofotometri untuk melakukan
kuantifikasi hasil daripada reaksi B Hai
jawabannya bisa Kenapa karena Benedict
tes ya itu prinsip kerjanya berdasarkan
color change atau perubahan warna dan
tadi Wak yang tadinya warna urine itu
adalah kuning jernih misalnya kemudian
kita teteskan Benedict kita Panaskan
kemudian dia akan berubah kalau
konsentrasi gulanya tinggi Ya tentu dia
akan berubah menjadi warna merah bata
berarti deteksinya secara visual itu
adalah berdasarkan perubahan warna nah
ingat kembali setiap cairan yang
berwarna itu kita bisa mengukur
serapannya kita bisa mengukur absorbansi
nya Oke jadi kita bisa mengukur
absorbansi nya menggunakan apa tentu
menggunakan
spektrum foto nekat jadi jawabannya bisa
kita menggunakan spektrofotometer Nah
kemudian ada lagi satu statement yang
penting diketahui bahwasanya
kualitatif ensem iku kreatif meja
monastery subjektif
apa namanya pemeriksaan kualitatif
menghasilkan yes or no festival negatif
itu nilai diagnostiknya sangat rendah
Oke
semikuantitatif nilai diagnostiknya
sedikit lebih tinggi dari kualitatif
sedangkan pemeriksaan kuantitatif itu
yang memiliki nilai diagnostik yang
sangat tinggi nah Bagaimana prinsip
kerjanya sama seperti prinsip kerja yang
sudah kita bahas pada saat pada saat
diskusi praktikum mengenai prinsip kerja
spektrofotometer yaitu
detektor yang ada di sini ya ini output
Cried out hasilnya detektor yang ada di
sini itu mendeteksi Isra Pak lapo
mendeteksi
serapannya ya mendeteksi absorbansinya
Shakira kita the tidak usah Jelaskan
penyelewengan mengenai prinsip Nah
sekarang kita lanjut pertanyaan berikut
yang bahwasanya
substansi apa yang merepresentasikan
kadar glukosa ide perlu kita ingat
ketika kita menggunakan metode Benedict
kemudian kita mau modifikasi metode
Benedict itu
menjadi suatu metode yang kuantitatif
Artinya kita menggunakan
spektrofotometer sebenarnya yang diukur
oleh spektrofotometer perubahan warna
yang terjadi itu bukan oleh karena
glukosa tetapi oleh karena Ian koplo
oksida ini
cu2o nya ini jadi a substance i yang
merepresentasikan konsentrasi glukosa
sebenarnya itu adalah co2o jadi tidak
secara direct tidak secara langsung kita
menghitung kadar glukosa dengan metode
ini tetapi yang sebenarnya kita hitung
itu adalah kadar co2o Nah berarti tidak
spesifik dong Oh ya kalau kita bicara
spesifik atau tidak memang metode ini
kurang spesifik karena yang kita yang
kita deteksi atau yang kita hitung
konsentrasinya bukan glukosa secara
langsung tetapi kuku oksida nah tetap
ikut peroksida ini terbentuk oleh karena
adanya
gula pereduksi yang ada di dalam sampel
tersebut sehingga kalau ininya banyak
kalau konsentrasi gulanya banyak
automatic klik konsentrasiku peroxida
juga akan ikut meningkat inilah yang
akan kita deteksi sehingga peningkatan
co2o yang memberikan gambaran warna
merah ini Itu sebab ding dengan
konsentrasi daripada gula pereduksi yang
terkandung di dalam sampel tersebut ya
cek kita lanjut nah ini adalah pepper
yang dipublish yang dipublikasi tahun
lalu the tahun 2020
Peter ini berusaha melakukan
kuantifikasi
daripada hasil tes Benedict ia jadi
perusahaan yang konon kuantifikasi dan
dia menggunakan spektrofotometer Dan
hasilnya itu bisa kali David tervalidasi
Nah jadi kalau Mungkin ada yang ingin
membaca baca lengkap mengenai account
ification of fisheries besok kualitatif
teknik of Benedict you can read this
paper oke nah
pada Paper ini yang ada cover ini itu
dia tetap menggunakan Benedict ya tetapi
mungkin begitu The Bone Dik yang
dilakukan pada Paper ini itu lebih
research bis ya lebih research-based
bukan educational B seperti kita kita
inginkan
eh sangat sederhana ya kita masukkan
sampel masukkan reagen benedict kemudian
kita Panaskan dan kita lihat perubahan
warna yang terjadi Ipin septari simple
Om apa namanya secara simpel n batin
this paper
epitel upbit death
metal bahwasanya metode yang digunakan
itu agak sedikit kompleks dari metode
yang kita sudah praktikum kan ya tetapi
terlepas daripada itu yang jelasnya ini
adalah metode Benedict insip kerjanya
sama nah pada daerah yang berwarna biru
inilah Dia memodifikasi tes ini
bahwasanya ketika dia sudah
memanaskan ya
terbentuklah terbentuk perubahan warna
kemudian dilakukan sentrifugasi
Nah sentrifugasi Nah setelah
sentrifugasi akan terbentuk 2 Duo jadi
fungsinya untuk memisahkannya memisahkan
zat-zat yang bisa mengendap dan zat-zat
yang memiliki massa jenis yang rendah
zat-zat yang memiliki massa jenis yang
rendah itu dia akan menjadi supernatan
istilahnya jadi akan menjadi supernatan
dan dia akan menjadi cairan didalam
tabung tersebut Sedangkan yang mengendap
itu dia akan menjadi presipitat ya
pepper ini membuang spesifitasnya
discarded presipitat
MB Rusdi supernatan jadi dia menggunakan
supernatan nya dengan pengenceran 1
banding 50 atau banding 5 maksudnya
eh satu ML supernatan dicampur dengan 5
ml aquades gitu maksudnya pengenceran 1
banding 50 Ia menggunakan supernatan nya
kemudian supernatan inilah yang dia
deteksi secara spektrofotometri
Nah setelah spectrophotometric
mendeteksi karena
kena yang spectrophotometric deteksi
otomatis nilai hanya atau nilai
absorbansinya maka nilai absorbansi
inilah yang
merepresentasikan ya kadar
daripada
glukosa eh jadi ini destino saja tidak
usah didalami
gambar ini yang jelas kita tahu
bahwasanya sudah ada pepper sudah dari
10 caption yang
melakukan modifikasi Benedict
berdasarkan Teknik spectrophotometric
ini intinya Silet ini ya adik-adik tidak
usah terlalu panjang lebar memahami ini
karena masih banyak pembahasan yang
sangat penting untuk levelnya adik-adik
ini adalah level laboran ya cukup tahu
saja bahwa sudah ada metode yang
tervalidasi untuk Om lakukan unifikasi
SD di eh kita lanjut nah ini adalah
pertemuan jawab pertanyaan
working procedure atau prosedur kerja
untuk mengukur glue ke konsentrasi
glukosa nah ini penting bahwasanya
ketika kita ingin mengukur absorbansi
suatu sampel maka kita yang paling
pertama yang harus kita siapkan adalah
prepare Desember kita harus siapkan
sampelnya
kemudian setelah kita menyiapkan
sampelnya dalam hal ini karena kita
bicara Benedict maka kita siapkan sampel
yang sudah terjadi perubahan warna tinta
itu dia warna
britpop atau mungkin warna hijau
kekuningan atau kuning kehijauan ataupun
warna orange ataupun warna biru terserah
kita siapkan kita taruh di dalam tabung
reaksi setelah kita menyiapkan sampel
kita siapkan blanko nah atas ini sih
daripada blanko fungsi daripada blanko
ini adalah a
fungsi daripada blanko ini adalah
mengeksklusi mengeluarkan
semua kemungkinan zat-zat yang bisa
berpengaruh terhadap pengukuran sampel
eh menjadi seorang solusi daripada
blanko itu adalah
mengeksklusi atau mengeluarkan semua
reagen-reagen
yang berpotensi mengganggu
pembacaan sampel oke nah dalam hal ini
blanko itu kalau kita bicara blanko maka
isi daripada blanko itu adalah
semua
Reagan
terkecuali jadi semua Reagan kecuali
ingat semua Reagan kecuali
sampel
yang akan kita ukur misalnya pada kasus
ini
eh didalam tabung itu Sam sampel kan
isinya tentu ada urine
kemudian ada reagen benedict Oke
yee ada urine ada Benedict Nah sekarang
untuk blangkonya ya untuk blangkonya
maka yang kita gunakan sebagai blanko
ingat semua reagen terkecuali
sampel-sampel yang kita ingin ukur
adalah urinnya
berarti yang menjadi blanko disini
adalah Benedict nya Oke jadi yang
menjadi blanko adalah Benedict nya Nah
setelah mempersiapkan sampel dan
mempersiapkan blanko kemudian kita
sediakan dua kutub yang bersih ya dua
kutek yang bersih Misalnya ini ada satu
kosek ya ini kuvet kemudian bisa Nisa
gambar lagi kuvet yang satu ini kuvet
a-niu feat D kuvet Akita isi dengan
sampel kuvet B kita isi dan blanko oke
nah yang perlu diperhatikan pada saat
mengisi kuvet adalah ketinggian
cairannya ya ketinggian cairannya
aturan International mengatakan
bahwasanya bimal minimal tinggi cairan
dalam kuvet itu adalah 3/4 daripada
tinggi khususnya jadi kalender kita bagi
ini
kita bagi empat
12341234 tiga perempatnya 3/4 artinya
sampai di sini minimal tinggi cairan
yang harus kita isi jadi ini harus
terisi konsepnya ini dengan Semper
Begitu juga dengan blangko jadi harus
Kenapa harus tiga perempat Knight cahaya
itu akan lewat masuk di tengah-tengah
sini ya dia masuk di tengah-tengah
apabila kita mengisi cuma sampai disini
contohnya segambar gini kita cuma
mengisi cuma sampai disini sementara
cahaya lewat Disini
Nda akan absen nilai absorbansinya itu
akan error ya Alex akan mengidentifikasi
bahwa tidak ada cairan yang diisikan
perfect kosong Oke jadi kita harus
pahami ini nah
oke
setelah mengisi blanko apa aku fake
masing-masingnya khusus yang berbeda
dengan blangko dan sampel selanjutnya
kita lakukan blinking atau tebing cita
lakukan
eh kenziro and alat ya istilahnya kita
itu penjiwaan alat atau kalibrasi jadi
yang pertama-tama adalah kita masukkan
kuvet yang berisi blanko ini ke dalam
spektrofotometer Oke jadi ke dalam
spektrofotometer kita masukkan blanko
Setelah itu kita tekan Blank atau kita
tekan Zero pada masing-masing beberapa
alat itu akan berbeda tetapi otot
alat-alat yang spektrofotometer yang
kita punya di laboratorium biokimia
fauna Hai itu tulisannya Zero jadi kita
tekan tombol Zero kemudian dia akan
otomatis melakukan blanking Nah setelah
blanking mereka kita masukkan lagi kuvet
yang berisi sampel ke dalam
spektrofotometer tersebut kemudian kita
tekan
Yes untuk
tanamannya untuk mengukur sampel
tersebut dan setelah mengukur yang
setelah setelah
spektrofotometer mengukur maka akan
keluar nilai absorbansinya nah Yes
terlihat Yongki kita masuk pada tahap
tadi ukuran absorbansi nah tapi sebelum
mengukur absorbansi nya kita harus
menentukan yang namanya abserben speed
ya Puncak absorbansi adminnya Puncak
absorbansi kita harus mengukur
apa namanya free panjang gelombang
maksimum ia eh jadi kita harus mengukur
panjang gelombang maksimum Ia setelah
kita mendapatkan panjang gelombang
maksimum kemudian kita bisa sampelnya
kita ukur sentralnya pada panjang
gelombang maksimum yang telah kita
dapatkan sebelumnya ya mudah-mudahan
bisa dimengerti Nah sekarang kita lihat
ini adalah gambar dari pepper yang tadi
Eh ini yang saya maksud gambar ini
adalah Eh determination ya
determination of
adsorbent speak Yang tadi kita bahas
kalau kita lihat disini gambarnya
bahwasanya absorban Fiksi itu kita lihat
G sangat meningkat ya pada panjang
gelombang
740 nanometer ya
746 m artinya apa panjang gelombang
maksimum nya itu adalah 740
Hai Nano Netter nah pada panjang
gelombang Inilah kita harus melakukan
pengukuran absorbansi
eh jadi ketika kita sudah eh apa ketika
kita melakukan blanking maka kita harus
set panjang gelombangnya ke 740
nanometer Eh nah kemudian gambar yang by
ini
menunjukkan ini sebenarnya hasil
penelitiannya ini 10 yang penting adalah
gambar-gambar B ini misterius aja
eh gambar b ini menunjukkan Oh apa
namanya
hubungan antara serapan ya hubungan
antara
serapan
jadi sumbu-x ini adalah konsentrasi
CuSO4 nyato kupu-kupu oksida
cu2o dalam hal ini kalau kita
menggunakan
prinsip kita ya kemudian yang sumbu y
ini adalah absorbansinya kita lihat di
sini dia menunjukkan garis lurus seperti
ini ya garis linier kemudian kita lihat
ya konstanta linieritas nya er squarenya
daerah kuadratnya itu adalah
sangat-sangat mendekati 10 koma 99 itu
artinya kalium 99 itu sangat linier
hubungannya yang kita harapkan ini
adalah hubungan yang linear hubungan
yang linier musiknya apa makin tinggi
konsentrasi daripada qupro oksidanya
makin tinggi juga absorbansinya dan
makin tinggi konsentrasi pupuk sidak
makin tinggi absorbansinya sehingga itu
sesuai dengan Hukum pir lembar Oke kita
lanjut Nah
sekarang contoh-contoh lain lagi kalau
misalnya kita diberikan soal seperti ini
kemudian ini soalnya adalah eh apa lagi
manakah Berapakah panjang gelombang
maksimum nya Berapakah panjang gelombang
maksimum nya Nah kalau kita lihat di
sini ya ada dua picking terbentuk ada
dua Puncak yang terbentuk ada Puncak
Katakanlah ini adalah puncak a.dan
Katakanlah ini adalah puncak B isi
daerah sini dan daerah sini nah puncak
itu Yap panjang gelombangnya itu = 5 40
ya Yang ini
kemudian B itu ya kita bulatkanlah ya
sekitar
580
artinya apa kita harus mengukur
absorbansi kita harus mengukur
absorbansi dua kali pada panjang
gelombang tips yang pertama yaitu
540 dan panjang perut gelombang it yang
kedua yaitu 583
10 eh jadi kita harus menghitung apa
namanya kita harus menghitung dua kali
absorbansi sehingga nanti akan ada dua
nilai absorbansi absorbansi pertama dan
absorbansi
kedua jadi apabila pada saat tahap yang
tadi yang saya katakan determination of
absorban Spike kita dapatkan dua kali
absorbansi ya kita dapatkan dua kali
absorbansi disini sore kita dapatkan dua
kali absorbansi maka kita harus mengubah
sore dua kali panjang gelombang maksimum
maka kita harus mengukur dua kali
observasi absorbansi pada panjang
gelombang maksimum yang pertama dan
panjang gelombang maksimum yang kedua
Oke jadi cukup sampai
disini untuk
materi atau kasus yang pertama Ya kita
sambung ke kedua untuk kasus yang kedua
mengenai enzim selama alaikum
warohmatullohi wabarokatuh
Посмотреть больше похожих видео
Practical Research 2 Lesson 1: Introduction to Quantitative Research
Interpretation of the Urinalysis (Part 2) - The Dipstick
How to Test for Ketones
The World of Chemistry: Measurement: The Foundation of Chemistry
What is diabetes and what are the risk factors?
An Introduction to Clinical Reasoning (Strong Diagnosis)
5.0 / 5 (0 votes)