Montaje directo de muestras con KOH Y Azul de lactofenol
Summary
TLDREl video muestra una práctica de laboratorio donde se realizan tinciones de hongos utilizando azul de lactofenol y hidróxido de potasio (KOH). Se explica paso a paso cómo tomar muestras con cinta adhesiva, colocarla sobre portaobjetos y observar las estructuras filamentosas bajo el microscopio en distintos aumentos (4x, 10x, 40x, y 100x). Las imágenes permiten visualizar detalles como hifas, conidios, y la presencia de melanina en hongos pigmentados (dematiáceos). Las diferencias de tinción dependen de la densidad de las estructuras, lo que facilita su estudio en el laboratorio.
Takeaways
- 🔬 En esta práctica se realizarán dos tipos de tinciones de hongos, una con azul de lactofenol y otra con hidróxido de potasio (KOH).
- 🧪 Se utiliza una pipeta para aplicar una pequeña gota de azul de lactofenol en una lámina portaobjetos.
- 🦠 Con un trozo de cinta transparente se toma la muestra del hongo para analizarla.
- 🔥 El hongo se recoge mientras la caja de petri está destapada al lado de un mechero encendido, lo que asegura la esterilidad del procedimiento.
- 🎨 La cinta con el hongo se coloca sobre la gota de azul de lactofenol en la lámina para teñir las estructuras del hongo.
- 🔍 Se observa la lámina bajo un microscopio, comenzando con un aumento de 4x, donde se ven las estructuras filamentosas teñidas.
- 🔵 A un aumento de 10x, se observan con más detalle las hifas teñidas de azul, lo que sugiere que el hongo es hialino, sin pigmentación natural.
- 🧫 Luego se realiza el mismo procedimiento utilizando KOH como reactivo para visualizar las estructuras del hongo.
- 🟤 Con el KOH, a un aumento de 10x, se observan estructuras filamentosas pigmentadas de color café, típicas de los hongos dematiáceos.
- 🔬 A un aumento de 100x, se aprecian mejor los tabiques internos y la pigmentación, permitiendo una observación más detallada de las hifas.
Q & A
¿Cuál es el propósito principal de la práctica descrita en el video?
-El propósito de la práctica es realizar una tinción de hongos utilizando azul de lactofenol e hidróxido de potasio (KOH) para observar las estructuras filamentosas bajo el microscopio.
¿Qué materiales se utilizan para realizar la tinción de hongos?
-Los materiales incluyen portaobjetos, pipetas Pasteur, cinta transparente, azul de lactofenol, hidróxido de potasio (KOH) y una caja de Petri con hongos.
¿Cuál es el primer paso en la preparación de la muestra con azul de lactofenol?
-El primer paso es usar una pipeta Pasteur para colocar una gota de azul de lactofenol en un portaobjetos.
¿Cómo se toma la muestra del hongo para su análisis?
-Se utiliza un trozo de cinta transparente, se presiona sobre el hongo en la caja de Petri y luego se coloca la cinta impregnada con el hongo sobre el portaobjetos que tiene azul de lactofenol.
¿Por qué es importante trabajar cerca de un mechero encendido durante la toma de muestras?
-El mechero encendido crea un entorno estéril al reducir la presencia de contaminantes del aire mientras se manipulan las muestras.
¿Cuál es la función del azul de lactofenol en la tinción de hongos?
-El azul de lactofenol tiñe las estructuras filamentosas del hongo, permitiendo una mejor visualización de estas bajo el microscopio.
¿Qué se observa en el microscopio a un aumento de 4x con azul de lactofenol?
-A un aumento de 4x, se observan estructuras filamentosas teñidas de azul que recorren la placa de lado a lado.
¿Cómo varía la observación de las ifas a 10x en comparación con 4x?
-A 10x, se observan más detalles de las estructuras filamentosas, con algunas áreas bien teñidas y otras menos teñidas, lo que indica la naturaleza hialina del hongo.
¿Qué diferencias se observan al teñir las muestras con hidróxido de potasio (KOH) en lugar de azul de lactofenol?
-Con KOH, las estructuras filamentosas adquieren una pigmentación café, lo que indica la presencia de hongos dematiáceos o pigmentados, en contraste con las estructuras teñidas de azul del lactofenol.
¿Cuál es la importancia de observar las muestras en diferentes aumentos (4x, 10x, 40x y 100x)?
-Observar las muestras en diferentes aumentos permite obtener una visión panorámica y luego enfocarse en detalles más finos, como las divisiones septadas y los conidios, lo que ayuda a identificar características específicas de los hongos.
Outlines
🧪 Preparación de láminas con azul de lactofenol y KOH
En este párrafo, se describe el procedimiento de preparación de láminas para observar hongos. Primero, se utiliza una pipeta para colocar una gota de azul de lactofenol en una lámina portaobjetos. Luego, con un trozo de cinta transparente, se recoge una muestra de hongo que se adhiere a la cinta. La cinta con el hongo se coloca sobre la gota en la lámina. Se sigue el mismo procedimiento para preparar una tinción con hidróxido de potasio (KOH). Finalmente, las láminas son observadas bajo el microscopio.
🔬 Observación microscópica a diferentes aumentos
Este párrafo detalla la observación de las láminas bajo el microscopio. Primero, se utiliza un aumento de 4x para obtener una vista panorámica, donde se observan estructuras filamentosas teñidas con azul de lactofenol. Luego, se incrementa el aumento a 10x, mostrando las ifas del hongo, algunas teñidas de azul. Finalmente, a 40x, se observan con mayor detalle los tabiques que dividen las estructuras filamentosas y los conidios que se forman al final de algunas de ellas.
🔍 Visualización de hongos pigmentados con KOH
En este párrafo, se describen las observaciones realizadas con la tinción de KOH. A un aumento de 4x, se pueden ver estructuras filamentosas. Luego, a 10x, se observan detalles adicionales y se nota la presencia de hongos dematiáceos o pigmentados, que muestran una coloración café similar a la melanina. A 100x, se observan las ifas septadas y la pigmentación característica del hongo, lo que confirma que se trata de un hongo pigmentado o dematiáceo.
Mindmap
Keywords
💡Montaje directo de muestras
💡Azul de lactofenol
💡Hidróxido de potasio (KOH)
💡Hongos dematiáceos
💡Ifas
💡Tinción
💡Microscopio
💡Tabiques
💡Conidios
💡Cinta transparente
Highlights
Montaje directo de muestras con azul de lactofenol y KOH para la tinción de hongos.
Uso de una pipeta pastor para aplicar azul de lactofenol en la lámina portaobjetos.
Se utiliza cinta transparente para recoger la muestra de hongos desde la caja de Petri.
La muestra impregnada en la cinta se coloca sobre el azul de lactofenol para la tinción.
Repetición del proceso con hidróxido de potasio (KOH) para observar diferencias en tinción.
El procedimiento se realiza bajo el mechero encendido para evitar la contaminación.
Las láminas teñidas con azul de lactofenol y KOH se observan bajo el microscopio en diferentes aumentos.
A 4x de aumento, se observan estructuras filamentosas teñidas por el azul de lactofenol.
Aumento a 10x permite visualizar más detalles de las estructuras filamentosas teñidas.
El hongo observado es hialino, lo que facilita la penetración del azul de lactofenol en las hifas.
A 40x de aumento, se observan tabiques y abombamientos pequeños conocidos como conidios.
El grado de tinción del azul de lactofenol depende de la densidad de las hifas.
En las muestras teñidas con KOH, se observan estructuras filamentosas pigmentadas a 4x.
A 10x de aumento con KOH, se identifican estructuras pigmentadas similares a la melanina.
A 100x de aumento, las hifas septadas y pigmentadas se observan con gran detalle, revelando la presencia de melanina.
Transcripts
montaje directo de muestras con
hidróxido de potasio koh y azul de
lactofenol en esta práctica se va a
hacer una tinción de hongos primero
usando el azul de lactofenol y luego
hidróxido de potasio o el llamado koh
para comenzar se va a usar una pipeta
pastor para tomar una pequeña gota de
azul de lactofenol y ponerla en una
lámina de
portaobjetos después se toma otra gota y
se coloca en otra placa
portaobjetos El Paso siguiente es con un
trozo de cinta transparente se toma la
muestra del hongo que se va a
analizar
[Música]
[Música]
se destapa la caja de petri siempre al
lado del mechero encendido y se pone la
parte del pegante de la cinta sobre el
hongo La idea es que la cinta quede
impregnada con el
hongo se tapa la caja y se pone la cinta
sobre el azul de
[Música]
enol la lámina y la cinta deben quedar
como se está viendo en pantalla en estos
momentos veamos el procedimiento de
nuevo desde otro
[Música]
ángulo
[Música]
ahora Se pasará a hacer una tinción con
hidróxido de potasio o
koh se debe realizar el mismo proceso es
decir Tomar una gota del C y ponerla
sobre cada una de las dos placas
portaobjetos
[Música]
luego se corta un pedazo de cinta y se
toma la muestra del hongo con la parte
que tiene el pegante siempre con el
mecher encendido a un
lado Posteriormente se coloca la cinta
sobre la lámina
portaobjetos
[Música]
vamos por el procedimiento de nuevo
desde otro
[Música]
ángulo ahora las cuatro láminas se deben
llevar a observación en el microscopio
los dejamos con el profesor Carlos
Valencia quien expondrá los resultados
obtenidos para comenzar a enfocar en el
microscopio necesitamos inicialmente
hacerlo en 4x para que nos dé una
panorámica amplia de la imagen en este
caso podemos observar estructuras
filamentosas que recorren la placa de
lado a lado todas esas estructuras ya
están teñidas con azul de
lactofenol en segunda instancia Se
observa la
lámina ya con un aumento de
10x lo que nos indica que estamos
observando 10 veces más grande la imagen
que
veíamos en la anterior con respecto de
la anterior pueden observar también
estructuras
filamentosas algunas muy bien teñidas de
color azul como en el en el extremo
superior derecho y otras en el centro de
la placa con un poco de menos tinción lo
que nos indica que el hongo obviamente
eraa un hongo yalino es decir sin
ninguna coloración y lo que permite que
el colorante pueda penetrar
perfectamente la estructura filamentosa
en este caso las
ifas
excelente por último observamos la
imagen a
40x lo que nos permite encontrar con más
detalle qué es lo que contienen estas
estructuras filamentosas en algunos de
los casos podemos observar como voy a
señalar acá
tabiques que permiten la división de
estas estructuras y finalmente algunas
de ellas terminan con unos abombamientos
pequeños llamados
[Música]
conidios observe que en algunos casos
las estructuras han permitido la
permeación o la penetración del azul de
lactofenol de una manera adecuada y en
otros no tanto Eso depende de la
densidad de ifas que tenga la
[Música]
placa
esta misma operación se puede repetir
con el aumento de 100x la idea es que en
el laboratorio puedan hacerlo con
absolutamente todos los objetivos que
tiene el
microscopio muy bien a continuación
tenemos entonces la placa teñida con koh
en este caso la tenemos en una
visualizándolo a 4x pueden observar
también estructuras
filamentosas a continuación tenemos la
toma en
10x ya se observan más detalles de esas
estructuras filamentosas y adicional a
ello observamos que muchas de ellas
poseen una pigmentación de color café
similar a la melanina nuestra y
Aparentemente estamos en presencia de un
hongo dematiáceo o pigmentado la tinción
de cavacha es una tinción más suave y
eso nos permite observar estas
estructuras
de matias o pigmentadas de una mejor
manera También estamos en presencia de
estructuras filamentosas septadas o con
tabiques en su interior como pueden
observar acá como pueden observar
acá finalmente tenemos la observación en
100x y vemos la estructura muy bien
tabicada de las ifas
de este
hongo y obviamente también observamos
aquí al extremo
derecho la presencia entonces de
pigmentación café o melanina que posee
dicho
関連動画をさらに表示
5.0 / 5 (0 votes)