anticuerpos policlonales y monoclonales

Summary

Este video explora las técnicas de inmunoensayo y la producción de anticuerpos, esenciales para diagnóstico en laboratorios de inmunología. Se explica cómo se generan anticuerpos policlonales y monoclonales mediante la inyección de antígenos en animales como ratones y conejos. A través de varios pasos, se producen anticuerpos que reaccionan con antígenos específicos. Además, se destacan técnicas de amplificación mediante enzimas, sustancias fluorescentes o radioactivas. El video también plantea preguntas clave para reforzar el conocimiento sobre el uso de estos anticuerpos en distintas técnicas diagnósticas, como la aglutinación y la inmunofluorescencia.

Takeaways

• 🔬 Los inmunoensayos son técnicas fundamentales en laboratorios de inmunología y otras áreas, utilizadas para determinar concentraciones de sustancias o células a través de la reacción antigeno-anticuerpo.
• 🐁 Se pueden obtener anticuerpos policlonales o monoclonales; los primeros son producidos generalmente en conejos y los segundos en ratones.
• 💉 La producción de anticuerpos comienza con la inyección de un antígeno en un animal de laboratorio para inducir una respuesta inmunológica.
• 🔄 Se realizan inmunizaciones secundarias para obtener una respuesta inmunológica de memoria más potente, lo que resulta en una mayor producción de anticuerpos.
• 🧬 Los anticuerpos policlonales son una mezcla dirigida hacia diferentes epítopos del antígeno, mientras que los monoclonales son específicos de un único epitopo.
• 🧪 La fusión de células B con células tumorales (mieloma) da lugar a hibridomas, que son capaces de producir anticuerpos y crecer indefinidamente.
• 🌡 Se utiliza un medio selectivo para diferenciar a las células fusionadas (hibridomas) de las no fusionadas, permitiendo la selección de las células productoras de anticuerpos.
• 🧫 A través de la técnica de dilución límite, se identifican y aíslan clones específicos de hibridomas que producen anticuerpos de interés.
• 🔎 Se realizan inmunoensayos para evaluar la reacción de los clones con el antígeno de interés, determinando así los anticuerpos monoclonales adecuados para la técnica en desarrollo.
• 📈 Los anticuerpos monoclonales se pueden producir en grandes cantidades a través de la cultivación de hibridomas en incubadores o la inyección en líquido ascítico.

Q & A

¿Qué es un inmunoensayo y por qué es importante en el laboratorio de inmunología?

Un inmunoensayo es una técnica que utiliza la reacción entre un antígeno y un anticuerpo para determinar concentraciones de distintas sustancias o células. Es fundamental en el laboratorio de inmunología porque permite la detección y cuantificación de antigenes específicos.

¿Cuáles son las características físicas que pueden ser utilizadas en técnicas de precipitación y aglutinación?

Las características físicas utilizadas en técnicas de precipitación y aglutinación incluyen la capacidad de dispersar la luz, la turbidez que producen en suspensión y su capacidad de precipitar o aglutinar.

¿Cómo se pueden combinar los anticuerpos con otras sustancias para ampliar su uso?

Los anticuerpos pueden combinarse con enzimas para realizar ensayos enzimáticos, con sustancias radioactivas, aunque estas técnicas están en desuso, o con sustancias fluorescentes para realizar exámenes al microscopio o mediante fluorímetros o citómetros.

¿Qué animales se utilizan comúnmente para la producción de anticuerpos policlonales y monoclonales?

Para obtener anticuerpos monoclonales se utiliza generalmente un ratón, mientras que para anticuerpos policlonales se suelen emplear conejos, aunque también se pueden usar otras especies como cabras o ovejas.

¿Cuál es el objetivo de inyectar un antígeno en un animal de laboratorio?

El objetivo es inducir una respuesta inmunológica en el animal, lo que resultará en la producción de anticuerpos específicos contra el antígeno inyectado.

¿Qué sucede después de la primera inmunización con un antígeno?

Después de la primera inmunización, se espera que el animal produzca una respuesta inmunológica primaria. A los 7 a 10 días, se realiza una segunda inmunización para obtener una respuesta secundaria de memoria más potente.

¿Cómo se obtienen los anticuerpos monoclonales a partir de la sangre del animal?

Después de la segunda inmunización, se extrae la sangre del animal y se separa el suero para obtener una mezcla de anticuerpos. Se fusionan las células B con células tumorales para formar hibridomas, que son clonados y seleccionados para producir anticuerpos monoclonales específicos.

¿Qué es un hibridoma y cuáles son sus características?

Un hibridoma es una célula resultante de la fusión entre una célula B y una célula tumoral (mieloma). Tiene la capacidad de crecimiento permanente del tumor y la capacidad del linfocito B de producir anticuerpos.

¿Cómo se determina si una célula B es un hibridoma que produce anticuerpos de interés?

Se utiliza una técnica de dilución límite para sembrar células B en placas y, después de incubar, se realizan inmunoensayos para identificar a los clones que producen anticuerpos específicos frente al epítopo de interés.

¿Cómo se obtiene una gran cantidad de anticuerpos monoclonales una vez identificados los clones productivos?

Una vez identificados los clones productivos, se realizan resemblajes en gran cantidad de líquido y se incuban para obtener una elevada cantidad de células B productoras de anticuerpos. Alternativamente, se pueden reinyectar los hibridomas en líquido ascítico para obtener una concentración elevada de anticuerpos.