TINCION DE GRAM

Microbiología y algo más "YBT"

15 Mar 202108:13

Summary

TLDREl video explica el proceso de la tinción de Gram, utilizando cuatro colorantes: cristal violeta, lugol, alcohol-acetona y fucsina. Primero, se realiza un extendido de una muestra, como secreción vaginal, se seca, se fija con calor y luego se aplica cada colorante en un orden específico. El cristal violeta tiñe las bacterias Gram positivas de color violeta, mientras que la fucsina tiñe las Gram negativas de rosa. Finalmente, la muestra se observa al microscopio para identificar bacterias como cocos (redondos) o bacilos (en forma de bastón), y se asigna una tarea práctica al final.

Takeaways

🔬 El tema central del video es la tinción de Gram, que utiliza cuatro colorantes en un orden específico.
🧪 Los cuatro colorantes son cristal violeta, lugol, alcohol acetona (decolorante), y fucsina o azafrán.
🧤 Antes de comenzar el procedimiento, se debe obtener una muestra y usar guantes para seguridad.
🧫 La muestra puede ser de orina, secreción vaginal, u otros fluidos, y se realiza un extendido en un portaobjetos.
🔥 Es necesario fijar la muestra pasando el portaobjetos por un mechero para evitar que se decolore durante los lavados.
🟣 El cristal violeta tiñe las bacterias grampositivas, que se visualizan de color azul o violeta.
🧩 El lugol fija la unión entre el cristal violeta y el peptidoglicano de las bacterias grampositivas.
💧 El decolorante, alcohol acetona, elimina el exceso de colorante y se aplica por 15-30 segundos.
🟠 La fucsina o azafrán tiñe las bacterias gramnegativas, que se visualizan de color rosado o fucsia.
🔬 El microscopio se utiliza con aceite de inmersión para observar las formas de las bacterias (cocos o bacilos) y sus colores (grampositivos o gramnegativos).

Q & A

¿Qué es la tinción de Gram y para qué se utiliza?
-La tinción de Gram es una técnica de laboratorio utilizada para diferenciar bacterias en dos grupos principales: Gram positivas y Gram negativas, según sus características de pared celular. Esta técnica es fundamental para la identificación bacteriana en microbiología clínica.
¿Cuáles son los colorantes utilizados en la tinción de Gram?
-En la tinción de Gram se utilizan cuatro colorantes: cristal violeta o violeta de genciana, lugol, alcohol-acetona (decolorante), y finalmente fucsina o azafranina.
¿Cuál es la función del cristal violeta en la tinción de Gram?
-El cristal violeta tiene la función de teñir a las bacterias Gram positivas, que se visualizarán de color azul o violeta debido a su afinidad con el péptido glicano en la pared celular.
¿Qué hace el lugol en el proceso de tinción?
-El lugol actúa como fijador, ayudando a reforzar la unión entre el cristal violeta y el péptido glicano en las bacterias Gram positivas, lo que estabiliza el color.
¿Qué papel juega el decolorante en la tinción de Gram?
-El decolorante, que es alcohol-acetona, se utiliza para eliminar el exceso de cristal violeta de las bacterias que no retienen el tinte, permitiendo diferenciar entre Gram positivas y Gram negativas.
¿Cómo se visualizan las bacterias Gram negativas después de aplicar el colorante final?
-Las bacterias Gram negativas se tiñen de color rosado o fucsia después de aplicar fucsina o azafranina, ya que no retienen el cristal violeta tras la decoloración.
¿Cómo se debe fijar la muestra antes de la tinción de Gram?
-La muestra debe fijarse pasándola tres veces por una llama después de que se haya secado. Esto asegura que la muestra no se desprenda durante los lavados del proceso de tinción.
¿Qué se puede observar bajo el microscopio después de realizar la tinción de Gram?
-Bajo el microscopio, se pueden observar cocos (bacterias redondas) o bacilos (bacterias en forma de bastón). Las bacterias Gram positivas aparecerán en tonos lilas o violetas, mientras que las Gram negativas se verán rosadas o fucsias.
¿Cuál es la importancia del aceite de inmersión en la observación microscópica?
-El aceite de inmersión se utiliza para mejorar la resolución y la claridad de las imágenes bajo el microscopio, especialmente a altos aumentos, permitiendo una mejor visualización de las bacterias teñidas.
¿Cómo se debe realizar el extendido de una muestra para la tinción de Gram?
-El extendido de la muestra debe hacerse de manera uniforme sobre el portaobjetos. Si la muestra es líquida, se extiende con movimientos circulares del centro hacia afuera. Es importante secar y fijar la muestra antes de la tinción para evitar que se decolore o se desprenda durante los lavados.