Preparación de muestras para análisis microbiológicos | | UPV
Summary
TLDRAna González, profesora de Biotecnología en la Universidad Politécnica de Valencia, presenta un tutorial para preparar muestras para análisis microbiológicos. Cubre cómo tomar, pesar y diluir muestras, realizar el triturado y homogeneizar, y preparar diluciones seriadas decimales. Detalla el uso de equipos como una balanza, mechero Bunsen, pinzas y espátulas, y un triturador homogeneizador. Expone la importancia de mantener condiciones asépticas y evitar la destrucción de microorganismos durante el proceso.
Takeaways
- 🧪 El objetivo principal es preparar muestras para análisis microbiológicos.
- ⚖️ Se debe aprender a tomar, pesar y diluir muestras correctamente para análisis posteriores.
- 🛠️ Los materiales necesarios incluyen balanza, mechero Bunsen, pinzas, espátulas y un triturador homogeneizador (Stomacher).
- 🔥 El mechero Bunsen se utiliza para trabajar en condiciones asépticas y esterilizar el material.
- 🌡️ Es importante esterilizar pinzas y espátulas con alcohol y flamearlas antes de su uso.
- 🥄 Las muestras deben ser representativas de la totalidad del alimento, considerando su composición.
- 💧 El diluyente debe añadirse en condiciones estériles y no alterar la biota de los alimentos.
- ⚙️ El triturador homogeneizador golpea la muestra para liberar las bacterias sin destruirlas.
- 🔄 Las diluciones decimales se preparan transferiendo un mililitro de la suspensión madre a tubos con nueve mililitros de agua destilada estéril.
- ⏳ Los análisis deben realizarse dentro de las dos horas siguientes a la preparación de las diluciones para obtener recuentos precisos.
Q & A
¿Quién es Ana González y qué profesión ejerce?
-Ana González es profesora del departamento de biotecnología de la Universidad Politécnica de Valencia.
¿Cuál es el objetivo principal del objeto de aprendizaje descrito en el guion?
-El objetivo principal es enseñar a preparar muestras para análisis microbiológicos.
¿Cuáles son los objetivos de aprendizaje específicos mencionados en el guion?
-Los objetivos de aprendizaje incluyen aprender a tomar, pesar y diluir muestras para su análisis posterior, realizar el triturado y homogeneizar las muestras y preparar diluciones seriadas decimales para recuentos microbianos.
¿Qué herramientas se necesitan para la preparación de las muestras según el guion?
-Se necesitan una balanza, mechero Bunsen, pinzas, espátulas, bolsas para pesar la muestra y un triturador homogeneizador, como un triturador de placas o stomacher.
¿Cómo se debe trabajar durante la preparación de las muestras para mantener las condiciones asépticas?
-Trabajar cerca de la llama del mechero Bunsen, utilizando material estéril y evitando la contaminación.
¿Qué pasos se siguen para tomar una muestra representativa de alimentos?
-Se deben usar pinzas y espátulas esterilizadas, tomar una fracción representativa del alimento de la totalidad de la muestra, y considerar tomar fracciones de cada componente si la muestra está compuesta por varios tipos.
¿Qué es un diluyente y cómo se añade a la muestra?
-Un diluyente es un líquido que se utiliza para disolver o diluir la muestra. Se añade cerca de la llama del mechero Bunsen, flameando la boca del bote para mantener condiciones estériles.
¿Cuál es la importancia de realizar un triturado y homogeneizar la muestra?
-Es necesario para obtener una mezcla homogénea que deje a las bacterias en suspensión, y evitar la destrucción de los microorganismos por rotura de su membrana o por calentamiento excesivo.
¿Cómo se preparan las diluciones seriadas decimales y para qué sirven?
-Se transfiere un mililitro de la suspensión madre a un tubo con nueve mililitros de agua destilada estéril, se homogeneiza y se repiten los pasos para obtener más diluciones. Sirven para iniciar las determinaciones que requieran recuentos microbianos.
¿Cuál es la recomendación para el tiempo que debe transcurrir desde la preparación de las diluciones hasta el análisis?
-Los análisis no deberían demorarse más de dos horas desde la preparación de las diluciones.
Outlines
🧪 Introducción a la preparación de muestras para análisis microbiológicos
Ana González, profesora del Departamento de Biotecnología de la Universidad Politécnica de Valencia, introduce los objetivos del aprendizaje: aprender a preparar muestras para análisis microbiológicos. Los objetivos incluyen tomar, pesar, diluir muestras, triturarlas y homogeneizarlas, y preparar diluciones seriadas decimales para recuentos microbianos. Se describen los materiales necesarios como la balanza, mechero Bunsen, pinzas, espátulas, bolsas de muestras, y un triturador homogeneizador. Se explica el procedimiento aséptico necesario para la toma de muestras, el uso de alcohol para esterilización y la importancia de una muestra representativa. Posteriormente, se detalla cómo añadir el diluyente sin alterar la biota del alimento, y cómo realizar una dilución uno a diez, utilizando diferentes diluyentes comunes en microbiología.
🔬 Realización de diluciones seriadas para análisis microbiológicos
Se continúa con la descripción del procedimiento para realizar diluciones seriadas. González explica cómo transferir un mililitro de la suspensión madre a tubos con nueve mililitros de agua destilada estéril. Se enfatiza la importancia de flamear las bocas de los tubos para mantener condiciones estériles y desechar las puntas entre diluciones. Después de cada transferencia, se agita la mezcla para homogeneizarla antes de realizar la siguiente dilución. El proceso continúa hasta alcanzar el número deseado de diluciones. Finalmente, se recalca la importancia de una manipulación aséptica rigurosa, el uso de materiales estériles, y la necesidad de evitar el daño de los microorganismos para obtener una distribución homogénea en las diluciones. Las diluciones se deben analizar en menos de dos horas para evitar pérdida de precisión en los recuentos microbianos.
Mindmap
Keywords
💡Muestras
💡Análisis microbiológico
💡Triturado y homogeneizado
💡Diluciones seriadas decimales
💡Condiciones asépticas
💡Diluyente
💡Suspensión madre
💡Recuento microbiano
💡Materiales estériles
💡Homogeneización
Highlights
Ana González es profesora del departamento de biotecnología de la Universidad Politécnica de Valencia.
El objetivo del aprendizaje es preparar muestras para análisis microbiológicos.
Los aprendices aprenderán a tomar, pesar y diluir muestras para su análisis.
Se enseña cómo realizar el triturado y homogeneizar muestras.
Se explica cómo preparar diluciones seriadas decimales para recuentos microbianos.
Se requiere una balanza, mechero Bunsen, pinzas y espátulas para la toma de muestra.
Se necesita un triturador homogeneizador, como un triturador de placas o stomacher.
Se deben trabajar en condiciones asépticas y con material estéril.
Se describe el proceso de tarar la muestra con la balanza.
Se detalla cómo esterilizar herramientas con alcohol y fuego.
Se explica la importancia de tomar fracciones representativas de la muestra.
Se menciona la necesidad de añadir el diluyente en condiciones estériles.
Se describe el proceso de triturado y homogeneización utilizando el triturador de paletas.
Se resalta la importancia de evitar la destrucción de microorganismos durante el proceso.
Se detalla cómo realizar las diluciones seriadas decimales con agua destilada estéril.
Se indica la necesidad de trabajar en condiciones estériles al preparar las diluciones.
Se enfatiza la importancia de obtener una mezcla homogénea para una distribución equilibrada de microorganismos.
Se menciona que los análisis microbiológicos no deben demorarse más de dos horas después de preparar las diluciones.
Transcripts
hola soy ana gonzález profesora del departamento de biotecnología de la universidad politécnica de valencia
y en este objeto de aprendizaje vamos a aprender a preparar muestras para análisis microbiológicos
los objetivos de aprendizaje son los siguientes aprender a tomar
pesar y diluir muestras para su posterior análisis
realizar el triturado y homogeneizado de las muestras y finalmente preparar diluciones seriadas decimales para poder realizar recuentos microbianos posteriores
para la preparación de las muestras necesitamos como podéis ver en las imágenes una balanza
mechero bunsen pinzas y espátulas para la toma de muestra bolsas donde pesar la muestra
y un triturador homogeneizador en este caso esto es un triturador de placas o stomacher
para la preparación de las muestras en primero lugar habrá que pesar la muestra encendemos mechero
siempre porque hay que trabajar en las proximidades de la llama del mismo en condiciones asépticas y con material estéril
a continuación ponemos la bolsa de toma de muestra y una vez la bolsa colocada como veis en el video
vamos a
tarar
tararemos para que la pesada sea correcta
una vez tarada
la báscula pasamos a la toma de muestra
utilizaremos utilizaremos
pinzas y espátulas sumergidas en alcohol
no se si se llega a apreciar en el video pero en la base hay alcohol
a continuación las flamearemos a la llama del mechero
para esterilizarlas y esperaremos que se enfríen para no tomar la muestra con ellas demasiado calientes y destruir los microorganismos
una vez frías pasamos a tomar la fracción del alimento que vamos a pesar que debe ser representativa
de la totalidad de la muestra
es importante tener en cuenta que si la muestra está formado por diversos tipos de componentes
habrá que tomar fracciones representativas de cada uno de ellos
el siguiente paso es adicionar el diluyente a la muestra
también habrá que adicionarlo en condiciones estériles es decir
cerca de la llama del mechero
flamearemos la boca del bote donde se encuentra el diluyente y lo añadiremos
este diluyente no debe producir modificaciones cualitativas ni cuantitativas en la biota de los alimentos que van a ser analizados
y la cantidad de diluyente a añadir dependerá de la dilución de la suspensión madre que queramos preparar
por ejemplo si quisiéramos preparar una dilución uno diez y hubiéramos tomado una fracción de diez
gramos de alimento habría que adicionar
noventa mililitros de diluyente
hay distintos tipos de diluyente los más utilizados son el agua de triptona con sal la solución
de ringer uno cuatro y el agua de peptona tamponada
una vez añadido el diluyente pasamos al triturado y homogeneizado de la muestra
en este caso veréis que utilizamos el triturador de paletas que os comentaba anteriormente
es uno de los más utilizados en microbiología alimentaria
el triturador lo que hace es golpear rítmicamente la mezcla de alimento y diluyente
los choques producidos por las paletas dislaceran el alimento
y dejan las bacterias en suspensión
es necesario obtener una mezcla homogénea por tanto dependiendo del tipo de producto que vayamos a analizar
la duración de esta etapa será más o menos larga
suelen ser unos minutos
a continuación hay que tener en cuenta que es importantísimo evitar la destrucción de los microorganismos
una vez
preparada la muestra vamos a proceder a realizar las diluciones decimales
para ello necesitamos tubos de nueve mililitros de agua destilada estéril como podéis ver aquí la imagen
que además están rotulados
tantos como diluciones vayamos a preparar
una pipeta que nos permita tomar un mililitro y puntas para pipeta agitador órbital donde homogeneizar las diluciones
y un mechero bunsen para trabajar en condiciones
estériles
para la preparación de las diluciones decimales para la preparación de las diluciones decimales transferiremos
un mililitro
de la suspensión madre a un tubo que contenga nueve mililitros de agua destilada estéril
como veis
pipeta que intento marcar en el video de mil microlitros o lo que es lo mismo un mililitro
cargamos el asa
perdón la punta sin tocarla directamente a través del plástico de la bolsa
y tomamos la muestra
tomaremos un mililitro
de la suspensión madre
si en la suspensión madre hubiéramos preparado diez gramos y le hubiéramos adicionado noventa de diluyente sería la primera dilución
tomamos el mililitro
y lo sembramos en un tubo que contenga nueve mililitros de agua destilada estéril fijaros que
flameamos la boca del tubo cuando lo abrimos y cuando lo cerramos
entre dilución y dilución eliminamos la punta en un bote con lejía
y antes de sembrar la siguiente dilución agitamos para homogeneizar la misma
una vez agitado y con una nueva punta
tomamos un mililitro de esta nueva dilución
y lo incorporamos a un tubo que contenga nueve mililitros de agua destilada estéril
continuaremos así sucesivamente hasta lograr el número de diluciones deseadas
por tanto concluimos que la preparación de las muestras para análisis microbiológico exige
unas reglas de manipulación estrictas perdón una reglas de manipulación aséptica muy estrictas la utilización de materiales
y diluyentes estériles hay que evitar una especie de manipulación de las muestras y en el triturado
hay que evitar la destrucción de los microorganismos por rotura de su membrana o por calentamiento excesivo
y obtener siempre
una mezcla homogénea para lograr una distribución equilibrada de los mismos
la serie de diluciones decimales servirá para iniciar las determinaciones en las que sea necesario
obtener recuentos
y una vez preparadas las diluciones los análisis no deberán demorarse más de dos horas
desde la preparación de las mismas
muchas gracias y espero que esto os pueda servir de ayuda
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