Video Animasi: Penjelasan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Rumah Biologi Indonesia

2 Apr 202306:34

Summary

TLDRفي هذه الحلقة من برنامج 'منزل البيولوجيا'، يتم استكشاف تقنية الكروماتوغرافيا الطبقية الرقيقة (KLT) كأداة لفصل المكونات الكيميائية في العينة. يوضح الفيديو كيفية عمل التقنية التي تعتمد على وجود مرحلتين: المرحلة الثابتة (اللوحة المبطنة بالسيليكا أو السيلولوز) والمرحلة المتنقلة (المذيب). كما يتم شرح كيفية تأثير التفاعلات بين المركبات والمرحلة الثابتة على سرعة صعودها على اللوحة. يُستخدم أيضًا ضوء الأشعة فوق البنفسجية أو الكواشف الكيميائية لمراقبة المكونات المنفصلة وتحديد قيم معامل الاحتفاظ (RF) لكل مكون.

Takeaways

😀 الكروماتوغرافيا الطبقية الرقيقة (KLT) هي تقنية كروماتوغرافية تُستخدم لفصل المكونات التي لا تتطاير بسهولة.
😀 في تقنية KLT، هناك مرحلتين: المرحلة المتحركة (المذيبات) والمرحلة الثابتة (اللوحة المصنوعة من السيليكا أو الألومينا أو السليلوز).
😀 تبدأ عملية KLT برسم خط بالقلم الرصاص على اللوحة وترك علامة لتحديد مكان وضع العينة.
😀 يتم وضع نقطة صغيرة من العينة على اللوحة في المواقع المحددة على الخط، ثم يتم تجفيف العينة.
😀 اللوحة المصنوعة من KLT تُوضع في غرفة بحيث لا تلامس النقاط السطح المذيب.
😀 الحركة الصاعدة للمذيب تؤدي إلى تحريك العينة عبر اللوحة بناءً على قوى الشعيرات الدموية.
😀 الفصل بين المكونات يتم بناءً على التفاعلات الجزئية مع المذيب والمرحلة الثابتة.
😀 المكونات التي تحتوي على ألفة أقل للمرحلة الثابتة تتحرك بسرعة أكبر، بينما المكونات التي تتمتع بألفة أكبر تتحرك ببطء.
😀 الفصل يعتمد على خصائص المذيب غير القطبي ولوحة KLT التي تكون عادةً قطبية.
😀 يمكن رؤية مكونات العينة بعد المعالجة باستخدام الأشعة فوق البنفسجية أو باستخدام الكواشف الكيميائية مثل اليود أو النينهدين.
😀 لحساب قيمة الاحتفاظ (RF) لكل مكون، يتم مقارنة المسافة التي تحركتها المكونات مع المسافة التي تحركها المذيب.

Q & A

ما هو الكروماتوغرافيا الطبقية الرقيقة (KLT)؟
-الكروماتوغرافيا الطبقية الرقيقة (KLT) هي تقنية تُستخدم لفصل المكونات من خليط لا يتبخر بسهولة. تعتمد على وجود مرحلتين: المرحلة الثابتة والمرحلة المتنقلة.
ما هي المرحلة الثابتة في KLT؟
-المرحلة الثابتة في KLT تتكون عادة من طبقة من هلام السيليكا أو أكسيد الألومنيوم أو السليلوز، وهي التي تبقى ثابتة أثناء التجربة.
كيف تعمل المرحلة المتنقلة في KLT؟
-المرحلة المتنقلة في KLT تتكون من مذيب أو خليط من المذيبات، التي تتحرك عبر الطبقة الثابتة بواسطة تأثير الشعيرات الرفيعة، مما يساعد في فصل المكونات.
ما هو الهدف من وضع النقاط على اللوحة في KLT؟
-يتم وضع النقاط على اللوحة باستخدام قلم رصاص لتحديد موقع الخليط أو المكونات التي سيتم فصلها. هذه النقاط تُظهر الموقع الأولي للمكونات على اللوحة.
كيف يتم فصل المكونات في KLT؟
-يتم فصل المكونات بناءً على تفاعلاتها المختلفة مع المرحلتين الثابتة والمتنقلة. المكونات ذات التفاعل الضعيف مع المرحلة الثابتة تتحرك أسرع من تلك التي لها تفاعل قوي.
ما هي العلاقة بين القُدرات القطبية للمركبات وسرعة حركتها في KLT؟
-المركبات الأكثر قطبية تتمسك بالمرحلة الثابتة، وبالتالي تتحرك ببطء أكبر، بينما المركبات الأقل قطبية تتحرك بسرعة أكبر لأنها تتفاعل أقل مع المرحلة الثابتة.
كيف يتم تصور النتائج بعد إجراء عملية الفصل؟
-بعد فصل المركبات، يمكن تصور النتائج تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية أو باستخدام كواشف كيميائية مثل اليود أو النينهديرين أو الفانيليين.
لماذا يتم استخدام الفوسفور في KLT؟
-يُستخدم الفوسفور في بعض الأحيان كطبقة لتغطية اللوحة لمساعدة في جعل المركبات غير الملونة مرئية تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية.
ما هو معامل الاحتفاظ (RF) في KLT؟
-معامل الاحتفاظ (RF) هو نسبة المسافة التي قطعها المركب إلى المسافة التي قطعها المذيب. يُستخدم لتحديد خصائص المركبات بناءً على حركتها في التجربة.
كيف يتم حساب معامل الاحتفاظ (RF)؟
-يتم حساب RF عن طريق مقارنة المسافة التي قطعها المركب مع المسافة التي قطعها المذيب. يتم تحديد القيمة باستخدام المعادلة RF = (المسافة التي قطعها المركب) / (المسافة التي قطعها المذيب).