Aseptic Technique

Summary

Dans cette vidéo, vous apprendrez les pratiques et procédures appropriées pour effectuer une technique aseptique. L'objectif est de transférer une monoculture bactérienne dans un milieu frais sans introduire de micro-organismes contaminant. Le processus inclut l'utilisation de l'anse inoculatrice et de l'aiguille inoculatrice, la stérilisation des outils avec un bec Bunsen, et diverses méthodes de transfert de bactéries, notamment d'un milieu liquide à une boîte de Pétri, d'un liquide à un autre liquide, et d'une plaque de Pétri à un tube de culture. Chaque étape met l'accent sur l'importance de la stérilité et de la sécurité dans le processus.

Takeaways

• 😀 La technique aseptique permet de transférer des bactéries dans un milieu frais sans introduire de micro-organismes contaminants.
• 😀 Les outils couramment utilisés pour transférer les bactéries sont la boucle d'inoculation et l'aiguille d'inoculation.
• 😀 L'utilisation correcte du bec Bunsen est essentielle en technique aseptique pour stériliser les outils.
• 😀 Pour allumer un bec Bunsen, il faut fermer la valve, ajuster le col pour couvrir les évents et ouvrir lentement le gaz.
• 😀 La température de la flamme du bec Bunsen peut être réglée en contrôlant l'apport en oxygène, offrant trois niveaux de chaleur : jaune, bleu moyen, et bleu vif.
• 😀 Les outils d'inoculation doivent être stérilisés en les passant à travers la partie la plus chaude de la flamme et ne doivent pas être posés sur une surface quelconque.
• 😀 Lors du transfert de bactéries d'une culture liquide à une boîte de Petri, il est important de stériliser la boucle, de passer le col du flacon à la flamme, puis de transférer les bactéries.
• 😀 Pour étaler les bactéries sur la boîte de Petri, il faut tourner la plaque et étaler les bactéries dans toutes les directions pour une répartition uniforme.
• 😀 Lors du transfert de bactéries d'une culture liquide vers un tube liquide, il faut stériliser la boucle, puis l'utiliser pour inoculer le tube avec les bactéries.
• 😀 Pour transférer des bactéries d'une boîte de Petri à une culture de stab, il faut utiliser une aiguille d'inoculation stérilisée et faire trois piqûres profondes dans le tube contenant l'agar nutritif.

Q & A

Qu'est-ce que la technique aseptique et pourquoi est-elle importante ?

La technique aseptique permet de transférer des bactéries d'une culture à un autre milieu sans introduire de microorganismes contaminants. Elle est essentielle pour garantir la pureté des cultures et éviter toute contamination croisée.

Quels sont les outils les plus couramment utilisés pour transférer des bactéries ?

Les outils les plus courants pour transférer des bactéries sont la boucle d'inoculation et l'aiguille d'inoculation.

Comment allumer un bec Bunsen correctement ?

Pour allumer un bec Bunsen, commencez par fermer la valve à la base, puis tournez le collier pour couvrir les évents. Allumez ensuite le gaz et ajustez la hauteur de la flamme en régulant le débit de gaz. Vous pouvez ajuster la température de la flamme en modifiant l'entrée d'oxygène via le collier.

Quels types de flamme peut-on obtenir avec un bec Bunsen ?

Il existe trois types de flammes : la flamme jaune et orange, qui est la plus froide ; la flamme bleue, qui est de température moyenne ; et la flamme bleue rugissante, qui est la plus chaude et possède un cône bleu clair au centre.

Pourquoi faut-il stériliser les outils d'inoculation avant utilisation ?

Il est nécessaire de stériliser les outils d'inoculation pour éliminer toute contamination microbienne et garantir que seules les bactéries désirées sont transférées lors des procédures.

Comment transférer des bactéries d'une culture liquide vers une plaque de Petri ?

Après avoir stérilisé la boucle d'inoculation, retirez le couvercle du flacon de culture liquide, passez le goulot dans la flamme, puis plongez la boucle dans la culture. Ensuite, stérilisez à nouveau le goulot avant de remettre le couvercle et de transférer les bactéries sur la plaque de Petri en les étalant uniformément.

Comment transférer des bactéries d'une culture liquide vers un autre milieu liquide ?

Après avoir stérilisé la boucle d'inoculation, retirez le couvercle du flacon de culture liquide et plongez la boucle dans la culture. Stérilisez à nouveau le goulot, puis prélevez les bactéries et inoculez-les dans un tube de milieu liquide, en stérilisant le goulot après chaque étape.

Qu'est-ce qu'une culture de type 'stab' et comment transférer des bactéries dans ce type de culture ?

Une culture 'stab' est une culture dans laquelle les bactéries sont ensemencées profondément dans un tube de milieu, en effectuant des piqûres avec une aiguille d'inoculation. Après avoir stérilisé l'aiguille, on prélève une colonie sur une plaque de Petri et on réalise trois piqûres profondes dans le milieu du tube.

Comment tester si une boucle d'inoculation est bien refroidie avant de l'utiliser ?

On peut tester si la boucle est refroidie en la tapotant sur une zone claire de la plaque d'agar, tout en maintenant le couvercle de la plaque comme bouclier pour éviter toute contamination.

Pourquoi est-il important de ne pas poser les outils d'inoculation stérilisés sur n'importe quelle surface ?

Il est crucial de ne pas poser les outils stérilisés sur des surfaces pour éviter qu'ils ne soient contaminés par des microorganismes présents sur ces surfaces, ce qui compromettrait l'intégrité de la procédure aseptique.