The NEW Celldiscoverer 7 (CD7) - Workflow demonstration on mouse brain sections

CCI University of Gothenburg

30 Mar 202117:44

Summary

TLDREn esta presentación, Rafael Camacho, oficial científico del Centro de Imágenes Celulares, introduce el nuevo microscopio CD7, destacando su capacidad de adquisición automática de imágenes. Junto a Katie, estudiante de doctorado, exploran secciones cerebrales de un modelo de ratón con Alzheimer. Usando tintes fluorescentes, analizan la interacción entre las placas y los microglías. El CD7 permite una configuración experimental eficiente, con la posibilidad de reutilizar experimentos previos y automatizar el proceso de imagen. La presentación ilustra cómo el sistema optimiza la investigación en neurociencia, facilitando el análisis detallado de muestras sin necesidad de supervisión constante.

Takeaways

🔬 Rafael Camacho, oficial científico en el Centro de Imagen Celular, presenta el nuevo microscopio CD7, destacando su capacidad para la adquisición automática de imágenes.
🧠 El microscopio se utiliza para estudiar secciones cerebrales fijas de un modelo de ratón con enfermedad de Alzheimer, que desarrolla placas similares a las que se encuentran en humanos.
🧪 Se emplean diferentes técnicas de tinción, incluyendo colorantes fluorescentes (LCOS) para identificar estructuras de placas y anticuerpos para marcar microglía, las células inmunitarias del cerebro.
📸 El CD7 permite la carga automática de muestras y el reconocimiento de propiedades clave, como el material y el grosor de la base de la muestra.
🎥 La imagen inicial se establece utilizando un pipeline de adquisición simple, comenzando con la imagen de transmisión y luego aplicando iluminación oblicua para un mejor contraste.
🤖 El proceso es semi-automático, permitiendo que el operador defina configuraciones de adquisición de imágenes que pueden reutilizarse en diferentes muestras.
🔗 Se presenta una estrategia avanzada que conecta dos experimentos: uno para medir fluorescencia y otro para imágenes de superresolución de las interacciones entre placas y microglía.
📊 La función de adquisición guiada permite realizar tareas de imagen complejas sin necesidad de estar presente en el microscopio.
📂 Al finalizar el proceso automatizado, las imágenes adquiridas se analizan y organizan en un proyecto para facilitar la navegación y revisión de los resultados.
✅ Los resultados obtenidos muestran placas identificadas, permitiendo una exploración detallada de los c stacks generados durante el experimento.

Q & A

¿Cuál es el propósito del microscopio CD7 que Rafael Camacho presenta?
-El microscopio CD7 es un sistema automatizado de adquisición de imágenes que permite cargar muestras y reconocer propiedades importantes como el material del fondo y su grosor.
¿Qué tipo de muestras se utilizan en la demostración y por qué son relevantes?
-Se utilizan secciones de cerebro fijadas de un modelo de ratón con enfermedad de Alzheimer, que desarrollan placas similares a las que se encuentran en humanos con la enfermedad, lo que permite estudiar la interacción celular en un modelo agresivo.
¿Cómo se prepara la muestra antes de ser cargada en el microscopio?
-La muestra se coloca en un soporte de muestra en una posición específica marcada para asegurar que esté bien alineada antes de cargarla en la bandeja del microscopio.
¿Qué técnicas de tinción se utilizan en las secciones de cerebro?
-Se utilizan tintes fluorescentes LCOS para marcar placas y anticuerpos para marcar microglía, lo que proporciona información sobre la morfología y activación de estas células en el cerebro.
¿Qué es la iluminación oblicua y por qué se utiliza en la adquisición de imágenes?
-La iluminación oblicua es una técnica de imagen que mejora el contraste en secciones muy delgadas, lo que es crucial para obtener imágenes claras de las muestras de cerebro.
¿Qué capacidades tiene el CD7 para la automatización en experimentos?
-El CD7 permite automatizar la carga de muestras, la corrección de lentes según las propiedades del fondo y la recolección de imágenes en una amplia región mediante un enfoque de mosaico.
¿Qué tipo de análisis de imagen se realiza después de adquirir las imágenes?
-Se define un pipeline de análisis de imagen que identifica y analiza las placas en las secciones, utilizando estrategias de imagen y análisis para localizar objetos de interés.
¿Qué significa un 'scan 3D' en el contexto de la microscopía CD7?
-Un 'scan 3D' se refiere a una técnica de superresolución que permite visualizar los objetos de interés, como las placas y la microglía, en tres dimensiones, lo que proporciona una visión más detallada de las interacciones celulares.
¿Cómo se puede reutilizar un experimento definido en el microscopio CD7?
-Una vez que se han grabado los parámetros del experimento, se pueden aplicar a diferentes muestras, facilitando la repetición de experimentos con configuraciones similares.
¿Qué es un proyecto Sync Connect y cuál es su propósito?
-Un proyecto Sync Connect organiza y superpone imágenes adquiridas durante los experimentos, facilitando la presentación y análisis de datos al mantener todas las imágenes en una misma carpeta.