Bioquímica I - Práctica 4 (Determinación de Indicadores Cinéticos Enzimáticos)

Laboratorios de Bioquímica UASD
14 Jul 202016:31

Summary

TLDREste video presenta la práctica de indicadores cinéticos enzimáticos, centrada en la alfa amilasa, una enzima clave en la digestión. Se exploran conceptos fundamentales sobre las enzimas, su naturaleza proteica y especificidad, y se detallan tres experimentos. El primero determina el pH óptimo de la alfa amilasa, revelando que su mejor rendimiento ocurre a pH 7. El segundo experimento investiga la temperatura, encontrando que la actividad enzimática es máxima a 37°C. Finalmente, el tercer experimento analiza la concentración de la enzima, mostrando que una concentración del 100% resulta en la completa hidrólisis del almidón. Estos hallazgos destacan la importancia de las enzimas en procesos bioquímicos.

Takeaways

  • 😀 Las enzimas son biocatalizadores de naturaleza proteica que aceleran reacciones químicas sin alterarse después de participar en ellas.
  • 😀 La alfa-amilasa es una enzima clave que actúa sobre el almidón, formando un complejo enzima-sustrato que genera productos.
  • 😀 Las enzimas son altamente específicas y pueden clasificarse según su mecanismo de acción, como oxidoreductasas, hidrolasas, transferasas y ligasas.
  • 😀 La teoría de 'Lock and Key' (cerradura y llave) sugiere que la enzima y el sustrato tienen formas complementarias, mientras que la teoría de 'Induced Fit' (ajuste inducido) implica un ajuste mutuo entre ambos.
  • 😀 La actividad enzimática es crucial en diagnósticos y seguimientos de enfermedades; deficiencias en enzimas pueden provocar manifestaciones clínicas significativas.
  • 😀 Un ejemplo de error metabólico es la intolerancia a la lactosa, que resulta de una deficiencia en la enzima lactasa.
  • 😀 La determinación del pH óptimo para la actividad de la alfa-amilasa mostró que el pH 7 es el más favorable, mientras que valores extremos resultaron en baja o nula actividad.
  • 😀 A temperaturas muy altas, como 100°C, la alfa-amilasa se desnaturaliza y pierde su funcionalidad, siendo 37°C la temperatura óptima para su actividad.
  • 😀 La concentración de la enzima también influye en su actividad; con una concentración adecuada, se logró una hidrólisis total del almidón.
  • 😀 Las enzimas juegan un papel fundamental en la bioquímica, y su estudio es esencial para entender procesos biológicos y aplicaciones clínicas.

Q & A

  • ¿Qué son las enzimas y cuál es su función principal?

    -Las enzimas son biocatalizadores de naturaleza proteica que aceleran la velocidad de las reacciones químicas sin ser consumidas en el proceso.

  • ¿Cómo se clasifican las enzimas según su mecanismo de acción?

    -Las enzimas se pueden clasificar en diferentes grupos, como oxidorreductasas, hidrolasas, transferasas y ligasas, según su mecanismo de acción.

  • ¿Qué significa que una enzima sea altamente específica?

    -Significa que actúa sobre un sustrato particular, y puede ser de especificidad relativa, actuando sobre un grupo de sustratos similares, o absoluta, actuando solo sobre un sustrato específico.

  • ¿Qué ejemplos se mencionan sobre enfermedades relacionadas con deficiencias enzimáticas?

    -Se mencionan la intolerancia a la lactosa, que es la deficiencia de la lactasa, y el albinismo, que se relaciona con la deficiencia de la tirosinasa.

  • ¿Cuál es el objetivo del experimento sobre el pH óptimo de la alfa amilasa?

    -El objetivo es determinar cómo el pH afecta la actividad de la enzima alfa amilasa, utilizando muestras de orina.

  • ¿Qué resultados se obtuvieron en el experimento de pH?

    -Se observó que a pH 3.5 no hubo hidrólisis, a pH 7 hubo hidrólisis total, y a pH 10.5 hubo hidrólisis parcial, indicando que el pH óptimo es 7.

  • ¿Por qué las enzimas se desnaturalizan a altas temperaturas?

    -Las enzimas se desnaturalizan a altas temperaturas, generalmente alrededor de 60 grados Celsius, lo que provoca la pérdida de su función y actividad.

  • ¿Qué se estudia en el experimento sobre la temperatura de la alfa amilasa?

    -Se estudia el efecto de diferentes temperaturas (10°C, 37°C y 100°C) en la actividad de la enzima alfa amilasa utilizando orina.

  • ¿Cuál fue el resultado del experimento de temperatura?

    -A 10°C se observó hidrólisis parcial, a 37°C hubo hidrólisis total, y a 100°C no hubo hidrólisis debido a la desnaturalización de la enzima.

  • ¿Cómo se determina la concentración adecuada de la enzima alfa amilasa?

    -Se realizan ensayos con muestras de orina de diferentes concentraciones (1%, 30% y 100%) para observar su efecto en la actividad de la enzima.

  • ¿Qué resultados se obtuvieron en el experimento sobre la concentración de la enzima?

    -A una concentración del 1% no hubo hidrólisis, a una concentración del 30% hubo hidrólisis parcial, y a 100% hubo hidrólisis total.

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