Polymerase Chain Reaction (PCR)

DNA Learning Center

22 Mar 201001:27

Summary

TLDRLa reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utiliza ciclos repetidos de calentamiento y enfriamiento para crear copias de una región específica de ADN. En primer lugar, la temperatura se eleva cerca del punto de ebullición, separando las cadenas de ADN en hebras individuales. Luego, los cebadores se unen a las secuencias complementarias del ADN, y la enzima Taq polimerasa agrega nucleótidos para extender la segunda cadena. Este proceso se repite en múltiples ciclos, generando millones de copias del ADN objetivo. Tras treinta ciclos, se pueden producir hasta mil millones de copias de una molécula inicial.

Takeaways

😀 La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utiliza ciclos repetidos de calentamiento y enfriamiento para crear múltiples copias de una región específica de ADN.
😀 El primer paso de PCR es elevar la temperatura cerca del punto de ebullición para separar las cadenas dobles de ADN en cadenas simples.
😀 Al reducirse la temperatura, los primers (secuencias cortas de ADN) se unen a las secuencias complementarias en el ADN objetivo.
😀 Los primers delimitan la secuencia objetivo que se va a copiar.
😀 A una temperatura ligeramente superior, la enzima taq polimerasa se une a los primers y agrega nucleótidos para extender la segunda cadena de ADN.
😀 Este proceso completa el primer ciclo de PCR.
😀 En los ciclos posteriores, los procesos de desnaturalización, hibridación y extensión se repiten para producir más copias de ADN.
😀 Después de tres ciclos, la secuencia objetivo comienza a acumularse.
😀 Después de treinta ciclos, se pueden producir hasta mil millones de copias de la secuencia objetivo a partir de una sola molécula inicial.
😀 PCR permite amplificar una pequeña cantidad de ADN de manera exponencial mediante ciclos repetidos de temperatura.
😀 La capacidad de PCR para producir copias masivas de ADN específico tiene aplicaciones cruciales en biología molecular y diagnóstico médico.

Q & A

¿Qué es la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)?
-La PCR es un proceso biológico que utiliza ciclos repetidos de calentamiento y enfriamiento para hacer muchas copias de una región específica del ADN.
¿Cuál es el primer paso en la PCR?
-El primer paso consiste en elevar la temperatura a casi el punto de ebullición, lo que provoca que el ADN de doble cadena se separe, o desnaturalice, en cadenas simples.
¿Qué sucede después de que el ADN se desnaturaliza?
-Cuando la temperatura disminuye, se añaden secuencias cortas de ADN llamadas cebadores, que se unen o hibridan a las cadenas complementarias del ADN objetivo.
¿Qué función cumplen los cebadores en la PCR?
-Los cebadores delimitan la secuencia objetivo que se quiere copiar y permiten que el proceso de extensión continúe.
¿Cómo participa la enzima Taq polimerasa en la PCR?
-La Taq polimerasa se une a las secuencias de los cebadores y agrega nucleótidos para extender la segunda cadena de ADN durante el proceso de amplificación.
¿En qué temperatura actúa la Taq polimerasa?
-La Taq polimerasa funciona a una temperatura ligeramente más alta que la de la hibridación de los cebadores, facilitando la extensión de la cadena de ADN.
¿Cuántos ciclos de PCR son necesarios para obtener suficientes copias del ADN objetivo?
-Después de tres ciclos, la secuencia objetivo empieza a acumularse, y después de 30 ciclos, se pueden producir hasta mil millones de copias de la secuencia objetivo a partir de una sola molécula inicial.
¿Qué ocurre en cada ciclo de la PCR?
-En cada ciclo de la PCR, se repiten tres pasos: desnaturalización del ADN, hibridación de los cebadores, y extensión de la nueva cadena de ADN por la Taq polimerasa.
¿Por qué es importante la Taq polimerasa en la PCR?
-La Taq polimerasa es fundamental porque es una enzima termostable que puede soportar las altas temperaturas necesarias para desnaturalizar el ADN, lo que permite que el proceso de amplificación continúe sin que la enzima se degrade.
¿Qué se entiende por la acumulación de la secuencia objetivo en la PCR?
-La acumulación de la secuencia objetivo significa que, después de varios ciclos de PCR, la cantidad de ADN objetivo se multiplica exponencialmente, resultando en una gran cantidad de copias de la secuencia deseada.