Fijación del Complemento

Facultad de Veterinaria Universidad de Zaragoza España

10 Apr 201816:14

Summary

TLDRLa profesora titular de enfermedades infecciosas, Mari Carmen Simón, de la Facultad de Veterinaria de Zaragoza, explica la técnica de fijación del complemento, un método altamente sensible y económico que forma parte del sistema defensivo contra agresiones externas en animales y humanos. Basado en las propiedades del complemento, este componente del suero se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos en sueros, mediante la unión a complejos inmunes, la lisis de membranas celulares y la destrucción por calor. La técnica requiere la inactivación del complemento natural en el suero a 56 grados centígrados, la titulación del complemento con suero de cobayo y la realización de una serie de diluciones y incubaciones. La reacción se lee mediante un espejo, y la presencia de hemólisis indica la presencia de anticuerpos. Los sueros con poder anticomplementario y el fenómeno de zona son también discutidos, así como su aplicación en la brucelosis, donde los animales con títulos iguales o superiores a 18 son considerados positivos.

Takeaways

🎓 Mari Carmen Simón es profesora titular de enfermedades infecciosas en la facultad de veterinaria de Zaragoza.
🧬 La técnica de fijación del complemento se basa en las propiedades del complemento, un componente del suero en animales y humanos.
🔍 El complemento tiene tres cualidades clave: unión a complejos inmunes, lisado de membranas celulares y sensibilidad a la temperatura.
🌡️ El complemento puede ser inactivado a 56 grados centígrados durante media hora para evitar falsos negativos en la prueba.
⚖️ La prueba de fijación del complemento es sensible, no requiere materiales costosos y permite analizar múltiples muestras.
🧴 El suero extraído se inactiva en un baño de agua a 56 grados centígrados para 30 a 40 minutos antes de la prueba.
🐑 El complemento para la prueba proviene del suero de cobayos, que se obtiene mediante punción intracardíaca.
📊 La titulación del complemento se hace mediante una serie de diluciones del suero de cobayo en diferentes concentraciones.
🧪 La técnica comienza con la dilución seriada del suero y la adición del antígeno, dejando algunos sin antígeno para control.
🧫 La mezcla hemolítica se forma con íes de cordero y anticuerpos antiem de carnero, y se incuba a 37 grados centígrados o a 4 grados centígrados.
🔍 La lectura de la prueba se realiza tras la incubación, observando la hemólisis para determinar la presencia de anticuerpos.
🐾 En la fijación del complemento aplicada a la brucelosis, los animales con títulos iguales o superiores a 18 son considerados positivos.

Q & A

¿Quién es la narradora de la transcripción?
-La narradora de la transcripción es Mari Carmen Simón, profesora titular de enfermedades infecciosas en la facultad de veterinaria de Zaragoza.
¿Qué es la técnica de fijación del complemento?
-La técnica de fijación del complemento es un método que se basa en las propiedades del complemento, un componente normal del suero de los animales y del hombre que forma parte del sistema defensivo ante agresiones externas.
¿Cuáles son las tres cualidades del complemento que se utilizan en la técnica de fijación del complemento?
-Las tres cualidades son: su capacidad de unirse a los complejos inmunes antígeno-anticuerpo, su capacidad de lysar la membrana celular del componente antígeno del complejo inmune si este es una célula, y su carácter proteico que es termolábil y puede ser destruido a altas temperaturas.
¿Por qué se inactiva el suero a 56 grados centígrados durante 30 o 40 minutos?
-Se inactiva el suero a esa temperatura y tiempo para destruir el complemento presente en el suero natural, lo que podría enmascarar la reacción y dar lugar a falsos negativos.
¿Qué es el suero de cobayo y cómo se obtiene?
-El suero de cobayo es el suero utilizado en la prueba de fijación del complemento. Se obtiene anestesiando al cobayo con ether y realizando una punción intracardíaca para extraer la sangre.
¿Cómo se realiza la titulación del complemento?
-La titulación del complemento se realiza mediante dilución Ada del suero de cobayo en el diluyente colmer a concentraciones decrecientes, desde 1/1 a 1/50 a un es a 1/400, y se enfrenta con volúmenes iguales de mezcla hemolítica incubada a 37 grados centígrados durante 30 minutos.
¿Qué es la mezcla hemolítica y cómo se prepara?
-La mezcla hemolítica está formada por íes de cordero lavados y suspendidos en una proporción del 2% enmer. La hemolisina son anticuerpos antiemátocitos de carnero obtenidos en conejo, diluidos a su concentración óptima. Se forma por un volumen de la suspensión de hematíes y un volumen de hemolisina, que se adiciona a cada pocillo.
¿Cómo se realizan las incubaciones en la técnica de fijación del complemento?
-La incubación puede realizarse en caliente a 37 grados centígrados durante 45 minutos o en frío a 4 grados centígrados durante 24 horas.
¿Cómo se realiza la lectura de los resultados de la prueba de fijación del complemento?
-La lectura se realiza en el reverso de la placa mediante un espejo. Si aparece hemólisis, la reacción es negativa y no hay anticuerpos. Si no hay hemólisis, aparece un pequeño botón de color rojo en el fondo del pocillo, lo que se interpreta como presencia de anticuerpos y la reacción es positiva.
¿Cuál es el título considerado para los animales afectados por brucelosis en la técnica de fijación del complemento?
-Se consideran positivos los animales que presentan títulos iguales o superiores a 1/18 en la técnica de fijación del complemento aplicada a la brucelosis.
¿Qué son los sueros con poder anticomerciales y cómo se detectan?
-Los sueros con poder anticomerciales son aquellos que presentan una cierta frecuencia en animales como búfalos, ovinos y cánidos. Se detectan en sueros muy positivos en las direcciones más bajas, donde presentan hemólisis, mientras que en las direcciones más elevadas se observa una reacción positiva normal.
¿Por qué se realizan las diluciones seriadas del suero en la técnica de fijación del complemento?
-Las diluciones seriadas del suero se realizan para determinar la concentración óptima del suero que presenta una reacción positiva en la prueba, lo que permite identificar la presencia de anticuerpos en muestras de suero sin requerir un material especialmente costoso.

Outlines

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🔬 Introducción a la técnica de fijación del complemento

Mari Carmen Simón, profesora de enfermedades infecciosas, presenta la técnica de fijación del complemento, una parte del sistema defensivo del suero en humanos y animales. Esta técnica se basa en tres cualidades del complemento: su capacidad para unirse a complejos inmunes, lisar membranas celulares y su sensibilidad a la temperatura. Se destaca que el complemento es termolábil y puede inactivarse a 56°C. La prueba es sensible, no requiere materiales costosos y permite procesar múltiples muestras, aunque tiene inconvenientes como la necesidad de descomplementar sueros y la influencia de algunos sueros en los resultados.

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🧪 Título del complemento y preparación de la prueba

Se describe el proceso de titulación del complemento mediante la dilución del suero de cobayo y su incubación a 37°C durante 30 minutos. La dilución más alta que presenta hemólisis clara se considera el título del complemento. La técnica de fijación del complemento comienza con la dilución seriada del suero y luego se agita y se realiza con microdiluidores, manual o automático. Se menciona el uso de suero de cobayo como complemento en la prueba.

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🧫 Agregar complemento y antígeno en la técnica

Se detalla el procedimiento para agregar el complemento y el antígeno a los pocillos, dejando algunos sin antígeno para detectar sueros con poder anticuerpo. La mezcla hemolítica se forma con glóbulos rojos de cordero y anticuerpos antieritrocitos de carnero. Se describe el proceso de incubación, que puede ser a temperatura ambiente o en frío, y cómo se realiza la lectura de los resultados en el reverso de la placa con un espejo. La aparición de hemólisis indica la presencia de anticuerpos y se describe cómo se interpretan las reacciones negativas y positivas.

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📊 Interpretación de resultados y fenómenos en la prueba

Se explica cómo se interpretan los resultados de la prueba de fijación del complemento, con la hemólisis como indicador de presencia de anticuerpos. Se menciona el fenómeno de sueros con poder anticomerciales, que aparece con frecuencia en ciertos animales. Además, se describe el fenómeno de zona, detectable en sueros muy positivos, y cómo se considera positivo en la brucelosis si los títulos son iguales o superiores a 18.

Mindmap

Keywords

💡Técnica de fijación del complemento

La técnica de fijación del complemento es un método utilizado en la inmunología para evaluar la actividad del complemento, un sistema proteico presente en el suero que forma parte del sistema inmunológico. En el video, se discute cómo esta técnica se basa en las propiedades del complemento para unirse a complejos inmunes, lisar membranas celulares y su sensibilidad a la temperatura, lo que la hace altamente sensible y no requiere materiales costosos.

💡Complemento

El complemento es un conjunto de proteínas que circulan en la sangre y juegan un papel crucial en la inmunidad. En el contexto del video, el complemento es esencial para la técnica de fijación del complemento, ya que su capacidad de unirse a los complejos inmunes y su destrucción a altas temperaturas son clave para la realización de la prueba.

💡Suero

El suero es la parte líquida de la sangre que queda después de la coagulación de las glóbulas rojas. En el video, el suero es importante ya que contiene el complemento y se utiliza en la técnica de fijación del complemento para detectar la presencia de anticuerpos y la actividad del sistema inmunológico.

💡Antígeno

Un antígeno es cualquier sustancia que puede desencadenar una respuesta inmunitaria en el cuerpo, como una infección bacteriana o viral. En la técnica de fijación del complemento, se utiliza un antígeno para interactuar con el suero y el complemento, lo que permite la detección de anticuerpos específicos.

💡Anticuerpos

Los anticuerpos son proteínas producidas por el sistema inmunológico en respuesta a la presencia de un antígeno. En el video, la presencia de anticuerpos en el suero se detecta a través de la técnica de fijación del complemento, lo que es útil para el diagnóstico de enfermedades.

💡Hemólisis

La hemólisis es el proceso por el cual las células sanguíneas se rompen y liberan su contenido, como el hemoglobina. En el contexto de la prueba de fijación del complemento, la hemólisis se utiliza como señal visual de la actividad inmunitaria; la ausencia de hemólisis indica una reacción negativa, mientras que su presencia indica una reacción positiva.

💡Dilución seriada

Una dilución seriada es una técnica en la que una solución se diluye en pasos sucesivos para encontrar la concentración crítica de una sustancia. En el video, la dilución seriada del suero se realiza para determinar el título del complemento y para la preparación de las muestras antes de la prueba de fijación del complemento.

💡Título del complemento

El título del complemento se refiere a la concentración más alta de un suero que aún puede causar una reacción en la prueba de fijación del complemento. Se determina a través de la dilución seriada y es crucial para establecer la concentración óptima de suero a utilizar en la prueba.

💡Mezcla hemolítica

La mezcla hemolítica es una combinación de células sanguíneas y anticuerpos que se utiliza en la técnica de fijación del complemento. En el video, esta mezcla se forma a partir de íes de cordero y anticuerpos antiemáties de carnero y se utiliza para evaluar la actividad del complemento en la muestra de suero.

💡Inactivación del suero

El proceso de inactivación del suero implica el tratamiento del suero a una temperatura específica para destruir el complemento naturalmente presente, evitando así falsos negativos en la prueba. En el video, se menciona que el suero se inactiva en un baño de agua a 56 grados centígrados durante 30 a 40 minutos.

💡Brucelosis

La brucelosis es una infección bacteriana que afecta a los animales y puede transmitirse al hombre. En el video, se menciona la aplicación de la técnica de fijación del complemento en el diagnóstico de la brucelosis, donde los animales con títulos iguales o superiores a 18 son considerados positivos para la enfermedad.

Highlights

La técnica de fijación del complemento es una herramienta altamente sensible utilizada en la identificación de enfermedades infecciosas.

Se basa en las propiedades del complemento, un componente normal del suero en animales y humanos.

El complemento tiene la capacidad de unirse a complejos inmunes, lisar membranas celulares y es termolábil.

La técnica no requiere de materiales costosos y permite procesar múltiples muestras simultáneamente.

Los sueros se inactivan a 56 grados centígrados para evitar falsos negativos en la reacción.

Se utiliza suero de cobayo para la titulación del complemento, obteniendo sangre por punción intracardíaca.

La dilución del suero de cobayo se realiza en concentraciones decrecientes para encontrar la mejor concentración para la prueba.

La técnica comienza con una dilución seriada del suero y se agita para una mezcla uniforme.

Se adiciona el complemento y el antígeno a los pocillos, excluyendo algunos para controlar la potencia del suero.

La mezcla hemolítica se forma con íes de cordero y anticuerpos antiemátocitos de carnero obtenidos en conejo.

La incubación puede ser en caliente a 37 grados centígrados o en frío a 4 grados centígrados.

La lectura de la prueba se realiza en el reverso de la placa con un espejo para detectar la hemólisis.

Una reacción negativa se indica por la ausencia de hemólisis y un botón rojo en el fondo del pocillo.

La técnica es utilizada para la brucelosis, considerando positivos a los animales con títulos iguales o superiores a 18.

Los sueros con poder anticomplementarios son comunes en ciertas especies y pueden causar hemólisis en las direcciones más bajas.

El fenómeno de zona se detecta en sueros muy positivos, donde se observa una hemólisis en las direcciones más bajas.

La técnica de fijación del complemento es una prueba valiosa en la diagnóstico de enfermedades infecciosas en veterinaria.

Transcripts

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[Música]

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[Aplausos]

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