Fijación del Complemento
Summary
TLDRLa profesora titular de enfermedades infecciosas, Mari Carmen Simón, de la Facultad de Veterinaria de Zaragoza, explica la técnica de fijación del complemento, un método altamente sensible y económico que forma parte del sistema defensivo contra agresiones externas en animales y humanos. Basado en las propiedades del complemento, este componente del suero se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos en sueros, mediante la unión a complejos inmunes, la lisis de membranas celulares y la destrucción por calor. La técnica requiere la inactivación del complemento natural en el suero a 56 grados centígrados, la titulación del complemento con suero de cobayo y la realización de una serie de diluciones y incubaciones. La reacción se lee mediante un espejo, y la presencia de hemólisis indica la presencia de anticuerpos. Los sueros con poder anticomplementario y el fenómeno de zona son también discutidos, así como su aplicación en la brucelosis, donde los animales con títulos iguales o superiores a 18 son considerados positivos.
Takeaways
- 🎓 Mari Carmen Simón es profesora titular de enfermedades infecciosas en la facultad de veterinaria de Zaragoza.
- 🧬 La técnica de fijación del complemento se basa en las propiedades del complemento, un componente del suero en animales y humanos.
- 🔍 El complemento tiene tres cualidades clave: unión a complejos inmunes, lisado de membranas celulares y sensibilidad a la temperatura.
- 🌡️ El complemento puede ser inactivado a 56 grados centígrados durante media hora para evitar falsos negativos en la prueba.
- ⚖️ La prueba de fijación del complemento es sensible, no requiere materiales costosos y permite analizar múltiples muestras.
- 🧴 El suero extraído se inactiva en un baño de agua a 56 grados centígrados para 30 a 40 minutos antes de la prueba.
- 🐑 El complemento para la prueba proviene del suero de cobayos, que se obtiene mediante punción intracardíaca.
- 📊 La titulación del complemento se hace mediante una serie de diluciones del suero de cobayo en diferentes concentraciones.
- 🧪 La técnica comienza con la dilución seriada del suero y la adición del antígeno, dejando algunos sin antígeno para control.
- 🧫 La mezcla hemolítica se forma con íes de cordero y anticuerpos antiem de carnero, y se incuba a 37 grados centígrados o a 4 grados centígrados.
- 🔍 La lectura de la prueba se realiza tras la incubación, observando la hemólisis para determinar la presencia de anticuerpos.
- 🐾 En la fijación del complemento aplicada a la brucelosis, los animales con títulos iguales o superiores a 18 son considerados positivos.
Q & A
¿Quién es la narradora de la transcripción?
-La narradora de la transcripción es Mari Carmen Simón, profesora titular de enfermedades infecciosas en la facultad de veterinaria de Zaragoza.
¿Qué es la técnica de fijación del complemento?
-La técnica de fijación del complemento es un método que se basa en las propiedades del complemento, un componente normal del suero de los animales y del hombre que forma parte del sistema defensivo ante agresiones externas.
¿Cuáles son las tres cualidades del complemento que se utilizan en la técnica de fijación del complemento?
-Las tres cualidades son: su capacidad de unirse a los complejos inmunes antígeno-anticuerpo, su capacidad de lysar la membrana celular del componente antígeno del complejo inmune si este es una célula, y su carácter proteico que es termolábil y puede ser destruido a altas temperaturas.
¿Por qué se inactiva el suero a 56 grados centígrados durante 30 o 40 minutos?
-Se inactiva el suero a esa temperatura y tiempo para destruir el complemento presente en el suero natural, lo que podría enmascarar la reacción y dar lugar a falsos negativos.
¿Qué es el suero de cobayo y cómo se obtiene?
-El suero de cobayo es el suero utilizado en la prueba de fijación del complemento. Se obtiene anestesiando al cobayo con ether y realizando una punción intracardíaca para extraer la sangre.
¿Cómo se realiza la titulación del complemento?
-La titulación del complemento se realiza mediante dilución Ada del suero de cobayo en el diluyente colmer a concentraciones decrecientes, desde 1/1 a 1/50 a un es a 1/400, y se enfrenta con volúmenes iguales de mezcla hemolítica incubada a 37 grados centígrados durante 30 minutos.
¿Qué es la mezcla hemolítica y cómo se prepara?
-La mezcla hemolítica está formada por íes de cordero lavados y suspendidos en una proporción del 2% enmer. La hemolisina son anticuerpos antiemátocitos de carnero obtenidos en conejo, diluidos a su concentración óptima. Se forma por un volumen de la suspensión de hematíes y un volumen de hemolisina, que se adiciona a cada pocillo.
¿Cómo se realizan las incubaciones en la técnica de fijación del complemento?
-La incubación puede realizarse en caliente a 37 grados centígrados durante 45 minutos o en frío a 4 grados centígrados durante 24 horas.
¿Cómo se realiza la lectura de los resultados de la prueba de fijación del complemento?
-La lectura se realiza en el reverso de la placa mediante un espejo. Si aparece hemólisis, la reacción es negativa y no hay anticuerpos. Si no hay hemólisis, aparece un pequeño botón de color rojo en el fondo del pocillo, lo que se interpreta como presencia de anticuerpos y la reacción es positiva.
¿Cuál es el título considerado para los animales afectados por brucelosis en la técnica de fijación del complemento?
-Se consideran positivos los animales que presentan títulos iguales o superiores a 1/18 en la técnica de fijación del complemento aplicada a la brucelosis.
¿Qué son los sueros con poder anticomerciales y cómo se detectan?
-Los sueros con poder anticomerciales son aquellos que presentan una cierta frecuencia en animales como búfalos, ovinos y cánidos. Se detectan en sueros muy positivos en las direcciones más bajas, donde presentan hemólisis, mientras que en las direcciones más elevadas se observa una reacción positiva normal.
¿Por qué se realizan las diluciones seriadas del suero en la técnica de fijación del complemento?
-Las diluciones seriadas del suero se realizan para determinar la concentración óptima del suero que presenta una reacción positiva en la prueba, lo que permite identificar la presencia de anticuerpos en muestras de suero sin requerir un material especialmente costoso.
Outlines
🔬 Introducción a la técnica de fijación del complemento
Mari Carmen Simón, profesora de enfermedades infecciosas, presenta la técnica de fijación del complemento, una parte del sistema defensivo del suero en humanos y animales. Esta técnica se basa en tres cualidades del complemento: su capacidad para unirse a complejos inmunes, lisar membranas celulares y su sensibilidad a la temperatura. Se destaca que el complemento es termolábil y puede inactivarse a 56°C. La prueba es sensible, no requiere materiales costosos y permite procesar múltiples muestras, aunque tiene inconvenientes como la necesidad de descomplementar sueros y la influencia de algunos sueros en los resultados.
🧪 Título del complemento y preparación de la prueba
Se describe el proceso de titulación del complemento mediante la dilución del suero de cobayo y su incubación a 37°C durante 30 minutos. La dilución más alta que presenta hemólisis clara se considera el título del complemento. La técnica de fijación del complemento comienza con la dilución seriada del suero y luego se agita y se realiza con microdiluidores, manual o automático. Se menciona el uso de suero de cobayo como complemento en la prueba.
🧫 Agregar complemento y antígeno en la técnica
Se detalla el procedimiento para agregar el complemento y el antígeno a los pocillos, dejando algunos sin antígeno para detectar sueros con poder anticuerpo. La mezcla hemolítica se forma con glóbulos rojos de cordero y anticuerpos antieritrocitos de carnero. Se describe el proceso de incubación, que puede ser a temperatura ambiente o en frío, y cómo se realiza la lectura de los resultados en el reverso de la placa con un espejo. La aparición de hemólisis indica la presencia de anticuerpos y se describe cómo se interpretan las reacciones negativas y positivas.
📊 Interpretación de resultados y fenómenos en la prueba
Se explica cómo se interpretan los resultados de la prueba de fijación del complemento, con la hemólisis como indicador de presencia de anticuerpos. Se menciona el fenómeno de sueros con poder anticomerciales, que aparece con frecuencia en ciertos animales. Además, se describe el fenómeno de zona, detectable en sueros muy positivos, y cómo se considera positivo en la brucelosis si los títulos son iguales o superiores a 18.
Mindmap
Keywords
💡Técnica de fijación del complemento
💡Complemento
💡Suero
💡Antígeno
💡Anticuerpos
💡Hemólisis
💡Dilución seriada
💡Título del complemento
💡Mezcla hemolítica
💡Inactivación del suero
💡Brucelosis
Highlights
La técnica de fijación del complemento es una herramienta altamente sensible utilizada en la identificación de enfermedades infecciosas.
Se basa en las propiedades del complemento, un componente normal del suero en animales y humanos.
El complemento tiene la capacidad de unirse a complejos inmunes, lisar membranas celulares y es termolábil.
La técnica no requiere de materiales costosos y permite procesar múltiples muestras simultáneamente.
Los sueros se inactivan a 56 grados centígrados para evitar falsos negativos en la reacción.
Se utiliza suero de cobayo para la titulación del complemento, obteniendo sangre por punción intracardíaca.
La dilución del suero de cobayo se realiza en concentraciones decrecientes para encontrar la mejor concentración para la prueba.
La técnica comienza con una dilución seriada del suero y se agita para una mezcla uniforme.
Se adiciona el complemento y el antígeno a los pocillos, excluyendo algunos para controlar la potencia del suero.
La mezcla hemolítica se forma con íes de cordero y anticuerpos antiemátocitos de carnero obtenidos en conejo.
La incubación puede ser en caliente a 37 grados centígrados o en frío a 4 grados centígrados.
La lectura de la prueba se realiza en el reverso de la placa con un espejo para detectar la hemólisis.
Una reacción negativa se indica por la ausencia de hemólisis y un botón rojo en el fondo del pocillo.
La técnica es utilizada para la brucelosis, considerando positivos a los animales con títulos iguales o superiores a 18.
Los sueros con poder anticomplementarios son comunes en ciertas especies y pueden causar hemólisis en las direcciones más bajas.
El fenómeno de zona se detecta en sueros muy positivos, donde se observa una hemólisis en las direcciones más bajas.
La técnica de fijación del complemento es una prueba valiosa en la diagnóstico de enfermedades infecciosas en veterinaria.
Transcripts
[Música]
[Aplausos]
ah
Soy Mari Carmen Simón profesora titular
de enfermedades infecciosas de la
facultad de veterinaria de
Zaragoza vamos a hablar de la técnica de
fijación del complemento la técnica de
fijación del complemento está basada en
las propiedades del complemento Este es
un componente normal del suero de los
animales y del hombre y forma parte del
sistema defensivo frente a las
agresiones externas nos basamos en tres
de sus
cualidades la primera es su capacidad de
unirse a los complejos inmunes antgeno
anticuerpo la segunda es su capacidad de
lisar la membrana celular del componente
antigénico del complejo inmune
suponiendo que este componente sea una
célula y la tercera es que por su
carácter proteico es termolábil y puede
ser destruido tratando los sueros a 56
gr centígrados durante media
hora la prueba de fijación del
complemento tiene como característica el
ser altamente sensible y el de no
requerir un material especialmente
costoso y el de poder vehicular un gran
número de muestras sin embargo presenta
algunos inconvenientes tal como la
necesidad de descompletar todos los
sueros problema y el poder de algunos
sueros
en la ficha
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correspondiente
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seguidamente estas muestras son
centrifugadas para una correcta
extracción del
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suero
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el suero extraído pasa a ser inactivado
en baño de agua a 56 gr centígrados
durante 30 o 40 minutos Este paso es
imprescindible puesto que el complemento
presente en el suero de forma natural
podría enmascarar la reacción dando
lugar a falsos
negativos
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el complemento utilizado en la prueba es
suero de cobayo El cobayo es anestesiado
con hter y la sangre es extraída por
punción intracardíaca vía
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diafragmática
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[Aplausos]
la titulación del complemento se realiza
mediante dilución Ada del suero de
cobayo en el diluyente colmer a
concentraciones decrecientes desde 1s a
50 a un es a400 en base dos enfrentado
con volúmenes iguales de mezcla
hemolítica he incubado a 37
grc durante 30
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minutos
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Oh
[Música]
Oh
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metropolis
metropolis
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tras la incubación la más alta dilución
del complemento que presenta em olisis
Clara se considera el título del
complemento y representa la dirección
óptima que se se debe emplear en la
prueba de fijación del
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complemento la técnica de fijación del
complemento comienza con la dilución
seriada del suero desde 1s a2 a 1sa 256
en base 2 utilizando la solución colmer
como
diluyente
cada suero es depositado en el primer
pocillo de dilución en volúmenes de 25
microlitros
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metr
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seguidamente he sometido a agitación
mecánica durante unos
segundos
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la dilución seriada se realiza con
microd diluidores de forma manual o
automática
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Oh
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a continuación se adiciona el
complemento en todos los pocillos y
seguidamente el antígeno a razón de 25
microlitros por pocillo dejando los
pocillos de la dilución un es y un4 sin
antígeno para detestar los sueros con
poder
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anticar
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la suspensión inada en agitador mecánico
e incubada a 37 grc durante 45 minutos
si se realiza en caliente o a 4 grc
durante 24 horas si se realiza en
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frío
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la mezcla hemolítica está formada por
íes de cordero lavados y suspendidos
enmer en la proporción del
2% la hemolisina son anticuerpos antiem
mates de carnero obtenidos en conejo
diluidos a su concentración
óptima la mezcla hemolítica se forma por
un volumen de la suspensión de hematíes
y un volumen de
hemolisina esto se adiciona en volúmenes
de 25 microlitros a cada uno de los
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pocillos
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la incubación puede realizarse en
caliente a 37 grc durante 40 minutos o
en frío a 4 gr c durante una
noche
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la lectura se realiza en el reverso de
la placa mediante un
espejo la aparición de hemólisis
anticuerpos en el suero reacción
negativa si no hay hemólisis aparece un
pequeño botón de color rojo en el fondo
del pocillo que se interpreta como
presencia de anticuerpos reacción
positiva el título es la inversa de la
dilución más elevada que presenta una
reacción
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positiva
el fenómeno de sueros con poder
anticomerciales los presentan con cierta
frecuencia como uidos óbidos y
cánidos el fenómeno de zona se detecta
en sueros muy positivos en las diron más
bajas las cuales presentan hemólisis
mientras que en las direcciones más
elevadas se observa reacción positiva
normal en la fijación del complemento
aplicada a brucelosis se consideran
positivos los animales que presentan
títulos iguales o superiores a
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