Montaje directo de muestras con KOH Y Azul de lactofenol

Summary

El video muestra una práctica de laboratorio donde se realizan tinciones de hongos utilizando azul de lactofenol y hidróxido de potasio (KOH). Se explica paso a paso cómo tomar muestras con cinta adhesiva, colocarla sobre portaobjetos y observar las estructuras filamentosas bajo el microscopio en distintos aumentos (4x, 10x, 40x, y 100x). Las imágenes permiten visualizar detalles como hifas, conidios, y la presencia de melanina en hongos pigmentados (dematiáceos). Las diferencias de tinción dependen de la densidad de las estructuras, lo que facilita su estudio en el laboratorio.

Takeaways

• 🔬 En esta práctica se realizarán dos tipos de tinciones de hongos, una con azul de lactofenol y otra con hidróxido de potasio (KOH).
• 🧪 Se utiliza una pipeta para aplicar una pequeña gota de azul de lactofenol en una lámina portaobjetos.
• 🦠 Con un trozo de cinta transparente se toma la muestra del hongo para analizarla.
• 🔥 El hongo se recoge mientras la caja de petri está destapada al lado de un mechero encendido, lo que asegura la esterilidad del procedimiento.
• 🎨 La cinta con el hongo se coloca sobre la gota de azul de lactofenol en la lámina para teñir las estructuras del hongo.
• 🔍 Se observa la lámina bajo un microscopio, comenzando con un aumento de 4x, donde se ven las estructuras filamentosas teñidas.
• 🔵 A un aumento de 10x, se observan con más detalle las hifas teñidas de azul, lo que sugiere que el hongo es hialino, sin pigmentación natural.
• 🧫 Luego se realiza el mismo procedimiento utilizando KOH como reactivo para visualizar las estructuras del hongo.
• 🟤 Con el KOH, a un aumento de 10x, se observan estructuras filamentosas pigmentadas de color café, típicas de los hongos dematiáceos.
• 🔬 A un aumento de 100x, se aprecian mejor los tabiques internos y la pigmentación, permitiendo una observación más detallada de las hifas.

Q & A

¿Cuál es el propósito principal de la práctica descrita en el video?

El propósito de la práctica es realizar una tinción de hongos utilizando azul de lactofenol e hidróxido de potasio (KOH) para observar las estructuras filamentosas bajo el microscopio.

¿Qué materiales se utilizan para realizar la tinción de hongos?

Los materiales incluyen portaobjetos, pipetas Pasteur, cinta transparente, azul de lactofenol, hidróxido de potasio (KOH) y una caja de Petri con hongos.

¿Cuál es el primer paso en la preparación de la muestra con azul de lactofenol?

El primer paso es usar una pipeta Pasteur para colocar una gota de azul de lactofenol en un portaobjetos.

¿Cómo se toma la muestra del hongo para su análisis?

Se utiliza un trozo de cinta transparente, se presiona sobre el hongo en la caja de Petri y luego se coloca la cinta impregnada con el hongo sobre el portaobjetos que tiene azul de lactofenol.

¿Por qué es importante trabajar cerca de un mechero encendido durante la toma de muestras?

El mechero encendido crea un entorno estéril al reducir la presencia de contaminantes del aire mientras se manipulan las muestras.

¿Cuál es la función del azul de lactofenol en la tinción de hongos?

El azul de lactofenol tiñe las estructuras filamentosas del hongo, permitiendo una mejor visualización de estas bajo el microscopio.

¿Qué se observa en el microscopio a un aumento de 4x con azul de lactofenol?

A un aumento de 4x, se observan estructuras filamentosas teñidas de azul que recorren la placa de lado a lado.

¿Cómo varía la observación de las ifas a 10x en comparación con 4x?

A 10x, se observan más detalles de las estructuras filamentosas, con algunas áreas bien teñidas y otras menos teñidas, lo que indica la naturaleza hialina del hongo.

¿Qué diferencias se observan al teñir las muestras con hidróxido de potasio (KOH) en lugar de azul de lactofenol?

Con KOH, las estructuras filamentosas adquieren una pigmentación café, lo que indica la presencia de hongos dematiáceos o pigmentados, en contraste con las estructuras teñidas de azul del lactofenol.

¿Cuál es la importancia de observar las muestras en diferentes aumentos (4x, 10x, 40x y 100x)?

Observar las muestras en diferentes aumentos permite obtener una visión panorámica y luego enfocarse en detalles más finos, como las divisiones septadas y los conidios, lo que ayuda a identificar características específicas de los hongos.