Determinación de proteina

Summary

Este procedimiento de laboratorio describe cómo analizar el contenido de nitrógeno en una muestra. Comienza con el pesaje de la muestra, seguido de su digestión utilizando ácido sulfúrico y una mezcla digestora. Tras la digestión, se realiza una destilación para capturar el amoníaco liberado, utilizando una solución de ácido bórico. Finalmente, se titula la muestra con ácido clorhídrico para determinar el contenido de nitrógeno. Todo el proceso involucra un manejo preciso de reactivos y mediciones, asegurando resultados exactos para el análisis de nitrógeno.

Takeaways

• 😀 Se comienza el proceso pesando la muestra en papel encerado y colocando la balanza a cero.
• 😀 El peso de la muestra puede variar según la cantidad de nitrógeno que se espere obtener, siendo importante tener una cantidad suficiente de muestra.
• 😀 Es fundamental registrar el peso con todas sus cifras decimales para precisión en los cálculos.
• 😀 La muestra se envuelve para evitar ensuciar el tubo de digestión y no perder muestra.
• 😀 Se coloca la muestra en un tubo de digestión de 250 ml y se añade una cápsula con mezcla digestora (sulfato de cobre y sulfato de sodio o potasio).
• 😀 A continuación, se añade 10 ml de ácido sulfúrico concentrado en una campana de extracción por razones de seguridad.
• 😀 Se calienta la muestra de manera progresiva durante unas 6 horas, hasta que adquiera un color azul o verde cristalino, señal de que la muestra está digerida.
• 😀 Después de la digestión, se utiliza un destilador automático para realizar la destilación y atrapar el amoníaco en una solución de ácido bórico.
• 😀 Se agrega hidróxido de sodio al 50% para neutralizar la muestra, lo que provoca un cambio de color de café, hasta que se alcanza la neutralización.
• 😀 Finalmente, se realiza una titulación utilizando ácido clorhídrico 0.1N, observando el cambio de color hasta que la solución se vuelve violeta, lo que indica el equilibrio.
• 😀 El volumen de ácido utilizado se registra cuidadosamente para los cálculos finales, asegurando que el punto de equilibrio ha sido alcanzado.

Q & A

¿Cuál es el propósito del procedimiento descrito en el guion?

El procedimiento tiene como objetivo determinar el contenido de nitrógeno en una muestra a través de un proceso de digestión, destilación y titulación.

¿Por qué se utiliza un papel encerado sin nitrógeno al principio del proceso?

Se utiliza para pesar la muestra sin contaminarla con nitrógeno, lo que podría interferir en la medición precisa del contenido de nitrógeno de la muestra.

¿Cuánto de muestra se debe pesar para iniciar el proceso?

Dependiendo del contenido de nitrógeno de la muestra, se debe pesar entre 0.1 y 1 gramo. Si la muestra contiene más nitrógeno, se pesa menos cantidad.

¿Qué función tiene la cápsula de mezcla digestora (sulfato de cobre y sulfato de sodio o potasio)?

La cápsula de mezcla digestora ayuda a acelerar la digestión de la muestra, facilitando la descomposición de compuestos complejos durante el proceso de digestión.

¿Por qué se debe añadir ácido sulfúrico concentrado en un ambiente controlado?

El ácido sulfúrico concentrado es reactivo y puede generar vapores peligrosos, por lo que debe añadirse en una campana de extracción para garantizar la seguridad del proceso.

¿Qué sucede si la muestra contiene mucha humedad durante la digestión?

Si la muestra tiene mucha humedad, se calienta ligeramente para homogenizar la muestra, asegurando una correcta digestión y evitando que los vapores escapen.

¿Cuál es el color que debe adquirir la muestra una vez completada la digestión?

La muestra debe adquirir un color azuloso o verdoso cristalino, lo que indica que la digestión ha sido exitosa.

¿Qué se utiliza para realizar la distilación después de la digestión?

Para la distilación se utiliza un destilador automático, en el que se coloca la muestra junto con ácido bórico al 4% y el indicador de Tashiro en un matraz Herlen Mayer.

¿Cómo se neutraliza la muestra durante el proceso de destilación?

Se añade hidróxido de sodio al 50%, lo que provoca que la muestra se torne café hasta que se alcance la neutralización, momento en el que se inyecta calor para liberar el amoníaco.

¿Qué se hace con el amoníaco liberado durante la destilación?

El amoníaco liberado se atrapa en la solución de ácido bórico, evitando que se pierda durante el proceso de destilación.

¿Cómo se realiza la titulación de la muestra después de la destilación?

La titulación se realiza añadiendo ácido clorhídrico 0.1 N desde una bureta y se detiene cuando la solución alcanza un color violeta, indicando que el equilibrio ha sido alcanzado.

¿Qué se debe hacer para asegurar que la titulación sea precisa?

Es importante observar el cambio de color a gris y luego a violeta, y ajustar el volumen de ácido clorhídrico utilizado para asegurar que no se haya excedido el punto de equivalencia.