Extracción ADN a partir de sangre con protocolo

Summary

Este video presenta un proceso detallado de extracción de ADN a partir de muestras de sangre de ganado bovino en un laboratorio especializado en tecnología para el cambio climático y la agricultura de precisión. El biólogo Rubén Ferrero explica paso a paso cómo se realizan las fases de homogeneización, centrifugado, y las posteriores etapas de purificación y conservación del ADN, utilizando diferentes soluciones químicas y técnicas de laboratorio avanzadas. El objetivo es contribuir al desarrollo de tecnologías que apoyen la agricultura de precisión en el sector agrario, fomentando un avance en la investigación científica relacionada con el ganado bovino.

Takeaways

• 😀 El video presenta un proceso de extracción de ADN a partir de muestras de sangre de ganado bovino en un laboratorio de investigación de tecnología en cambio climático para el sector agrario.
• 😀 Se destaca la importancia de contar con muestras de sangre de alta concentración y buena calidad para realizar un secuenciamiento NGS.
• 😀 El proceso comienza con la homogeneización de las muestras de sangre para evitar que se separen sus fases durante el reposo.
• 😀 Se utilizan micro pipetas para transferir 300 microlitros de muestra de sangre a micro tubos de 1.5 ml.
• 😀 Se agrega una solución de ISI celular (900 microlitros) para combinar las muestras mediante inmersión.
• 😀 Las muestras se centrifugan a 13,000 revoluciones por minuto durante un minuto para formar un pellet de núcleos celulares.
• 😀 El sobrenadante se descarta y se utiliza una solución de hipoclorito al 1% para lavar las muestras.
• 😀 Se agrega la solución ISYS nuclear (300 microlitros) y se mezcla hasta disolver el pellet celular.
• 😀 Se añade solución de precipitación de proteínas (100 microlitros) y se mezcla con un vortex durante 20 segundos.
• 😀 Se realiza un segundo ciclo de centrifugado y lavado con isopropanol, seguido de etanol al 70% para purificar el ADN.
• 😀 El ADN extraído se disuelve en una solución de hidratación y se conserva a -20°C hasta su uso.

Q & A

¿Qué tipo de muestras se utilizan para la extracción de ADN en este proceso?

Se utilizan muestras de sangre de ganado bovino para la extracción de ADN genómico.

¿Cuál es el propósito de realizar la extracción de ADN en este laboratorio?

El propósito es desarrollar tecnologías para el servicio de agricultura de precisión, específicamente para la investigación en cambio climático en el sector agrario.

¿Por qué es importante que las muestras de sangre tengan alta concentración y buena calidad?

Es crucial para garantizar un secuenciamiento genético de alta calidad mediante la técnica de NGS (Next Generation Sequencing).

¿Qué sucede con las muestras de sangre después de ser extraídas del ganado?

Las muestras de sangre tienden a separar sus fases si se mantienen en reposo por mucho tiempo, por lo que deben ser homogeneizadas antes de su procesamiento.

¿Qué herramienta se utiliza para transferir la sangre a los micro tubos?

Se utiliza una micropipeta para transferir los 300 microlitros de la muestra de sangre a los micro tubos de 1.5 mililitros.

¿Qué componente se añade a las muestras de sangre para la extracción del ADN?

Se agrega una solución de ISI celular, que ayuda en la disolución de los componentes celulares durante el proceso de extracción.

¿Qué ocurre durante el proceso de centrifugado?

Durante la centrifugación, las células se separan y forman un pellet en el fondo del micro tubo, que contiene los núcleos celulares.

¿Qué pasos se siguen después de descartar el sobrenadante en la solución de hipoclorito?

Se agrega una solución de ISI nuclear y luego se mezcla, para después añadir una solución de precipitación de proteínas y mezclar con un vortex.

¿Cómo se realiza el lavado de las muestras durante el proceso?

Se realiza un lavado utilizando etanol al 70% y luego con etanol al 90%, con el fin de eliminar impurezas antes de secar las muestras.

¿Cómo se conserva el ADN extraído después de finalizar el proceso?

El ADN extraído se conserva en una refrigeradora a menos 20 grados Celsius hasta su uso.