Métodos de recuento microbiano

Summary

El video aborda las técnicas de recuento de microorganismos, fundamentales para evaluar la calidad y seguridad de productos como el agua y los alimentos. Se describen los métodos directos e indirectos, incluyendo el uso de biología molecular para contar microorganismos cultivables y no cultivables. Se detallan las técnicas de recuento en placas y el uso de diluciones para obtener muestras precisas. Además, se mencionan métodos probabilísticos como el número más probable, útil cuando no es posible cuantificar células individuales. Estos procedimientos son clave en microbiología para garantizar buenas prácticas de producción.

Takeaways

• 🔬 Los recuentos microbiológicos determinan la cantidad de microorganismos en diversas matrices, esenciales para evaluar la calidad y seguridad de productos como agua y alimentos.
• 📊 Existen técnicas de recuento directas, que dependen del cultivo, y técnicas indirectas, que evalúan analitos relacionados con el crecimiento microbiano.
• 🧬 Las técnicas de biología molecular, como la PCR en tiempo real, son útiles para contar microorganismos cultivables y no cultivables.
• 🧪 Dos técnicas comunes en microbiología son el recuento en placas por superficie y el recuento por placa vertida, que determinan el número de células viables en una muestra.
• 📏 Los resultados de los recuentos se reportan como unidades formadoras de colonia (UFC), donde cada colonia corresponde a una célula viable.
• 📏 Para obtener un conteo preciso, se realizan diluciones seriadas basadas en 10 para alcanzar un número de colonias contables.
• ⚗️ Para muestras sólidas, se pesa 10 gramos y se diluye en 90 mililitros de agua, mientras que para muestras líquidas se utilizan 10 mililitros en una dilución similar.
• ⏲️ Las cajas de Petri deben incubarse entre 24 y 48 horas a 35°C para bacterias y a temperatura ambiente para levaduras y mohos.
• 📊 En el conteo por placa vertida, se mezcla una muestra con medio de cultivo fundido a 45°C antes de la incubación.
• 📈 Se aplican métodos probabilísticos como el número más probable cuando no es posible contar células individuales, proporcionando un rango estadístico para la población bacteriana.

Q & A

¿Cuál es el objetivo principal del recuento de microorganismos?

El objetivo principal es determinar el número de microorganismos en diferentes matrices, asegurando la calidad y seguridad sanitaria de productos como agua y alimentos.

¿Qué técnicas de recuento existen y en qué se diferencian?

Existen técnicas de recuento directas, que dependen del cultivo, y técnicas indirectas, que determinan analitos o propiedades que se relacionan con el crecimiento microbiano.

¿Por qué las técnicas de biología molecular, como la PCR en tiempo real, son importantes?

Estas técnicas permiten contabilizar tanto microorganismos cultivables como no cultivables, lo que amplía la capacidad de análisis en microbiología.

¿Cuáles son las dos técnicas de recuento más utilizadas en microbiología?

Las dos técnicas más utilizadas son el recuento en placas por superficie y el recuento por placa vertida, que determinan el número de microorganismos viables en una muestra.

¿Cómo se prepara una muestra sólida para el recuento?

Para muestras sólidas, se pesa 10 gramos en un frasco estéril y se añaden 90 ml de agua de dilución, agitando vigorosamente durante al menos 5 minutos.

¿Cuál es el procedimiento para el recuento por placa vertida?

Se añaden 1 ml de muestra a la base de una caja de Petri, se mezcla con medio de cultivo fundido y se incuba a 35°C durante 24 a 48 horas.

¿Qué se debe hacer si no se observa crecimiento en una muestra sin dilución?

Si no se observa crecimiento, se reporta como menor a 1 UFC. En una dilución 10^-1, se reporta como menor a 10 UFC.

¿Cómo se deben contar las colonias si hay menos de 10 por centímetro cuadrado?

Se deben contar 3 cuadrados representativos y multiplicar la suma por 5.

¿Qué se hace si hay más de 100 colonias por centímetro cuadrado?

Si hay más de 100 colonias, se reporta como 'demasiado numeroso para contar', lo que indica más de 6500 UFC.

¿Qué es el método del número más probable y cuándo se utiliza?

El método del número más probable se utiliza cuando no es posible realizar un conteo cuantitativo, y estima la probabilidad de que la población bacteriana esté en un rango calculado.