REKAYASA GENETIKA

Sitaresmi Yuningtyas
12 Sept 202021:56

Summary

TLDRThis educational script delves into genetic engineering, defining it as the process of creating new recombinations from genetic material by inserting foreign nucleotide molecules into a vector for replication within a host cell. It explores techniques like using plasmids for DNA cloning, the concept of cloning, and the historical cloning of Dolly the sheep. It also touches on the ethical debates surrounding cloning and its applications in medicine and agriculture, such as producing human insulin and creating high-vitamin A rice.

Takeaways

  • 🧬 Genetic engineering is the process of creating new recombinations from genetic material by inserting foreign nucleic acid molecules into a vector for further development and replication within a new host cell.
  • 🐏 Cloning, such as the famous case of Dolly the sheep, involves creating genetically identical organisms by transferring DNA from one organism into an egg cell from which the nucleus has been removed.
  • πŸ§ͺ Plasmids are circular DNA molecules used as vectors to carry foreign DNA into a host cell, often used in the production of recombinant DNA for applications like insulin production.
  • πŸ”¬ The process of genetic engineering involves techniques like isolation of DNA, cutting and ligating nucleic acid molecules, transformation, and selection of transformed cells.
  • 🌟 The application of genetic engineering extends to creating organisms with specific traits, such as 'golden rice' rich in vitamin A or bioluminescent plants that can glow in the dark.
  • πŸ’Š Genetic engineering plays a significant role in the pharmaceutical industry, enabling the production of therapeutic proteins and addressing genetic disorders like hemophilia.
  • 🧡 DNA, or deoxyribonucleic acid, is the genetic material that carries the genetic information inherited from parents to offspring.
  • πŸ”‹ Plasmids have specific requirements for use in genetic engineering, including the ability to accommodate inserted DNA, an origin of replication, selectable markers, and restriction sites for gene insertion.
  • βœ‚οΈ Nucleases are enzymes used in genetic engineering to cut DNA at specific sites, while ligases are used to join DNA fragments together.
  • πŸ› οΈ Other enzymes used in genetic engineering include polymerases for DNA synthesis, modification enzymes like alkaline phosphatase and kinases, and topoisomerases that manage DNA supercoiling.

Q & A

  • What is genetic engineering?

    -Genetic engineering is the process of creating new recombinations from genetic material by inserting foreign nucleotide molecules outside the cell into a vector, allowing for integration and further development or multiplication within a new host cell.

  • What is a plasmid and its role in genetic engineering?

    -A plasmid is a circular DNA molecule used as a vehicle to carry foreign DNA into a host cell. It plays a crucial role in genetic engineering by allowing the insertion of genes of interest, such as the gene for insulin production.

  • What is cloning in the context of genetic engineering?

    -Cloning in genetic engineering refers to the creation of identical organisms or DNA recombinations that carry the entire inserted DNA segment, leading to the multiplication of new molecules.

  • How does the process of creating recombinant DNA involve the use of bacteria like E. coli?

    -In genetic engineering, bacteria like E. coli are used as host organisms to produce the desired protein, such as human insulin. The recombinant DNA containing the gene for insulin is introduced into E. coli, which then acts as a biological factory to produce insulin.

  • What is the significance of Dolly the sheep in the context of genetic engineering?

    -Dolly the sheep was a significant milestone in genetic engineering as she was the first mammal cloned from an adult somatic cell, using the process of nuclear transfer, demonstrating the potential of cloning in genetic engineering.

  • What are the enzymes commonly used in genetic engineering and their functions?

    -Commonly used enzymes in genetic engineering include nucleases (for cutting DNA), ligases (for joining DNA fragments), polymerases (for synthesizing new DNA strands), and modification enzymes (for modifying DNA ends) such as alkaline phosphatase, polynucleotide kinase, and terminal deoxynucleotidyl transferase.

  • How does the process of genetic engineering relate to the production of therapeutic proteins like insulin?

    -Genetic engineering is used to produce therapeutic proteins by introducing the gene responsible for the protein into a host organism, which then manufactures the protein, such as insulin for diabetes treatment.

  • What is the role of genetic material in inheritance?

    -Genetic material, primarily DNA, carries the specific genetic information that is passed down from parents to offspring, determining inherited traits and characteristics.

  • What is the significance of the term 'vector' in genetic engineering?

    -In genetic engineering, a vector is a vehicle used to introduce foreign DNA into a host cell. Plasmids are a common type of vector used to carry and introduce genes of interest into bacteria or other organisms.

  • How does the process of genetic engineering facilitate the manipulation of specific DNA segments?

    -Genetic engineering allows for the isolation, screening, and construction of specific DNA segments that encode for particular functions or traits, enabling the manipulation of these segments for various applications such as therapeutics or the creation of genetically modified organisms.

  • What are the basic techniques involved in gene cloning?

    -Basic techniques in gene cloning include isolation of DNA, cutting and ligating nucleotide molecules, transformation of the recombinant plasmid into a host cell, and selection of the transformed cells to ensure the plasmid has been successfully integrated.

Outlines

00:00

🧬 Introduction to Genetic Engineering

The speaker begins by introducing the topic of genetic engineering, defining it as the process of creating new recombinations from genetic material by inserting a nucleic acid molecule produced outside the cell into a vector. This allows for the combination and continuation of development or multiplication within a new host cell. The discussion includes the creation of recombinant DNA, such as the insertion of the human insulin gene into a plasmid, which is then transformed into bacteria like E. coli to produce human insulin. The concept of cloning is introduced, explaining that clones are genetically identical organisms that carry all the inserted DNA segments and replicate new molecules. The example of Dolly the sheep, the first mammal cloned from an adult somatic cell, using a technique called somatic cell nuclear transfer, is highlighted.

05:03

🐏 Cloning and Genetic Material

This section delves into the cloning process, specifically discussing how Dolly the sheep was created. It explains the use of DNA insertion to produce new individuals and the ethical debates surrounding cloning, as it challenges the traditional concept of individual creation. The speaker also covers the basics of genetic material, emphasizing that it carries specific genetic information to be inherited by offspring. The role of plasmids in genetic engineering is introduced, describing them as circular DNA molecules that can carry target genes and be introduced into host cells, such as bacteria. The paragraph concludes with a discussion on genes, defining them as sequences of DNA that code for proteins, and how they influence traits like hair color and blood type.

10:03

🌾 Applications of Genetic Engineering and Cloning

The speaker discusses the applications of genetic engineering, particularly in the production of human insulin using E. coli as a biological factory. The paragraph also touches on the potential of cloning to manipulate specific DNA segments for therapeutic purposes, such as treating genetic disorders. Examples include the production of blood factor proteins for hemophilia patients. Additionally, the speaker mentions the creation of genetically modified organisms, like 'golden rice,' which is enriched with vitamin A, and bioluminescent organisms that can glow in the dark. The potential of genetic engineering to construct productive strains of organisms is also highlighted.

15:06

πŸ”¬ Basic Techniques of Gene Cloning

This section outlines the fundamental techniques involved in gene cloning. It starts with the isolation of DNA, which can be in the form of circular plasmids or the target DNA to be cloned. The speaker then explains the methods for cutting and ligating nucleic acid molecules, where the DNA is cut and inserted into a vector. Transformation methods are also discussed, which involve introducing the recombinant plasmid into host cells, often using E. coli due to its rapid growth and well-studied genetic material. The importance of selection after transformation is emphasized to identify cells that have successfully incorporated the desired genetic material. The speaker also mentions that plasmids are extrachromosomal, circular DNA that can replicate independently and often carry antibiotic resistance genes or other beneficial traits for the bacteria.

20:08

πŸ§ͺ Enzymes in Genetic Engineering

The final paragraph focuses on the enzymes used in genetic engineering. It describes the functions of various enzymes, such as nucleases that act as 'scissors' to cut DNA, ligases that 'sew' together DNA fragments, and polymerases that synthesize new DNA strands complementary to a template. Enzyme modification is also discussed, including alkaline phosphatase, which removes phosphate groups from DNA ends, and other enzymes that add or modify these groups. The paragraph concludes with a mention of topoisomerase, an enzyme that helps manage the supercoiling of DNA, which is crucial for maintaining the DNA's relaxed structure. The speaker summarizes the presentation and thanks the audience for their attention.

Mindmap

Keywords

πŸ’‘Genetic Engineering

Genetic engineering refers to the direct manipulation of an organism's genes using biotechnology. The video discusses how genetic engineering involves the creation of new recombinations from genetic material by inserting foreign nucleic acid molecules into a vector, allowing for the combination and further development within a new host cell. This process is central to the video's theme as it sets the stage for understanding the various applications and techniques discussed, such as the production of human insulin using plasmids.

πŸ’‘Plasmid

A plasmid is a circular DNA molecule found in bacteria that is used as a vehicle for carrying foreign DNA into host cells during genetic engineering. The video explains that plasmids are used to insert the human insulin gene, creating recombinant DNA that can then be introduced into bacteria like E. coli for the production of human insulin. Plasmids are crucial for the cloning process and are highlighted as a key tool in genetic engineering.

πŸ’‘Cloning

Cloning, in the context of the video, refers to the process of creating genetically identical organisms or DNA molecules. The video mentions 'cloning' in relation to the creation of identical DNA segments and the production of organisms like Dolly the sheep, which was a result of genetic cloning. Cloning is a significant concept in the video as it demonstrates the application of genetic engineering in replicating genetic material and creating new organisms.

πŸ’‘Restriction Enzymes

Restriction enzymes, also known as 'nucleases' in the video, are proteins that cut DNA at specific recognition sites. They are essential tools in genetic engineering for cutting DNA to insert foreign genes into plasmids. The video mentions that these enzymes act like 'scissors' to cut DNA, which is a critical step in the manipulation and recombination of genetic material.

πŸ’‘Ligase

Ligase is an enzyme that joins DNA fragments together, as mentioned in the videoζ―”ε–»δΈΊ'glue'. It is used to 'seal' the DNA after foreign genes have been inserted into a plasmid, creating a recombinant DNA molecule. Ligases are vital in genetic engineering for their role in DNA repair and the construction of new DNA sequences.

πŸ’‘DNA Recombination

DNA recombination is the process of creating new combinations of genetic material, as discussed in the video. It involves the cutting and joining of DNA fragments to form recombinant DNA molecules. This process is fundamental to genetic engineering, allowing for the manipulation of genes to achieve desired traits or functions, such as the production of human insulin in bacteria.

πŸ’‘E. coli

Escherichia coli, or E. coli, is a type of bacteria commonly used as a host organism in genetic engineering. The video explains that E. coli can be used as a 'biological factory' to produce human insulin, highlighting its role in the production of recombinant proteins. E. coli's rapid reproduction and well-studied genetics make it an ideal host for cloning and expressing foreign genes.

πŸ’‘Gene Therapy

Gene therapy, while not explicitly detailed in the video, is implied in the discussion of manipulating specific DNA segments for therapeutic purposes. It involves introducing, removing, or altering genes in a person's cells to treat or prevent disease. The video's mention of treating inherited diseases like hemophilia through genetic engineering alludes to the potential of gene therapy.

πŸ’‘Transgenic Organisms

Transgenic organisms are those that have had foreign genes inserted into their genome. The video discusses the creation of 'golden rice,' which is a transgenic variety enriched with vitamin A. This is an example of how genetic engineering can be used to enhance the nutritional value of crops, demonstrating the application of genetic engineering in agriculture.

πŸ’‘Selectable Markers

Selectable markers are genetic elements used to identify cells that have successfully incorporated a particular piece of DNA. In the video, the example of antibiotic resistance is given, where a gene for resistance to a specific antibiotic is used to select for bacteria that have taken up a plasmid. These markers are crucial for the screening process in genetic engineering, ensuring that the desired genetic modifications have been successfully introduced.

Highlights

Introduction to genetic engineering and its definition.

Explanation of genetic recombination and the insertion of foreign nucleic acids.

The process of creating recombinant DNA for the production of insulin.

The role of plasmids in genetic engineering as circular DNA molecules.

Transformation of recombinant DNA into microorganisms like E. coli for insulin production.

Definition and concept of cloning in genetic engineering.

The cloning of Dolly the sheep and the process of somatic cell nuclear transfer.

The ethical debates surrounding the creation of new individuals through cloning.

Understanding genetic material and its role in inheritance.

The use of vectors in cloning and their function in introducing genes into a host.

The structure and function of genes as sequences of DNA that encode proteins.

Applications of genetic engineering in medicine, such as producing therapeutic genes.

The potential of genetic engineering to manipulate and construct productive strains, like 'golden rice'.

Basic applications of gene cloning in isolating and studying specific genes.

Techniques involved in gene cloning, including DNA isolation and manipulation.

The use of E. coli as a host organism in the development of genetic engineering techniques.

Characteristics of plasmids, including their circular shape and ability to replicate independently.

Enzymes used in genetic engineering, such as nucleases, ligases, polymerases, and modifying enzymes.

The function of nucleases as 'scissors' in cutting DNA molecules.

The role of ligases as 'glue' in joining cut DNA fragments.

Polymerases' function in synthesizing new strands of DNA complementary to a template.

Enzyme modifications that add or remove specific groups on DNA ends.

The importance of topoisomerase in managing DNA supercoiling.

Transcripts

play00:00

Hai assalamualaikum warahmatullahi

play00:03

wabarakatuh Ya Pada kesempatan kali ini

play00:06

saya akan menjelaskan mengenai rekayasa

play00:10

genetika

play00:12

hai hai

play00:13

the lounge

play00:15

Hai nah yang akan kita bahas dalam

play00:19

pertemuan kali ini adalah definisi

play00:22

rekayasa genetika beserta contohnya

play00:24

kemudian teknik rekayasa genetika secara

play00:28

umum itu seperti apa kemudian ada Factor

play00:32

dan satu lagi adalah enzim dalam

play00:34

rekayasa genetika Nah untuk rekayasa

play00:39

genetika sendiri dari segi definisi itu

play00:42

adalah proses pembentukan rekombinan

play00:45

baru dari material genetik dengan cara

play00:48

penyisipan suatu molekul asam nukleat

play00:50

asing yang dihasilkan di luar sel ke

play00:53

dalam suatu vektor sehingga memungkinkan

play00:57

penggabungan dan kelanjutan berkembang

play01:01

atau diperbanyak di dalam sel inang yang

play01:03

baru jadi yang namanya rekayasa genetik

play01:08

si intinya adalah bikin rekombinan baru

play01:12

jadi bikin DNA dengan

play01:15

susunannya yang baru karena ada

play01:18

penyisipan molekul asam nukleat asing

play01:21

dari luar JAdi misal kalau mau buat

play01:25

insulin nah kalau mau buat insulin

play01:28

insulin yaitu itu harus ada teknik

play01:32

rekayasa genetika dulu jadi nanti ada

play01:36

plasmid plasmid itu adalah DNA sirkuler

play01:39

plasmid itu disisipkan DNA asing DNA

play01:44

asing yaitu adalah DNA penyandi insulin

play01:48

yang dihasilkan oleh manusia jadi ada

play01:52

penyisipan gen di dalam plasmid sehingga

play01:55

menyebabkan mendapatkan DNA rekombinan

play01:59

baru Nah si DNA rekombinan tadi yang

play02:04

sudah disisipkan gen penghasil insulin

play02:07

itu nanti akan ditransformasikan atau

play02:10

dimasukkan kedalam mikroba contohnya itu

play02:13

ecoli jadi nanti

play02:15

Hai kali ini dia akan bisa menghasilkan

play02:18

insulin manusia nah Selain itu di dalam

play02:24

rekayasa genetika kita akan mengenal

play02:26

istilah yang namanya clone nah clone itu

play02:29

adalah organisme identik yang terbentuk

play02:32

secara genetik dan membawa seluruh

play02:34

potongan DNA yang telah disisipkan dan

play02:38

memperbanyak molekul yang baru jadi

play02:41

disini clone itu nanti ada istilah

play02:45

kloning gen gitu ya kloning gen itu

play02:47

adalah dia memang mengklon gitu ya

play02:52

menyisipkan gen gitu kan menyisipkan gen

play02:56

nah biasa nanti ada organisme baru atau

play03:02

ada DNA rekombinan baru yang terbentuk

play03:04

ini kalau makhluk hidup itu ada ini

play03:09

Domba Dolly itu hasil dari rekayasa

play03:12

genetika Yudi hasil dari kloning gen

play03:15

Hai Nah untuk haklon seperti itu nanti

play03:18

akan kita pelajari di slide selanjutnya

play03:21

Jadi kalau ini adalah mekanisme kloning

play03:24

dari Domba Dolly gitu ya ini sudah lama

play03:28

sekali tahun 96 jadi ada kloning dari

play03:31

ini domba yang putih namanya domba

play03:35

vendors at Divine dorset ini dia

play03:39

mendonorkan sel kelenjar mamanya gitu ya

play03:46

Salma maeya kelenjar susunya didonorkan

play03:49

gitu ya kemudian abis itu si selnya itu

play03:54

nanti akan di dilakukan diambil ininya

play04:01

nukleusnya nukleusnya itu nanti akan

play04:04

diambil gitu nah kemudian Kalau yang ini

play04:09

sih blackface domba yang blackface sini

play04:11

dua-duanya sama-sama perempuan ya Nah

play04:14

ini

play04:15

Aa domba blackfast itu yang si muka

play04:18

hitam itu diambil sel telurnya tapi sel

play04:22

telurnya itu diambil dihilangkan

play04:25

nukleusnya baru nanti akan ada kombinasi

play04:28

atau akan dikloning diklon gitu Ya

play04:32

maksudnya digabungkan antara siswi

play04:35

sitoplasma dari sih blackfast dengan si

play04:40

nukleus dari Spain dorset nah habis itu

play04:44

nanti akan ada vsell fusi gitu ya dengan

play04:47

listrik kemudian nanti akan ada proses

play04:52

fertilisasi dan ada pembelahan sel

play04:55

sehingga jadi embrio embrionya ini

play04:58

ditanam di high blackfast ini nah

play05:02

hasilnya anaknya ternyata Domba Dolly

play05:05

ini ya seperti she induknya yang bermuka

play05:09

putih atau berpenampilan atau fenotip

play05:14

yang putih ini

play05:15

Hai Nah kenapa kok bisa seperti ini

play05:17

menghasilkan anak tapi dua-duanya

play05:21

induknya itu adalah dari betina bisa

play05:24

seperti itu karena ini adalah proses

play05:26

kloning dari proses kloning gitu ya jadi

play05:29

ada penyisipan DNA itu sehingga

play05:33

menghasilkan individu baru tapi untuk

play05:37

proses clone menghasilkan individu baru

play05:40

ini memang ha masih terus diperdebatkan

play05:43

karena ini menyalahi tentang ini ya apa

play05:47

namanya Proses penciptaan suatu individu

play05:51

nah Al untuk rekayasa genetika ini nanti

play05:56

kita mengenal yang namanya material

play05:58

genetik sebenarnya spasi sudah pada tahu

play06:00

yang namanya material genetik ini

play06:02

intinya sih dia membawa informasi

play06:04

genetik yang pasti akan diturunkan dari

play06:06

tetua nya keturunan turunannya material

play06:10

genetik itu ada DNA gitu yah yang

play06:13

diturunkan

play06:15

nuklir acid itu yang akan diturunkan

play06:17

dari orangtua ke anak anaknya kalau Erna

play06:21

atau ribonuklease itu itu biasanya akan

play06:24

muncul pada saat sintesis protein Nah

play06:27

tapi di dalam tubuh Kalian pasti ada DNA

play06:29

dan erena nah rekayasa genetik juga

play06:34

berkaitan ada istilah vektor kloning nah

play06:37

vektor kloning Nanti kalian akan ha

play06:40

berkenalan gitu ya akan tahu ada yang

play06:43

namanya plasmid plasmid ini adalah DNA

play06:48

tapi bentuknya circular atau bulat dan

play06:51

dia adalah Wahana pembawa gen target

play06:53

untuk mengintroduksi gen ke Inang

play06:56

tertentu jadi si plasmid ini sebenarnya

play07:00

ada sisi restriksi atau sisi yang bisa

play07:05

di putus-putus gitu ya di di apa namanya

play07:08

di dipotong gitu dan ini bisa disisipkan

play07:12

oleh gen asing

play07:15

enam kemudian di rekayasa genetik itu

play07:19

Kalian juga nanti akan mengenal istilah

play07:21

gen itu ya gen itu ya genpro ini jadi

play07:25

gen itu adalah sekuens DNA yang

play07:27

menyandikan protein Jadi kalau yang

play07:29

struktur dasar gen manusia itu pertama

play07:32

yang terbesar itu adalah dalam sel itu

play07:35

nanti ada akan ada kromosom-kromosom itu

play07:37

nanti aja kan ada DNA bagian dari DNA

play07:41

itu adalah gen gitu jadi gen ini

play07:44

hanyalah suatu segel sekuen DNA atau

play07:48

Bagian kecil dari DNA yang menyandikan

play07:50

protein tertentu misalnya gen-gen kalian

play07:54

rambutnya itu berwarna hitam nah jadina

play07:58

susunan gen ini memang menyandikan

play08:01

protein untuk rambut berwarna hitam atau

play08:04

misalnya warna Irish apa namanya warna

play08:09

bola mata kalian itu misalnya warna

play08:12

coklat atau hitam nagen nya juga

play08:15

punah gen ini memang bagian atau segmen

play08:19

atau sekuen dari DNA Kemudian untuk

play08:24

aspek kloning gitu ya jadi yang namanya

play08:27

rekayasa genetika ini akan berkaitan

play08:30

dengan klon atau kloning gitu nah aspek

play08:34

kloning yang pertama itu adalah

play08:35

menerobos barrier alamiah suatu spesies

play08:39

jadi insulin manusia yang beredar di

play08:42

pasaran gitu insulin yang biasa dipakai

play08:44

untuk penderita diabetes mellitus itu

play08:47

diproduksi di escherichia colli jadi

play08:50

ecoli ini dia sebagai pabrik biologis

play08:54

untuk membuat insulin gitu atau aspek

play08:58

kloning lainnya ini dengan klon itu

play09:01

memungkinkan memperoleh dan memanipulasi

play09:04

secara relatif potongan-potongan DNA

play09:07

yang menyandikan fungsi spesifik terapi

play09:10

gen penyebab penyakit keturunan

play09:12

contohnya adalah faktor darah

play09:15

Ndan faktor darah 9 ini biasanya untuk

play09:18

penderita hemofilia jadi nanti akan ada

play09:21

bersendiri tentang aplikasi aplikasi

play09:24

rekayasa genetika berupa produknya di

play09:27

bidang Farmasi gitu ya oke terus aspek

play09:32

kloning yang lain itu adalah dengan

play09:34

kloning Eh nggak bisa merekayasa

play09:39

genetika sehingga kita tidak hanya

play09:42

mengisolasi dan menskrining tapi juga

play09:44

dapat mengkonstruksi organisme dalam hal

play09:48

ini galur-galur yang produktif Misalnya

play09:50

ini ini ada padi emas padi emas ini

play09:52

adalah Adi yang berwarna orange gitu ya

play09:56

orens nah ternyata si Padi ini dia

play10:00

mengandung vitamin A yang tinggi Jadi

play10:03

selain mendapatkan karbohidrat orang

play10:07

yang mengkonsumsi ini dia mendapatkan

play10:10

vitamin A atau ini eh he

play10:15

Khan yang bisa bioluminesens gitu ya

play10:18

berpendar dalam keadaan gelap gitu nah

play10:21

ini mengkonstruksi organisme sense

play10:25

mengkonstruksi organisme ya Sehingga

play10:27

dalam kegelapan dia bisa teranglah Islam

play10:30

bisa berpendar gitu Oke selanjutnya

play10:36

dasar penerapan kloning gen yang yang

play10:39

pertama ini adalah isolasi dan studi gen

play10:41

tertentu Jadi yang pertama kalau

play10:44

misalnya mau kloning gen kita harus

play10:47

mempelajari dulu gen-gen yang memang

play10:50

memiliki fungsi dan memiliki mekanisme

play10:54

tertentu misalnya kita pengen

play10:58

memproduksi tadi insulin Nah berarti

play11:01

kita harus isolasi dulu dan studi dulu

play11:04

gen-gen yang memang bisa menyandi

play11:07

protein penyandi hormon insulin gitu

play11:10

Jadi nanti harus ada isolasinya dulu

play11:13

gitu pemetaan genetik dulu

play11:15

Kemudian untuk Hah caranya itu nanti

play11:21

harus dipelajari bagaimana meningkatkan

play11:23

produksi oleh suatu gen yang spesifik

play11:26

biasanya nanti eh disini akan ada proses

play11:30

rekombinan ya Pembentukan rekombinan

play11:33

kemudian nanti akan ada proses

play11:35

transformasi dan nanti eh dari hasil

play11:38

transformasi itu nanti dipilih mana

play11:41

mikroba yang benar-benar mendapatkan

play11:44

atau terinstal agen yang kita inginkan

play11:48

Nanti baru kita akan produksi

play11:52

Hai nabrak teknik dasar yang berkaitan

play11:55

dengan kloning gen ini akan saya

play11:57

jelaskan secara sekilas karena nanti

play11:59

yang lebih rinci itu nanti ada di

play12:02

pertemuan minggu depan Nah yang pertama

play12:06

itu adalah yang harus diketahui dari

play12:09

teknik dasar kloning gen ini ini adalah

play12:13

isolasi DNA jadi DNA harus diisolasi

play12:16

entah itu than a circular atau plasmid

play12:20

atau DNA yang target ya DNA yang akan

play12:25

diklon kemudian teknik dasar yang kedua

play12:28

yang harus kita pahami atau yang kita

play12:32

yang harus kita tahu itu adalah metode

play12:36

memotong dan menyambung molekul asam

play12:38

nukleat jadi asam nukleat ini nanti akan

play12:41

dipotong plus Beat vektornya ini akan

play12:44

dipotong kemudian nanti akan disisipkan

play12:47

dengan DNA fragment yang akan kita

play12:50

clone.com udian

play12:52

kakanwil ada metode transformasi

play12:54

transformasi tuh ngapain sih si

play12:57

rekombinan plasmid ini disisipkan

play12:59

kedalam sel nah biasanya sel host atau

play13:03

Inang ini bisa pakai ecoli gitu ya Nah

play13:07

dan terakhir adalah seleksi hasil

play13:09

transformasi jadi nanti dipilih mana nih

play13:12

style atau sel host Inang gitu ya yang

play13:16

benar-benar tersisip dari plasmid

play13:19

rekombinan ini gitu nah hampir semua

play13:24

pengembangan pertama teknik rekayasa

play13:26

genetika digunakan ekolik sebagai

play13:28

organisme Inang kita biasanya pakai

play13:31

ecoli karena pertama dia

play13:34

berkembangbiaknya cepat atau

play13:36

reproduksinya cepat kemudian Hai paling

play13:39

banyak dipelajari karena juga informasi

play13:42

material genetiknya itu sudah lengkap

play13:44

GTA sudah ada eh peta genomnya itu sudah

play13:49

lengkap kisah

play13:52

hai hai

play13:55

hai hai

play13:57

Hai game The selanjutnya adalah plasmid

play14:01

disini untuk plasmid sendiri Ini adalah

play14:07

DNA ekstrakromosomal jadi SDN ekstra

play14:11

kromosom itu eh berbeda ya dengan DNA

play14:15

kromosom jadi DNA ekstrakromosomal ini

play14:17

dia bentuknya circular atau bulat nah

play14:22

bentuknya pun tetap utas ganda Tapi dia

play14:26

bisa bereplikasi Mandiri nah banyak

play14:30

sekali ditemukannya ini kalau plasmid

play14:32

ini adalah di bakteri bakteri ya bakteri

play14:36

nah tapi eh ditopang atau ya kreatif ada

play14:40

tapi tidak banyak gitu ya Nah plasmid

play14:43

ini atau DNA yang bulat seperti ini ini

play14:47

menyandikan resistensi antibiotik jadi

play14:53

resistensi antibiotik misalnya dia

play14:56

ampisilin

play14:57

atau kloramfenikol resisten gitu nah ini

play15:03

kemudian plasmid alami menyandikan

play15:06

Collision atau ya bakteriosin gitu ya

play15:09

Atau Dia mempunyai daya virulensi dan

play15:13

juga mempunyai aktivitas metabolik gitu

play15:16

nah jadi plasmid ini sebenarnya adalah

play15:20

DNA yang bulat gitu ya atau disebut

play15:23

dengan DNA sirkular dan dia termasuk DNA

play15:27

ekstrakromosomal jadi DNA tambahan dan

play15:30

dia bisa memperbanyak sendiri atau

play15:32

bereplikasi Mandiri nah plasmid ini

play15:36

mempunyai persyaratan pertama pas

play15:39

plasmid ini kan dia mempunyai daerah

play15:41

yang bisa disisipi nah eh biasanya dapat

play15:46

menampung sisipan Adna hingga 8 kilo

play15:50

basa kemudian mempunyai titik ori atau

play15:55

Origin Of replication A

play15:57

Legend of replication itu yang di sini

play16:00

ini adalah titik awal untuk mulai

play16:02

replikasi dan juga mempunyai marker

play16:07

untuk selektif seleksi ya selectable

play16:10

merek marker misalnya adalah ampisilin

play16:13

resisten kemudian mempunyai situs

play16:16

restriksi untuk penyisipan gen jadi di

play16:20

sini ada situs restriksi ini disini nah

play16:23

disini nah ini adalah situs restriksi

play16:26

yang bisa disisipkan Ken nah ini adalah

play16:33

plasmid HP GB 119 segitu ya jadi disini

play16:37

ada titik ori kemudian di sini ada

play16:40

ampisilin resisten Nah ini nah untuk

play16:46

stabilitas Hah plasmid dia itu memang

play16:51

dalam kondisi optimum dia stabil dan

play16:54

memang harus ada dalam media tumbuh

play16:56

tertentu

play16:57

jadi dia juga bisa memperbanyak diri

play17:02

sendiri gitu ya tidak tergantung

play17:04

kromosom karena kenapa ada game ori

play17:08

Gateway atau origin of replication jadi

play17:11

Biasanya sih plasmid ini bisa

play17:13

bereplikasi secara mandiri nah Biasanya

play17:18

kalau plasmid ini untuk dalam rekayasa

play17:22

genetika ini lebih aplikasikan dalam

play17:25

teknologi DNA rekombinan

play17:31

I Made It selanjutnya adalah enzim-enzim

play17:35

untuk rekayasa genetika nah ini ada

play17:38

beberapa enzim yang biasa dipakai untuk

play17:41

proses ini Nah ada lima enzim biasanya

play17:47

ada nuklease kemudian ada ligase ada

play17:51

polymerase ada Angie pemodifikasi ada

play17:54

topoisomerase nah kita akan bahas satu

play17:56

persatu yang pertama adalah nuklease

play17:59

nuklease ini ibaratnya adalah gunting

play18:03

gitu ya karena dia fungsinya itu adalah

play18:07

untuk memotong memendekkan atau

play18:10

menghancurkan molekul asam nukleat jadi

play18:12

ini misalnya ada DNA nih Nah Biasanya

play18:15

kalau untuk dipotong gitu ya

play18:19

ikatan-ikatan nya itu dengan enzim

play18:21

crease atau restriksi gitu ya Nah

play18:25

nuklease itu dibagi dua jadi di sini ada

play18:28

enzim endonuklease Nah kalau

play18:31

seini dia akan memutus ikatan

play18:34

fosfodiester nya itu di tengah-tengah

play18:36

nah di tengah-tengah itu akan diputus

play18:39

gitu namanya juga Endo begitu ya Nah

play18:43

jadi di dalam Nah kalau yang bawah ini

play18:47

adalah eksonuklease jadi dia

play18:50

menghilangkan nukleotida tuh dari ujung

play18:52

dari ujung sebelah sini nah contohnya

play18:54

Ini ada dmna terus ada eksonuklease

play18:57

disini dipotong berarti dipotongnya dari

play19:00

ujung Nah ada lagi ligase nah ligase ini

play19:06

adalah enzim yang ibaratnya dia sebagai

play19:08

LM gitu Nah karena ligase ini fungsinya

play19:13

buat nyambungin celah atau bagian utas

play19:16

DNA yang terputus pada molekul DNA jadi

play19:19

misalnya ini nih ada DNA jadi ada Sticky

play19:22

n gitu ya kemudian mau disambungkan itu

play19:26

enggak bisa tapi harus ada lemnya nah

play19:29

lemnya itu adalah enzim Liga

play19:31

the jadi tadi yang tadi yang pertama itu

play19:36

eh nuklease nuklease itu itu adalah

play19:40

ibaratnya guntingnya tapi kalau ligase

play19:43

itu adalah lemnya nah tapi dua-duanya

play19:47

bekerja pada utas DNA

play19:50

Hai kemudian ada lagi polymerase

play19:53

polymerase ini adalah membentuk utas DNA

play19:56

baru yang bersifat komplementer terhadap

play19:59

utas DNA template atau arena complete

play20:02

Jadi intinya sih polymerase ini adalah

play20:05

bikin utas DNA yang baru gitu atau

play20:08

pemanjangan DNA khusus Sunan DNA

play20:14

Hai kemudian ada lagi enzim pemodifikasi

play20:17

enzim pemodifikasi ini ada tiga ada

play20:20

alkaline phosphatase ada polinukleotida

play20:23

kinase dan satu lagi ada terminal

play20:26

deoksinukleotida Il transferase alkaline

play20:30

phosphatase itu alkaline phosphatase itu

play20:35

fungsinya untuk menghilangkan gugus

play20:38

fosfat pada ujung DNA

play20:41

Hai kemudian ada lagi polinukleotida

play20:45

vinasse Ini fungsinya adalah untuk

play20:48

menambahkan gugus fosfat pada ujung DNA

play20:51

dan Terminal deoksinukleotida

play20:53

transferase ini menambahkan

play20:55

deoksinukleotida pada ujung DNA Jadi

play20:58

intinya enzim pemodifikasi ini adalah

play21:01

dia akan memodifikasi pada ujung-ujung

play21:04

DNA atau akan menambahkan gugus tertentu

play21:08

pada DNA kemudian topoisomerase nah

play21:14

topoisomerase ini adalah dia fungsinya

play21:17

membentuk atau menghilangkan struktur

play21:20

superkoil pada DNA jadi ini ada struktur

play21:24

superkoil ini seperti karet yang memilin

play21:26

gitu ya Nah supaya bentuknya rileks

play21:29

server seperti ini itu memang harus ada

play21:32

bantuan dari enzim jadi yang tadinya

play21:35

bentuknya ini nih superkoil seperti ini

play21:38

nah menjadi bulat seperti ini

play21:41

Bruce ada enzim namanya topoisomerase

play21:45

oke sekian pemaparan saya hari ini

play21:48

Terima kasih atas perhatiannya salam

play21:51

alaikum warahmatullahi wabarakatuh

play21:55

hai hai

Rate This
β˜…
β˜…
β˜…
β˜…
β˜…

5.0 / 5 (0 votes)

Related Tags
Genetic EngineeringCloningBiotechnologyDNA ManipulationInsulin ProductionDolly the SheepGene CloningMolecular BiologyE. ColiPlasmid Vectors