Phenol-Sulfuric Acid Method for Carbohydrates

Summary

Este video muestra cómo realizar un análisis de carbohidratos utilizando el método de ácido sulfúrico fenol. Se prepara la muestra con extracción etanol, se calienta en un baño de agua, se enfría y se diluye. Se preparan las soluciones de referencia y se diluyen las muestras. Se mezclan con fenol y ácido sulfúrico, se calientan y se enfrían. Se midirán las absorbancias en un espectrofotómetro y se registrarán los datos en Excel. Finalmente, se desechan los residuos y se limpian los utensilios.

Takeaways

• 🍎 Preparación de la muestra: Utiliza extracción con etanol para obtener el pure de manzana.
• 🔍 Mezcla y procesamiento: Añade el pure y etanol en una bolsa Stomacher, mezcla y trasfiere a un crisol.
• 🔥 Cocer y enfriar: Coloca el crisol en un baño de agua hirviendo durante 15 minutos y luego enfriar a temperatura ambiente.
• 📐 Ajuste de volumen: Trasfiere la solución a un frasco de volumen y completa el volumen con etanol al 50 ml.
• 🧪 Filtrado y preparación de muestras: Filtra y reserva parte de la solución para análisis posterior.
• 📊 Preparación de estándares: Crea una solución de glucosa a partir de una solución de glucosa al 1% y diluye en diferentes concentraciones.
• 🌀 Mezcla de muestras: Diluye el extracto de manzana filtrado y mezcla bien en duplicado.
• 🧪 Adición de reactivo: Añade fenol y ácido sulfúrico concentrado a las muestras y estándares en el mostrador de gases.
• 🔥 Reacción química: Coloca las tubos en un baño de agua hirviendo y posteriormente en un baño de hielo para enfriar.
• 📐 Lectura espectrofotometry: Analiza las muestras en un microplaca a 490 nm utilizando un espectrofotómetro TECAN.
• 💾 Registro de datos: Guarda los resultados en un archivo de Excel con la sesión y el grupo correspondientes.
• 🗑️ Manejo de residuos: Descarta los residuos químicos en un frasco adecuado y limpia los utensilios utilizados.

Q & A

¿Qué método se utiliza en el video para analizar los carbohidratos?

El método utilizado para analizar los carbohidratos en el video es el método del ácido fénol-sulfúrico.

¿Qué equipo se necesita para realizar el análisis de carbohidratos según el script?

Se necesitan un Stomacher, bolsas para mezclar, un crisol de 100 ml, un volúmen de 50 ml, un filtro, tubos de ensayo, un microplaca y un espectrofotómetro TECAN.

¿Cuál es el primer paso para preparar la muestra de mostaza de manzana para el análisis?

El primer paso es agregar 5 g de mostaza de manzana y 45 ml de etanol al 80% en una bolsa Stomacher y mezclar la mezcla.

¿Cuánto tiempo se debe hervir la solución en un baño de agua hirviendo?

La solución debe hervir durante 15 minutos en un baño de agua hirviendo.

¿Cómo se prepara la solución estándar para el método de ácido fénol-sulfúrico?

Se prepara una solución de 100 µg de glucosa/ml con agua destilada, utilizando una solución del 1% de glucosa según los cálculos previos al laboratorio.

¿Cuántas diluciones diferentes de la mostaza de manzana filtrada se deben preparar y cuántas repeticiones deben tener?

Se deben preparar dos diluciones diferentes de la mostaza de manzana filtrada, cada una de 10 ml, con agua destilada en tres repeticiones.

¿Cuánto volumen de cada estándar o muestra se debe pipetear en un tubo de ensayo limpio?

Se debe pipetear 2 ml de cada estándar o muestra en un tubo de ensayo limpio.

¿Qué cantidad de fenol y ácido sulfúrico concentrado se agrega a cada tubo de ensayo en el foguero?

Se agrega 1 ml de fenol y 5 ml de ácido sulfúrico concentrado a cada tubo de ensayo.

¿Cuánto tiempo se deben hervir los tubos de ensayo en un baño de agua hirviendo después de agregar el fenol y el ácido sulfúrico?

Los tubos de ensayo se deben hervir durante 10 minutos en un baño de agua hirviendo.

¿A qué longitud de onda se utiliza para leer el microplaca en el espectrofotómetro TECAN?

Se utiliza una longitud de onda de 490 nm para leer el microplaca en el espectrofotómetro TECAN.

¿Dónde se deben guardar los resultados del análisis en el ordenador?

Los resultados del análisis se deben guardar en un archivo de Excel con el número de sesión y el número de grupo en el ordenador y en un USB para un análisis posterior.

¿Cómo se debe manejar el residuo del ácido fénol-sulfúrico después del análisis?

El residuo del ácido fénol-sulfúrico se debe depositar en un frasco de desecho etiquetado como 'desecho de ácido fénol-sulfúrico' en el foguero.