¿Qué es y cómo funciona la PCR?

Pirating Science

28 Jan 202104:59

Summary

TLDRLa Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es una técnica fundamental en biología molecular que permite amplificar fragmentos específicos de ADN a partir de cantidades mínimas. Desarrollada por Kary Mullis en 1983, esta técnica consiste en ciclos de desnaturalización, hibridación y elongación, utilizando componentes clave como ADN molde, dNTPs, primers y polimerasa Taq. La PCR tiene aplicaciones en diversas áreas, como investigación, medicina y ciencias forenses, permitiendo la detección de virus a través de la amplificación de secuencias específicas en muestras biológicas.

Takeaways

😀 La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es una técnica fundamental en biología molecular para amplificar fragmentos de ADN.
😀 Kary Mullis desarrolló la PCR en 1983, lo que le valió el Premio Nobel de Química una década después.
😀 La PCR permite obtener millones de copias de una molécula de ADN a partir de una cantidad mínima.
😀 Los ingredientes básicos para una reacción de PCR incluyen ADN molde, dNTPs, cebadores, ADN polimerasa y iones bivalentes.
😀 La ADN polimerasa más comúnmente utilizada en PCR es la Taq polimerasa, que es termostable.
😀 Una reacción de PCR generalmente consta de 25-45 ciclos, cada uno con pasos de desnaturalización, hibridación y alargamiento.
😀 La desnaturalización separa las dos cadenas de ADN a aproximadamente 94ºC.
😀 Durante la hibridación, los cebadores se unen a la secuencia complementaria del ADN molde a temperaturas entre 45-68ºC.
😀 La elongación se realiza utilizando dNTPs para sintetizar la cadena complementaria, típicamente a 68ºC para la Taq polimerasa.
😀 La PCR tiene diversas aplicaciones en investigación, medicina, paleontología y ciencias forenses, como la detección de virus en muestras humanas.

Q & A

¿Qué es la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)?
-La PCR es una técnica utilizada en biología molecular para multiplicar rápidamente un fragmento específico de ADN a partir de una cantidad mínima.
¿Quién desarrolló la PCR y en qué año?
-La PCR fue ideada por el bioquímico Kary Mullis en 1983.
¿Cuáles son los ingredientes básicos necesarios para realizar una reacción de PCR?
-Los ingredientes básicos son el fragmento de ADN plantilla, dNTPs, dos cebadores complementarios, ADN polimerasa y iones bivalentes como magnesio o manganeso.
¿Por qué es importante utilizar una ADN polimerasa termoestable en PCR?
-Es importante porque la PCR implica ciclos de alta temperatura, y una polimerasa termoestable, como la Taq, puede funcionar eficientemente en esas condiciones.
¿Qué pasos conforman un ciclo de PCR?
-Un ciclo de PCR generalmente consta de tres pasos: desnaturalización, hibridación y alargamiento.
¿A qué temperatura se realiza la desnaturalización del ADN?
-La desnaturalización del ADN se realiza a aproximadamente 94ºC.
¿Qué sucede durante la hibridación en la PCR?
-Durante la hibridación, los cebadores se unen a su secuencia complementaria en la plantilla de ADN a temperaturas entre 45-68ºC.
¿Qué ocurre en el paso de alargamiento de la PCR?
-En el alargamiento, la ADN polimerasa sintetiza una cadena complementaria de ADN a partir de la plantilla, utilizando los dNTPs libres y comenzando desde el cebador.
¿Cuáles son algunas aplicaciones de la PCR?
-La PCR se utiliza en investigación, medicina para diagnósticos, paleontología y ciencias forenses.
¿Cómo se puede utilizar la PCR para detectar la presencia de un virus en una muestra humana?
-Se diseña un cebador específico para una región del genoma viral que no está presente en el genoma humano, y si la persona está infectada, se amplificará esta región durante la PCR.