Técnicas básicas de Microbiología: Tinción de Gram

Área Microbiología Universidad de Salamanca

8 Mar 201702:48

Summary

TLDREn este video, se muestra el proceso de tinción de Gram, una técnica diferencial utilizada para clasificar las bacterias en dos grupos: gram positivas y gram negativas, según la estructura de su pared celular. Se inicia con la preparación de un frotis de bacteria, seguido de la fijación al calor. Se aplica el colorante cristal violeta, que tiñe todas las células de morado, y se utiliza el lugol como mordiente. El tratamiento con alcohol revela diferencias entre los tipos de bacterias. Finalmente, se aplica la safranina para teñir las gram negativas, permitiendo su identificación al microscopio junto a la morfología de las células.

Takeaways

🦠 La tinción de Gram se utiliza para clasificar las bacterias en dos grupos: Gram positivas y Gram negativas.
🔬 El procedimiento comienza con la preparación de un frotis de bacteria sobre un portaobjetos.
💧 Se añade una gota de agua para extender la muestra y se deja secar al aire.
🔥 La muestra se fija mediante calor, pasando el portaobjetos por una llama.
💜 Se aplica cristal violeta, un colorante básico que tiñe todas las células de color morado.
⏳ Se deja actuar el cristal violeta durante un minuto antes de retirarlo.
🧪 Se utiliza yodo como mordiente, que se deja actuar por un minuto también.
🚫 El alcohol se utiliza para decolorar; retiene el cristal violeta en las Gram positivas y lo retira de las Gram negativas.
🌈 Se añade safranina como colorante de contraste, que tiñe las Gram negativas de color rojo.
🔍 Finalmente, se observa la muestra al microscopio, donde las Gram positivas se ven moradas y las Gram negativas rojas, revelando su morfología.

Q & A

¿Qué es la tinción de Gram?
-La tinción de Gram es una técnica diferencial utilizada para clasificar las bacterias en dos grupos principales: Gram positivas y Gram negativas, según la estructura de su pared celular.
¿Cuál es el primer paso en el procedimiento de tinción de Gram?
-El primer paso es la preparación de un frotis, donde se añade una pequeña cantidad de bacteria sobre una gota de agua en un portaobjetos, se extiende bien y se deja secar al aire.
¿Por qué se calienta la muestra durante el proceso?
-Se calienta la muestra para fijarla, asegurando que las bacterias se adhieran al portaobjetos y no se desprendan durante el proceso de tinción.
¿Qué función tiene el cristal violeta en la tinción de Gram?
-El cristal violeta es un colorante básico que tiñe todas las células de color morado, lo que permite identificar las bacterias Gram positivas.
¿Qué ocurre al aplicar el alcohol después de la tinción con cristal violeta?
-El alcohol actúa como decolorante; en las bacterias Gram positivas, el cristal violeta es retenido, mientras que en las Gram negativas se retira el colorante.
¿Cuál es el propósito del yodo en el procedimiento?
-El yodo se utiliza como mordiente que ayuda a fijar el cristal violeta en las células Gram positivas, aumentando la efectividad del colorante.
¿Qué ocurre después de la decoloración con alcohol?
-Después de la decoloración, se enjuaga con agua y se aplica safranina como colorante de contraste, que tiñe las células Gram negativas de rojo.
¿Cómo se pueden diferenciar las bacterias Gram positivas de las Gram negativas al observarlas al microscopio?
-Las bacterias Gram positivas aparecerán moradas, mientras que las Gram negativas se verán rojas. Además, se puede observar la morfología de las células.
¿Cuánto tiempo se debe esperar al aplicar safranina?
-Se debe esperar un minuto y medio después de aplicar safranina antes de enjuagar y observar la muestra.
¿Cuál es la importancia de la tinción de Gram en microbiología?
-La tinción de Gram es crucial en microbiología porque permite clasificar y entender las características de las bacterias, lo que es fundamental para elegir tratamientos adecuados.