Durchführung einer Dünnschichtchromatographie
Summary
TLDRDieses Video vermittelt eine einfache Methode zur Identifizierung von Substanzen in einer Probe durch Dünnschicht-Chromatographie. Es zeigt die Vorbereitung der Platte, das Auftragen von Proben, die Entwicklung in der Kammer und die Detektion mit UV-Licht und anderen Reagenzien. Es demonstriert, wie Dopamin, Koffein und ihre Mischungen nachgewiesen werden können, und betont die Bedeutung von Vorsicht und Genauigkeit in jedem Schritt, um eine effektive Analyse zu gewährleisten.
Takeaways
- 🔍 Dünnschicht-Chromatographie ist eine Methode zur Auftrennung und Identifizierung von Substanzen in einer Probe.
- 📏 Eine Platte in geeigneter Größe wird verwendet und mit einer Basislinie markiert, um die Position der Proben zu kennzeichnen.
- 🧪 Proben sollten eine Konzentration von etwa 5 Milligramm pro Milliliter haben und mit einer Analysewaage gewogen werden.
- 🌡️ Die Platte wird vor Auftrag der Proben ggf. mit UV-Licht überprüft, um die Sichtbarkeit der aufgetragenen Punkte sicherzustellen.
- 🚫 Es ist wichtig, dass nicht alle Substanzen UV-detektierbar sind, was die Sichtbarkeit der Punkte beeinträchtigen kann.
- 💧 Die Proben werden mit einem Kapillar aufgetragen, wobei darauf geachtet werden muss, dass die Punkte nicht zu groß werden.
- 🛑 Nach dem Auftragen der Proben muss die Platte getrocknet werden, bevor das Laufmittel angewendet wird.
- 🌀 Das Laufmittel wird in die Kammer gefüllt, und die Platte wird sorgfältig eingelegt, ohne die Basislinie zu berühren.
- 🔝 Nach dem Laufprozess werden die RF-Werte der Proben berechnet, um die Auftrennung zu bewerten.
- 🔬 Es werden verschiedene Detektionsmethoden wie UV-Linien und Kyoto-Lieder beschrieben, um die Substanzen nachzuweisen.
- ⚠️ Es wird betont, dass bei der Detektion mit Reagenzien wie Mini Green und anderen nur wenig auf die Platte gesprüht werden sollte, um eine Überfärbung zu vermeiden.
- 🔄 Für eine echte analytische Arbeit müsste der Versuch möglicherweise mit einem anderen Laufmittel wiederholt werden, um eine bessere Auftrennung zu erzielen.
Q & A
Was ist die Dünnschicht-Chromatographie und wie wird sie verwendet?
-Die Dünnschicht-Chromatographie ist eine Methode zur Trennung und Identifizierung von Substanzen in einer Probe. Sie ermöglicht es, die enthaltenen Substanzen durch Verschiebung in einer festen Phase von einer Flüssigkeit zu trennen.
Wie wird die Platte für die Dünnschicht-Chromatographie vorbereitet?
-Die Platte wird in einer passenden Größe ausgeschnitten und etwa 1 cm vom unteren Ende eine Basislinie mit Bleistift eingezeichnet. Es kann hilfreich sein, Punkte auf der Basislinie zu zeichnen und zu benennen, um die Position der Proben zu kennzeichnen.
Welche Konzentration sollten die Proben für die Dünnschicht-Chromatographie haben?
-Die Proben sollten eine Konzentration von etwa 5 Milligramm pro Milliliter haben.
Wie wird die Probe auf die Platte aufgetragen?
-Die Probe wird mit einem Kapillar aufgenommen und auf die Platte in kleinen Punkten aufgetragen. Es ist wichtig, dass die Punkte nicht zu groß sind und immer getrocknet werden, bevor ein weiterer Punkt aufgetragen wird.
Warum sollte man beim Auftragen der Proben Handschuhe tragen?
-Handschuhe werden getragen, um später gut sichtbare Punkte bei der Detektion zu erhalten und um die Proben nicht zu verschmutzen.
Was ist der Zweck des UV-Lichts in der Dünnschicht-Chromatographie?
-UV-Licht wird verwendet, um die Aufträgen der Proben auf der Platte zu überprüfen, um sicherzustellen, dass die Punkte gut sichtbar sind, da nicht alle Substanzen unter UV-Licht fluoreszieren.
Wie wird die Platte in die Kammer eingelegt und was ist zu beachten?
-Die Platte wird in die Kammer eingelegt, wobei darauf zu achten ist, dass das Laufmittel beim Eintragen der Platte keinerlei Kontakt mit der Basislinie hat, um die Proben nicht zu verlaufen.
Was ist das Ziel, das Laufmittel bis zu zwei Drittel bis drei Viertel der Platte hoch zu lassen?
-Das Ziel ist, die Substanzen in der Probe durch das Laufmittel in die Platte zu treiben, um eine effektive Trennung und Migration zu ermöglichen.
Wie werden die RF-Werte der Proben berechnet?
-Nach dem Entfernen der Platte aus der Kammer werden die Flussmittel-Flecken mit Bleistift eingezeichnet, um später die RF-Werte der Proben zu berechnen. Diese Werte helfen, die Substanzen zu identifizieren.
Welche Detektionsmethoden werden in dem Skript erwähnt?
-Die erwähnten Detektionsmethoden sind UV-Linien, Iod-Vaporisierung und Mini-Green-Spray. Jede Methode hat ihre eigenen Vorgehensweise und Anwendungszwecke.
Was ist die Bedeutung von RF-Werten in der Dünnschicht-Chromatographie?
-RF-Werte, auch bekannt als Rf-Faktoren, sind ein Maß für die Migrationsgeschwindigkeit einer Substanz in der Dünnschicht-Chromatographie. Sie werden verwendet, um die Identität der Substanzen zu bestimmen.
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