Tinción negativa

Microbiología y Bacteriología

30 Aug 202203:02

Summary

TLDRLa atención negativa es una técnica de coloración especial utilizada para resaltar la presencia de cápsulas en microorganismos, como el estreptococo neumonía. Este método, conocido como tinción negativa, tiñe el fondo en un color oscuro mientras que la cápsula, al rechazar la tinta china, se muestra como un halo claro alrededor del microorganismo. El procedimiento implica esterilizar el área de trabajo, preparar una gota de tinta china y extenderla con un asa de colonia aislada. La observación se realiza con un microscopio, comenzando con objetivos de menor aumento y finalizando con un objetivo de alta potencia.

Takeaways

🎨 La atención negativa es un método de coloración especial que destaca la cápsula en microorganismos como el estreptococo neumonía.
🧪 Esta técnica se llama tinción negativa porque actúa de manera opuesta a otras técnicas de coloración, donde lo que no se tiñe es la estructura de interés.
🌑 En la tinción negativa, el fondo se tiñe con un color oscuro, mientras que las cápsulas de polisacáridos rechazan la tinta china, creando un halo claro alrededor de los microorganismos.
🧼 Se inicia el procedimiento esterilizando el área de trabajo con toallas de papel y alcohol para evitar contaminaciones.
🔥 Es importante encender el mechero y preparar adecuadamente el material antes de comenzar el procedimiento.
💧 Se coloca una gota pequeña de tinta china en un portaobjetos para realizar la observación.
🧫 Se utiliza un asa de cultivo de clubes y neumonía de 18 a 24 horas, preferentemente con siembra por agotamiento, para obtener la colonia aislada.
🔍 Después de tomar una muestra, se extiende en la gota de tinta china, asegurándose de esterilizar el asa nuevamente.
🧵 Se puede añadir un colorante de contraste, como el azul de metileno, para mejorar la visibilidad de las células bacterianas, aunque en este caso solo se usó tinta china.
🔬 La preparación se observa bajo el microscopio comenzando con los objetivos de menor aumento y terminando con el objetivo de 100x utilizando aceite de inmersión.

Q & A

¿Qué es la tinción negativa?
-La tinción negativa es un método de coloración especial que resalta la presencia de cápsulas en microorganismos, como el estreptococo neumonía, al dejar sin teñir la estructura que se desea observar.
¿Por qué se le llama tinción negativa?
-Se llama tinción negativa porque actúa de manera contraria a otras técnicas de coloración; lo que queda sin teñir es la estructura del microorganismo, permitiendo que la cápsula sea visible.
¿Cómo se lleva a cabo el procedimiento de tinción negativa?
-Se esteriliza el área de trabajo, se prepara una gota de tinta china en un portaobjetos, se añade una colonia de microorganismos, se realiza un extendido y se observa al microscopio.
¿Cuál es el objetivo de usar tinta china en la tinción negativa?
-La tinta china es utilizada porque los polisacáridos de las cápsulas de los microorganismos la rechazan, lo que permite que la cápsula se vea como un halo claro alrededor de las células.
¿Qué se debe hacer antes de preparar la muestra para observación?
-Es necesario esterilizar el asma y preparar el material, incluyendo la limpieza del área de trabajo con toallas de papel y alcohol.
¿Qué tipo de cultivo se recomienda para esta técnica?
-Se recomienda utilizar un medio de cultivo de clubes y la neumónica que tenga entre 18 a 24 horas de crecimiento.
¿Cómo se observa la preparación bajo el microscopio?
-Se comienza a observar desde el objetivo 4x, luego 10x, 40x y finalmente se utiliza el objetivo 100x con aceite de inversión para una mejor visualización.
¿Es necesario añadir un colorante de contraste en este procedimiento?
-No es necesario, aunque se puede añadir un colorante de contraste, como el azul de metileno, para hacer las células bacterianas más visibles; en este caso solo se realizó el extendido con tinta china.
¿Cuál es el efecto de la tinción negativa en la visualización de cápsulas?
-La tinción negativa permite visualizar las cápsulas de los microorganismos como halos claros, lo que facilita la identificación de la presencia de estas estructuras.
¿Qué precauciones se deben tomar al trabajar con tinta china?
-Es importante trabajar en un área esterilizada y manejar con cuidado el material para evitar contaminación durante el proceso de tinción.