Tinción Gram
Summary
TLDRLa transmisión semana de ciencia virtual, conducida por Diego Ramos, se centra en la coloración de Gram, un método crucial para distinguir bacterias Gram positivas y negativas. Se explora el histórico, desde el trabajo pionero de Christian Gram hasta las mejoras de Hans Christian Joachim. Se discute la importancia de los componentes como el cristal violeta, el éter y el safranina, así como factores que afectan la técnica, como la edad del cultivo y el pH. La sesión educativa resalta la relevancia de la coloración Gram en la identificación bacteriana y su aplicación clínica.
Takeaways
- 🌟 La transmisión virtual sobre coloración granulométrica fue iniciada por Diego Ramos, un biólogo de la Universidad Nacional Federico Villarreal.
- 🔬 Cristian Gram, un botánico y farmacólogo, fue clave en el desarrollo de la coloración de bacilos, lo que le llevó a diferenciar bacterias como la neumococo y el estreptococo.
- 📚 El año 1884 marcó un hito en la coloración de bacterias cuando Gram estableció la diferencia entre bacterias gram positivas y gram negativas, utilizando violeta de genciana y etanol.
- 🧪 El científico alemán Carl amplió el descubrimiento de Gram añadiendo safranina como colorante de contraste, lo que permitió distinguir bacterias de colores rosada y violeta.
- 📌 La clasificación de bacterias en gram positivas y negativas se basa en su capacidad para retener el colorante violeta o mostrar un coloración rosada tras el proceso de coloración.
- 💧 El proceso de coloración de Gram implica la penetración del cristal violeta en todas las células bacterianas, seguido de la adición de lugol que solo interactúa con las bacterias gram positivas.
- 🧬 La morfología y la agrupación de las bacterias son importantes para la identificación clínica y pueden ser observadas a través de la coloración de Gram.
- 🧪 Los colorantes utilizados en la coloración de Gram, como el cristal violeta y el safranina, tienen propiedades químicas y físicas que influyen en su interacción con las paredes celulares bacterianas.
- 🛡️ Las bacterias gram positivas tienen una pared celular más gruesa y compleja que permite la formación del complejo cristal violeta yodo.
- 🌱 La pared celular de las bacterias gram negativas es más delgada y tiene una membrana externa que impide la formación del complejo cristal violeta yodo.
- 🔍 La coloración de Gram no es infalible y puede verse afectada por factores como la edad del cultivo, el pH, y la permeabilidad de la pared celular.
Q & A
¿Quién es el presentador de la transmisión de la semana de ciencia virtual sobre coloración gran?
-El presentador es Diego Ramos Torricelli, un biólogo de la Universidad Nacional Federico Villarreal.
¿Qué descubrió Christian Gram y cómo influenció su trabajo en la bacteriología y la farmacología?
-Christian Gram descubrió el método de coloración de bacterias conocido como la coloración de Gram, que le permitió diferenciar entre bacterias Gram positivas y Gram negativas, lo que fue fundamental en el estudio de la bacteriología y la farmacología.
¿Qué es la 'atención grande' y qué se busca con ella?
-La 'atención grande' se refiere al proceso de coloración de Gram, que se utiliza para identificar y diferenciar bacterias en función de su morfología y su capacidad para retener el colorante violeta de genciana.
¿Qué aportó el científico alemán Carl a la técnica de coloración de Gram?
-Carl amplió el descubrimiento de Gram añadiendo safranina como un colorante de contraste, lo que permitió distinguir bacterias que se teñían de color rosa después del proceso de coloración.
¿Cómo se clasifican las bacterias según su coloración en la técnica de Gram?
-Las bacterias se clasifican en Gram positivas, aquellas que presentan una coloración violeta, y Gram negativas, aquellas que presentan una coloración rosada después del proceso de coloración.
¿Qué es el complejo cristal violeta yodo y cómo se forma?
-El complejo cristal violeta yodo es una unión entre el cristal violeta y el yodo, que se forma durante el proceso de coloración y es clave para la retención del colorante en las bacterias Gram positivas.
¿Por qué el alcohol es utilizado como decolorante en el proceso de coloración de Gram?
-El alcohol se utiliza como decolorante porque deshidrata la pared celular de las bacterias, lo que ayuda a mantener el complejo cristal violeta yodo en las bacterias Gram positivas y a eliminarlo en las Gram negativas.
¿Qué cambios en la pared celular de las bacterias Gram positivas pueden afectar el resultado de la coloración de Gram?
-Si una bacteria Gram positiva tiene una pared celular dañada o inestable, no podrá retener el complejo cristal violeta yodo y se decolorará, lo que podría dar una falsa impresión de ser una bacteria Gram negativa.
¿Cómo influye el pH en la técnica de coloración de Gram?
-El pH puede afectar la permeabilidad de la pared celular y la interacción entre los colorantes y los componentes de la pared celular, lo que puede llevar a cambios en los resultados de la coloración de Gram.
¿Qué factores pueden influir en la calidad de la coloración de Gram y por qué es importante tener controles?
-Factores como la edad de los cultivos, la técnica empleada, la calidad de los reactivos y el tiempo de decoloración pueden influir en la calidad de la coloración. Es importante tener controles para asegurar que la técnica esté siendo realizada correctamente y para detectar cualquier variación o error en los resultados.
Outlines
🔬 Introducción a la semana de ciencia virtual y coloración de bacterias
El video comienza con una introducción por Diego Ramos, biólogo de la Universidad Nacional Federico Villarreal, a la primera sesión de una semana de ciencia virtual centrada en la coloración de bacterias. Se menciona a Hans Christian Gram, quien desarrolló un método para diferenciar bacterias en dos grupos: gram positivos y gram negativos, basándose en su capacidad para retener un colorante violeta después de un proceso de tinción y decoloración. La importancia de este método radica en su contribución a la identificación y clasificación de bacterias en el ámbito clínico.
📚 Desarrollo histórico y técnica de la coloración de Gram
Este párrafo detalla el proceso histórico del método de coloración de Gram, desde los estudios de Gram hasta las mejoras realizadas por otros científicos como Carl, quien añadió safranina como colorante de contraste. Se discute cómo la tinción con cristal violeta y el uso de etanol como decolorante permite distinguir a las bacterias gram positivas por su coloración violeta y a las gram negativas por su coloración rosada. Además, se explora el papel de los colorantes y la interacción con la pared celular bacteriana, destacando la importancia del cristal violeta y su intensidad, que se debe a la cantidad de grupos metilo que contiene.
🧬 Estructura y composición de la pared celular bacteriana en la coloración de Gram
Se aborda la importancia de la estructura de la pared celular bacteriana en la coloración de Gram, destacando la diferencia entre las paredes de bacterias gram positivas, que son más gruesas y contienen peptidoglicano, y las paredes de bacterias gram negativas, que son más delgadas y tienen una membrana externa. Se describe el proceso de la coloración de Gram, desde la penetración del cristal violeta en todas las bacterias hasta la formación de un complejo con yodo en las paredes de bacterias gram positivas, que se mantiene después del proceso de decoloración con alcohol acetona. Se menciona también cómo las bacterias gram negativas no forman este complejo y son por lo tanto decoloradas por el alcohol, permitiéndoles吸收 el colorante de contraste, el azafrán inah.
🔍 Teorías y factores que influyen en la coloración de Gram
En este párrafo se presentan varias teorías que explican el mecanismo de la coloración de Gram, incluyendo interacciones químicas entre proteínas y colorantes, la importancia de la isoelectrica en la pared celular y cómo la variación del pH puede afectar la clasificación de las bacterias. También se discuten factores que pueden influir en la eficacia de la coloración, como la edad de los cultivos y la calidad de los reactivos utilizados. Se enfatiza la necesidad de controles para asegurar la precisión de la técnica y se concluye con la importancia de la coloración de Gram para la identificación preliminar de bacterias en infecciones y el control de calidad en el laboratorio.
Mindmap
Keywords
💡Coloración Gram
💡Cristian Gram
💡Bacterias Gram Positivos
💡Bacterias Gram Negativos
💡Peptidoglicano
💡Colorante de Contraste
💡Decolorante
💡Pérdida de Coloración
💡Membrana Externa
💡pH
💡Variación de la Coloración
Highlights
Inicio de la primera transmisión de la semana de ciencia virtual con el tema de la coloración gran.
Introducción a la figura de Christian Gram y su contribución a la bacteriología y la farmacología.
El descubrimiento de la coloración de bacilos de tuberculosis por Gram y su influencia en la diferenciación de bacterias.
La formulación del método de coloración de Gram y su importancia en la identificación de bacterias gram positivas y negativas.
La mejora del método de coloración por parte del científico alemán Carl y la introducción del safranina como colorante de contraste.
La clasificación de bacterias basada en su reacción a la coloración de Gram.
La importancia de la morfología y las agrupaciones bacterianas en el ámbito clínico.
El proceso de la coloración de Gram y su resultado en la diferenciación de bacterias por su coloración violeta o rosada.
La teoría detrás de la interacción entre los colorantes y la pared celular bacteriana.
La composición y el papel del cristal violeta en la coloración de Gram.
La función del alcohol como decolorante en el proceso de coloración de Gram.
La variabilidad de la técnica de coloración de Gram y factores que pueden influir en su eficacia.
Las modificaciones realizadas por diversos autores para mejorar y estabilizar la coloración de Gram.
La estructura de la pared bacteriana y su relevancia en la coloración de Gram.
La diferencia en la pared celular entre bacterias gram positivas y gram negativas y su influencia en la coloración.
El proceso detallado de la coloración de Gram, desde la penetración del cristal violeta hasta la adquisición del colorante de contraste.
Factores que pueden causar una bacteria gram positiva a aparecer como gram negativa y viceversa.
La importancia de las cargas eléctricas en la interacción entre las proteínas y los colorantes durante la coloración de Gram.
Teorías sobre el mecanismo de la coloración de Gram y la participación de interacciones químicas y físico-químicas.
Factores que influyen en la calidad de la coloración de Gram, incluyendo la edad de los cultivos y el pH del medio.
La utilidad de la coloración de Gram en la identificación preliminar de bacterias y el control de calidad.
Conclusión de la sesión y agradecimiento a los participantes, con una promesa de futuras sesiones.
Transcripts
muy buenos con todos los participantes
damos inicio a la primera transmisión de
la semana de ciencia virtual con el tema
coloración gran fundamento y
procedimiento mi nombre es diego ramos
torricelli biólogo de la universidad
nacional federico villarreal sin más que
decir damos inicio a esta primera sesión
y agradecemos su conexión
[Música]
para hablar sobre la coloración gran
tenemos que hablar un poco sobre
cristian graf y cristian gran estudio
botánica es desarrollo en farmacología y
microscopía también desarrolló estudios
en medicina donde pudo desarrollarse en
el área de la bacteriología y la
farmacología estos estudios los llevó a
poder realizar diferentes tipos de viaje
y conocer diferentes tipos de
investigadores y estudios los estudios
sterling en la coloración de bacilos de
tuberculosis lo inspiró para la
coloración de las bacterias intentó
establecer la diferencia entre dos
bacterias causantes de la neumonía
alexis la neumonía y neumococo
ya para el año 1884 cristian gran pudo
realizar lo que hoy conocemos nosotros
como la atención grande
parece entonces solamente cristian gran
conocí a las bacterias gram positivo ya
que había utilizado violeta de genciana
yo doy etanol
de este modo años posteriores apareció
el científico alemán carl quien amplió
este descubrimiento añadiendo safran
inah como un colorante de contraste
observando que después de la coloración
con zafra ni na podía evidenciar
bacterias que se tenían de un color
rosada y otras bacterias que no llamando
las éstas como bacterias gram-negativas
entonces gracias al aporte de estudios
científicos se pudo clasificar a las
bacterias por su coloración en bacterias
gram positivas y en bacterias
gram-negativas bacterias gram positivas
aquellas que presentaban una coloración
violeta y las bacterias gram-negativas
aquellas que presentaban una coloración
rosada
esta colaboración también nos permitió
poder identificar la morfología y las
agrupaciones de las bacterias teniendo
una importancia en el área clínica
vemos allí el procedimiento de la
atención gran el resultado final es
obtener para las bacterias gram
positivas coloración es violetas y para
las bacterias gram-negativas una
coloración rosada observamos también la
morfología y la agrupación que puedan
tener estas el fundamento de esa
atención grande siempre van a presentar
diferentes tipos de puntos si se da por
la interacción que puedan formar el
colorante entre el complejo cristal
violeta yodo o la composición de la
pared celular bacteriana el día de hoy
vamos a hablar un poco acerca sobre este
fundamento que es de gran importancia
para poder entender cómo se intente esta
interacción entre los colorantes y la
pared bacteriana
para eso hay que hablar un poco sobre
los colorantes el cristal violet es un
es una solución catiónica en lugo le su
mordiente en el cual se va a unir al
cristal violeta y va a formar un
complejo que está el violeta yodo el
alcohol es un decolorante y las harinas
se va a utilizar como un colorante de
contraste para poder evidenciar y poder
separar tanto a bacterias gram positivas
como grant negativas
vemos el cristal violeta es un colorante
orgánico sintético y alcalino no va a
recibir diferentes tipos de nombre y se
va a encontrar dentro del grupo de los
colorantes de la rosa milína por otro
lado este cristal violeta va a tener una
intensidad característica y su
intensidad se va a deber a la cantidad
de grupos metilo que presente a mayor
grupos metilo que pueda presentar esta
estructura va a ser más intenso el
cristal violeta presenta 6 grupos metilo
y por lo consiguiente es un azul intenso
también se va a comportar de una manera
muy diferente a los diferentes ph que
pueda estar expuesto siendo presentando
un color amarillo cuando este cristal
violeta se encuentra a ph menor a 1.6 y
un color violeta azulado cuando se
encuentra a un ph mayor a 1.6 entonces
dependiendo de estos factores la
reacción gran es una técnica infalible
ni constante puede variar con el tiempo
del cultivo y el ph del medio y quizás
también por otras causas que vamos a ver
más adelante
durante el desarrollo de esta coloración
se han podido ir dando variaciones y
estas variaciones han permitido poder
estabilizar y mejorar la atención gran
vamos a encontrar diferentes tipos de
autores como hooker nicole en los cuales
se han ido modificando cierto tipo de
componentes de la coloración para poder
estabilizarlo y obtener una coloración
óptima
por otro lado también se mencionan que
hay bacterias que no van a teñirse de
una manera intensa
kopelov indica de que el cambio del
azafrán inah por fuxin a básica permite
de que ciertas bacterias que no se
tenían de una manera intensa pueda
obtener una mejor coloración y puedan
ser visualizadas de una manera más
óptima bajo el microscopio
vemos allí entonces la estructura de la
pared bacteriana que es muy importante
siempre tener en cuenta las bacterias
gram positivas presentan un péptido
blica no y grueso en comparación de las
bacterias gram-negativas que este
pequeño glicanos es delgado y se
encuentra en el espacio peri plasmático
por otro lado también las bacterias
gram-negativas presentan una membrana
externa entonces esta composición va
ser parte del fundamento de la
coloración gran
vemos acá la composición del
peptidoglicano que está formado por
polisacáridos y aminoácidos estos
compuestos presentan diferentes tipos de
cargas que en muchas ocasiones indican
de que están relacionadas con el
fundamento también de esta coloración
vamos a explicar un poco la atención
gran como es que se da el proceso el
cristal violeta penetra en todas las
células bacterianas no discrimina si es
gran positivo inicie el gran negativo
hasta ese momento va a ingresar ambas
bacterias una vez que se ha agregado el
cristal violeta vamos a agregar el lugar
el lugar va solamente ingresar las
bacterias gram positivas y se va a
encontrar con el cristal violeta
formando un complejo cristal violeta
yodo una vez que se encuentra en el
péptido aplica no de esta bacteria se
forma este complejo cristal violeta yodo
el gol por parte de las bacterias
gram-negativas no va a poder pasar por
la membrana externa por lo consiguiente
no va a poder formar el complejo cristal
violeta yodo posteriormente agregamos el
de colorantes el alcohol acetona en el
caso de las gran positivas del alcohol
acetona para deshidratar la pared
celular y por lo consiguiente el
complejo cristal violeta yodo no va
a perderse
a diferencia de las bacterias
gram-negativas en donde nunca se dio la
reacción o el complejo que le salió el
callo dow al momento que agregamos el
decolorante este de aquí va a arrastrar
estos dos compuestos dejando libre a la
bacteria gram negativa para que pueda
recibir lo que es el colorante de
contraste que el azafrán inah entonces
al agregar nosotros en azafrán in a la
bacteria gram negativa adquiere este
colorante mientras que la bacteria gram
positiva al estar formada el complejo
cristal bélgica yodo no va a poder
adquirirlo a lavar nosotros con agua
vamos a eliminar el exceso de este
colorante y vamos a observar al
microscopio bacterias gram positivas
aquellas que han podido retener el
complejo cristal violeta yodo y
bacterias gram-negativas aquellas que no
han podido detener el complejo cristal
violeta yodo
y se han teñido con la zafra ni na
entonces es muy importante poder
entender eso y poder saber de qué dentro
de los colorantes la formación del
complejo que salve el callo de yodo es
muy importante así como también la
presencia de la del publicano como como
componente de la pared celular una
pregunta que nos podemos hacer siempre
una bacteria gram positiva es gran
positiva va a haber un cambio en ciertas
condiciones que se pueden encontrar esta
bacteria dentro de los más importantes
tenemos si cuando una bacteria presenta
una pared celular dañada o que no es
estable ésta no va a permitir poder
retener el complejo cristal violeta yodo
y por ende posteriormente se va a
decolorar se va a perder este complejo
con el decolorante y va a poder aceptar
lo que es el colorante de contraste que
el azafrán inah justo donde pasa pasa en
cultivos viejos en los cuales se han
tenido cultivos de más de 72 horas por
otro lado la reacción de granma es
infalible ni constante como mencionamos
en su momento y puede estar alterada por
el ph del medio en el cual se encuentra
la bacteria
entonces hay muchas posibilidades de que
una bacteria que sea gran positiva voy a
dejar de ser gran positiva y volverse
gran negativa
y sabemos que la coloración gran vamos a
ver un poco que nosotros hemos podido
aprender durante nuestro desarrollo
académico no conocemos que cuando se
agrega cristal violeta se genera una
interacción química con los componentes
de la pared celular esto se da por la
interacción de cargas que se pueda tener
al agregar el lugo el que es permeable
en las bacterias gram positivas al no
haber una membrana externa el gol puede
interactuar con el cristal violeta y no
en las granjas al haber al haber una
membrana externa ese lugar no es
permeable y por lo consiguiente no va a
poder ingresar y formar el complejo se
formará un complejo que estabiliza yodo
el cual ayudará a poder mantener las
interacciones con los componentes de la
pared para agregar el decolorante esta
deshidrata la pared celular evitando que
escape el complejo cristal violeta yodo
en las gran positivas y disuelve los
lípidos decolorado decolorando así
aquellas bacterias que presentan gran
cantidad de lípidos en el caso de las
granjas entonces estamos viendo un poco
lo importante que es la formación del
complejo cristal
el violeta yodo
van a haber varias teorías que van a
poder explicar cómo es que se da el
fundamento de la atención gran que que
participa qué interacciones participa
dentro de este de esta atención para
poder observar nosotros bacterias gram
positivas y bacterias gram-negativas
teorías menciona que por interacciones
químicas entre las proteínas y los
colorantes claro vemos que las proteínas
tienen una carga específica en las
cuales van a poder comportarse
dependiendo a la solución en la cual se
encuentren por lo consiguiente van a
poder interactuar las proteínas y los
aminoácidos son compuestos en foteros
quiere decir que ellos se van a
comportar dependiendo a la solución en
la cual se encuentre al medio en el cual
se encuentre si se encuentra en un medio
ácido van a interactuar con compuestos
ácidos si se encuentran en un medio
básico van a interactuar con compuestos
básicos poder alcanzar el punto hizo
eléctrico en la pared celular es
complicado ya que se va a tener
diferentes tipos de proteínas por lo
consiguiente se define que va a haber
una gama de escalas de ph que van a
estar van a comprender este punto es
eléctrico
vemos que los microorganismos gran
positivos tienen una escala iso
eléctrica de ph inferior a los de los
granos y se puede concluir lo siguiente
que los microorganismos gran positivos
pueden hacer se crean negativos al
aumentar la acidez los gran negativos
pueden hacerse gran positivos también al
aumentar la alcalinidad entonces quiere
decir esto que la variación de ph va a
generar también un cambio de gran
positivo a gran negativo son teorías no
estamos mencionando que esto se pueda
cumplir los microorganismos de reacción
positiva los colorantes ácidos pueden
hacer gran negativos por aumentar la
calidad y los microorganismos de
reacción positiva a los colorantes
básicos pueden hacerse gran negativos
por aumentar la acidez entonces esto es
muy importante poder tener en cuenta
cómo puede influir el ph en que una
bacteria gram positiva se vuelva gran
negativa
vemos acá que la pared celular de los
microorganismos gran positivos y
negativos son permeables al cristal
violeta exactamente los dos ingresan
verdad sin embargo la de los primeros no
lo es al complejo de yodo y colorante
formando en el interior del acceso de la
célula que sucede acá en el primer caso
el cristal violeta va a poder ingresar
una vez que ha ingresado el cristal
violeta a la pared celular
posteriormente se agrega el lugar en
lugo él va a poder ingresar a la
bacteria gram positiva pero no va a
poder ingresar a la bacteria gram
negativa por lo consiguiente cuando
utilizamos un decolorante este de allí
no se va a retirar de la gran positiva
como mencioné el enunciado que las
bacterias gram positivo no son
permeables al complejo que está el
violeta yodo por otro lado los
resultados experimentales obtenidos con
la con una difusión celular
que no presenta proteínas y la
escalabilidad del complejo de yodo
cristal violeta en alcohol y acetona
parece sustentar
opinión que la reacción de gran positiva
consiste esencialmente en la formación
dentro de la célula de una cantidad
apreciable de complejo cristal violeta
yodo común siendo difícil de eliminar
con el disolvente entonces en un momento
se pensaba de que las proteínas no y la
interacción que se debe ante cristal
violeta yodo y la proteína era la base
del fundamento de esta coloración se
hicieron estudios en los cuales estaban
libres de proteínas y se pudieron dar
cuenta de que las proteínas no
participaban en esa interacción igual
las bacterias se seguían coloreando de
de violeta con la coloración grande
entonces pudieron inferir de allí de que
la importancia del cristal violeta yodo
de ese complejo y de su de la falta de
permeabilidad con el alcohol acetona
como decolorante es una base muy
importante para el fundamento de la
coloración grave
investigadores mencionan o han sostenido
que la permeabilidad de la pared celular
al violeta cristal la escasa solubilidad
del complejo yodo y colorante no en
alcohol acetona y el libre acceso del
disolvente al complejo sustituido son
los principales factores que intervienen
en el mecanismo de la coloración
entonces vemos allí que se deja de lado
mucho lo que es las cargas de las
proteínas y se establece entre la
comportamiento físico químico y la
naturaleza que puedan tener los
colorantes
vamos a ver factores que influyen en la
atención cultivos viejos de bacterias
hemos mencionado no por una
inestabilidad de la pared celular la
técnica empleada y un mal proceso de la
tinción grande un exceso de tiempo y un
exceso de tiempo en la decoloración no
se deja el tiempo adecuado con esta
violeta entre otros reactivos
inadecuados mal preparados que están
vencidos entre otras cosas que van a
llevar a que a que ese de
una coloración gran y alterada para eso
es muy importante siempre tener
controles que nos van a poder permitir
detectar que nuestra atención gra está
en óptimas condiciones
la utilidad de esta coloración grande
nos va a ayudar a poder separar las
bacterias en dos grupos gran positivas y
gram-negativas distinguir la morfología
bacteriana
cuál es la morfología que presenta este
grupo bacteriano y cuál es su agregación
identificación preliminar en la bacteria
causa la infección y un control de
calidad eso es muy importante poder
tener en cuenta el fundamento
relacionado la tinción gran el proceso
de tinción gran nosotros lo podemos
realizar día a día pero aparte de ese
proceso es saber qué sucede cuando
agregamos es de cristal violeta cuando
agregamos de ese lugar que interacciona
quien es el principal protagonista de
esta coloración blanco como hemos podido
ver acá mucho importa la permeabilidad
que pueda tener el complejo cristal
violeta ante el colorante bajo esos de
allí es que se va a establecer mucho
esta coloración y su fundamento
bueno nos estamos despidiendo entonces
espero que esta pequeña sesión haya sido
de su agrado y podamos haber compartido
parte de la información sin más que
decir nos encontramos en la próxima
sesión muchas gracias
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