T.2 TÉCNICAS DE INMUNODIAGNÓSTICO

Summary

El guion del video explora técnicas de inmunodiagnóstico y la producción de anticuerpos, fundamentales en la inmunología. Se describen los inmunoensayos, la reacción antígeno-anticuerpo y la diferencia entre anticuerpos monoclonales y policlonales. Se explica el proceso de inmunización en animales para obtener estos anticuerpos y cómo se seleccionan y multiplican los clones específicos para producir anticuerpos monoclonales. El script también toca la conjugación de anticuerpos con diversas sustancias para ampliar su uso en técnicas de diagnóstico.

Takeaways

• 🧬 Los inmunoensayos son una técnica fundamental en el laboratorio de inmunología y requieren anticuerpos monoclonales o policlonales.
• 🔍 La reacción antígeno-anticuerpo es esencial para determinar concentraciones de células y puede manifestarse a través de la luz dispersada, turbidez y aglutinación.
• 📚 Se pueden usar técnicas de aglutinación en futuras píldoras para profundizar en su aplicación.
• 🌟 Los anticuerpos pueden combinarse con enzimas, sustancias radioactivas o fluorescentes para ampliar su uso en diferentes técnicas de diagnóstico.
• 🐀 Para obtener anticuerpos monoclonales, se inyecta una suspensión de antígenos en un animal, como un ratón, y se espera una respuesta inmunológica primaria.
• 🐇 Los anticuerpos policlonales se obtienen de animales como los conejos, cabras o ovejas, pero los conejos son los más utilizados.
• 🔬 Después de la inmunización, se realiza una segunda inmunización para obtener una respuesta secundaria más potente y con mayor número de células.
• 💉 Se sangra al animal para analizar la presencia de anticuerpos en la sangre, obteniendo un suero con anticuerpos policlonales.
• 🧬 Para producir anticuerpos monoclonales, se utiliza el bazo del animal, donde se encuentran clones específicos del antígeno de interés.
• 🔬 La fusión de células B con células tumorales, como el mieloma, resulta en hibridomas capaces de producir anticuerpos de manera continua.
• 🧪 Se utiliza la técnica de dilución límite para identificar y cultivar clones de hibridomas que producen anticuerpos específicos del antígeno.
• 🔎 Se realizan inmunoensayos en placas para determinar qué clones de hibridomas producen anticuerpos monoclonales útiles para el diagnóstico.

Q & A

¿Qué es el inmunoensayo y por qué es importante en el laboratorio de inmunología?

El inmunoensayo es una técnica fundamental en el laboratorio de inmunología utilizada para detectar y medir la presencia de antígenos o anticuerpos en muestras biológicas. Es importante porque permite el diagnóstico de enfermedades, la evaluación del estado inmunitario y la investigación de procesos biológicos.

¿Cuáles son las dos principales clases de anticuerpos en el inmunoensayo?

Las dos clases principales de anticuerpos son los monoclonales y los policlonales. Los anticuerpos monoclonales son producidos por una sola línea celular y son específicos para un solo epitopo, mientras que los policlonales son una mezcla de anticuerpos producidos por múltiples células B que reconocen varios epitopos de un antígeno.

¿Cómo se pueden manifestar las reacciones antígeno-anticuerpo en un inmunoensayo?

Las reacciones antígeno-anticuerpo pueden manifestarse a través de propiedades como la capacidad de dispersar la luz, la turbidez en suspensión y la capacidad de precipitar o aglutinar, que son las bases para técnicas de aglutinación que se verán en píldoras futuras.

¿Cómo se combinan los anticuerpos con otras sustancias para ampliar su uso en inmunoensayos?

Los anticuerpos pueden combinarse con enzimas para técnicas de enzimoensayo, con sustancias radioactivas, aunque estas están en desuso, y con sustancias fluorescentes para examinar con microscopios, fluorímetros o citómetros que detectan fluorescencia.

¿Cómo se producen los anticuerpos en el laboratorio?

Para producir anticuerpos en el laboratorio, se inyecta una suspensión de antígenos en un animal, como un ratón para anticuerpos monoclonales o un conejo para anticuerpos policlonales. Se deja que el animal produzca una respuesta inmunológica y luego se sangra para analizar la presencia de anticuerpos en la sangre.

¿Qué es una inmunización primaria y cómo se relaciona con la producción de anticuerpos?

Una inmunización primaria es la primera exposición de un animal a un antígeno, que induce una respuesta inmunológica. Es el primer paso en la producción de anticuerpos, ya que permite que el sistema inmunitario del animal se adapte y comience a producir células B capaces de producir anticuerpos contra el antígeno.

¿Qué es una inmunización secundaria y cómo ayuda a mejorar la producción de anticuerpos?

Una inmunización secundaria es la inyección adicional del mismo antígeno después de la inmunización primaria. Esto induce una respuesta inmunitaria secundaria, que es más potente y produce un mayor número de células B con memoria, lo que resulta en una mayor producción de anticuerpos.

¿Qué son los hibridomas y cómo se relacionan con la producción de anticuerpos monoclonales?

Los hibridomas son células resultantes de la fusión entre células B productoras de anticuerpos y células tumorales de mieloma. Tienen la capacidad de recrecer indefinidamente y producir anticuerpos específicos, lo que es fundamental para la producción de anticuerpos monoclonales.

¿Qué técnica se utiliza para determinar qué hibridomas producen anticuerpos de interés y cuáles no?

La técnica de dilución límite se utiliza para determinar qué hibridomas producen anticuerpos de interés. Se sembran células individuales en placas y se someten a condiciones que permiten solo a las células que se han fusionado con éxito y producen anticuerpos sobrevivir y crecer.

¿Cómo se obtienen anticuerpos monoclonales a gran escala y cuál es su uso principal?

Se pueden obtener anticuerpos monoclonales a gran escala a través de la cultivo de hibridomas en incubadores o reinyectándolos en animales para que se produzcan en el líquido ascítico. Estos anticuerpos se utilizan en técnicas diagnósticas precisas debido a su alta especificidad.

¿Por qué es necesario conjugar los anticuerpos con enzimas, sustancias fluorescentes o radioactivas para algunas técnicas diagnósticas?

La conjugación de anticuerpos con enzimas, sustancias fluorescentes o radioactivas amplía su utilidad en técnicas diagnósticas, permitiendo la detección y medición de la presencia de antígenos a través de señales visuales o cuantitativas, como la fluorescencia o la actividad enzimal.

¿Cuáles son algunas de las preguntas que se podrían hacer para evaluar el conocimiento sobre los anticuerpos y las técnicas de inmunoensayo?

Algunas preguntas de evaluación podrían ser: ¿Es mejor usar anticuerpos monoclonales o policlonales para técnicas de aglutinación y precipitación? ¿Qué anticuerpos se utilizan para técnicas de inmunofluorescencia? ¿En qué animales se producen los anticuerpos policlonales y monoclonales? ¿Cuántas inmunizaciones se necesitan para obtener anticuerpos? ¿Se obtienen los anticuerpos monoclonales del bazo del animal? ¿Sirven los anticuerpos monoclonales obtenidos en animales para todas las técnicas sin más modificaciones?