T.2 TÉCNICAS DE INMUNODIAGNÓSTICO

UVa_Online

21 Oct 201308:19

Summary

TLDREl guion del video explora técnicas de inmunodiagnóstico y la producción de anticuerpos, fundamentales en la inmunología. Se describen los inmunoensayos, la reacción antígeno-anticuerpo y la diferencia entre anticuerpos monoclonales y policlonales. Se explica el proceso de inmunización en animales para obtener estos anticuerpos y cómo se seleccionan y multiplican los clones específicos para producir anticuerpos monoclonales. El script también toca la conjugación de anticuerpos con diversas sustancias para ampliar su uso en técnicas de diagnóstico.

Takeaways

🧬 Los inmunoensayos son una técnica fundamental en el laboratorio de inmunología y requieren anticuerpos monoclonales o policlonales.
🔍 La reacción antígeno-anticuerpo es esencial para determinar concentraciones de células y puede manifestarse a través de la luz dispersada, turbidez y aglutinación.
📚 Se pueden usar técnicas de aglutinación en futuras píldoras para profundizar en su aplicación.
🌟 Los anticuerpos pueden combinarse con enzimas, sustancias radioactivas o fluorescentes para ampliar su uso en diferentes técnicas de diagnóstico.
🐀 Para obtener anticuerpos monoclonales, se inyecta una suspensión de antígenos en un animal, como un ratón, y se espera una respuesta inmunológica primaria.
🐇 Los anticuerpos policlonales se obtienen de animales como los conejos, cabras o ovejas, pero los conejos son los más utilizados.
🔬 Después de la inmunización, se realiza una segunda inmunización para obtener una respuesta secundaria más potente y con mayor número de células.
💉 Se sangra al animal para analizar la presencia de anticuerpos en la sangre, obteniendo un suero con anticuerpos policlonales.
🧬 Para producir anticuerpos monoclonales, se utiliza el bazo del animal, donde se encuentran clones específicos del antígeno de interés.
🔬 La fusión de células B con células tumorales, como el mieloma, resulta en hibridomas capaces de producir anticuerpos de manera continua.
🧪 Se utiliza la técnica de dilución límite para identificar y cultivar clones de hibridomas que producen anticuerpos específicos del antígeno.
🔎 Se realizan inmunoensayos en placas para determinar qué clones de hibridomas producen anticuerpos monoclonales útiles para el diagnóstico.

Q & A

¿Qué es el inmunoensayo y por qué es importante en el laboratorio de inmunología?
-El inmunoensayo es una técnica fundamental en el laboratorio de inmunología utilizada para detectar y medir la presencia de antígenos o anticuerpos en muestras biológicas. Es importante porque permite el diagnóstico de enfermedades, la evaluación del estado inmunitario y la investigación de procesos biológicos.
¿Cuáles son las dos principales clases de anticuerpos en el inmunoensayo?
-Las dos clases principales de anticuerpos son los monoclonales y los policlonales. Los anticuerpos monoclonales son producidos por una sola línea celular y son específicos para un solo epitopo, mientras que los policlonales son una mezcla de anticuerpos producidos por múltiples células B que reconocen varios epitopos de un antígeno.
¿Cómo se pueden manifestar las reacciones antígeno-anticuerpo en un inmunoensayo?
-Las reacciones antígeno-anticuerpo pueden manifestarse a través de propiedades como la capacidad de dispersar la luz, la turbidez en suspensión y la capacidad de precipitar o aglutinar, que son las bases para técnicas de aglutinación que se verán en píldoras futuras.
¿Cómo se combinan los anticuerpos con otras sustancias para ampliar su uso en inmunoensayos?
-Los anticuerpos pueden combinarse con enzimas para técnicas de enzimoensayo, con sustancias radioactivas, aunque estas están en desuso, y con sustancias fluorescentes para examinar con microscopios, fluorímetros o citómetros que detectan fluorescencia.
¿Cómo se producen los anticuerpos en el laboratorio?
-Para producir anticuerpos en el laboratorio, se inyecta una suspensión de antígenos en un animal, como un ratón para anticuerpos monoclonales o un conejo para anticuerpos policlonales. Se deja que el animal produzca una respuesta inmunológica y luego se sangra para analizar la presencia de anticuerpos en la sangre.
¿Qué es una inmunización primaria y cómo se relaciona con la producción de anticuerpos?
-Una inmunización primaria es la primera exposición de un animal a un antígeno, que induce una respuesta inmunológica. Es el primer paso en la producción de anticuerpos, ya que permite que el sistema inmunitario del animal se adapte y comience a producir células B capaces de producir anticuerpos contra el antígeno.
¿Qué es una inmunización secundaria y cómo ayuda a mejorar la producción de anticuerpos?
-Una inmunización secundaria es la inyección adicional del mismo antígeno después de la inmunización primaria. Esto induce una respuesta inmunitaria secundaria, que es más potente y produce un mayor número de células B con memoria, lo que resulta en una mayor producción de anticuerpos.
¿Qué son los hibridomas y cómo se relacionan con la producción de anticuerpos monoclonales?
-Los hibridomas son células resultantes de la fusión entre células B productoras de anticuerpos y células tumorales de mieloma. Tienen la capacidad de recrecer indefinidamente y producir anticuerpos específicos, lo que es fundamental para la producción de anticuerpos monoclonales.
¿Qué técnica se utiliza para determinar qué hibridomas producen anticuerpos de interés y cuáles no?
-La técnica de dilución límite se utiliza para determinar qué hibridomas producen anticuerpos de interés. Se sembran células individuales en placas y se someten a condiciones que permiten solo a las células que se han fusionado con éxito y producen anticuerpos sobrevivir y crecer.
¿Cómo se obtienen anticuerpos monoclonales a gran escala y cuál es su uso principal?
-Se pueden obtener anticuerpos monoclonales a gran escala a través de la cultivo de hibridomas en incubadores o reinyectándolos en animales para que se produzcan en el líquido ascítico. Estos anticuerpos se utilizan en técnicas diagnósticas precisas debido a su alta especificidad.
¿Por qué es necesario conjugar los anticuerpos con enzimas, sustancias fluorescentes o radioactivas para algunas técnicas diagnósticas?
-La conjugación de anticuerpos con enzimas, sustancias fluorescentes o radioactivas amplía su utilidad en técnicas diagnósticas, permitiendo la detección y medición de la presencia de antígenos a través de señales visuales o cuantitativas, como la fluorescencia o la actividad enzimal.
¿Cuáles son algunas de las preguntas que se podrían hacer para evaluar el conocimiento sobre los anticuerpos y las técnicas de inmunoensayo?
-Algunas preguntas de evaluación podrían ser: ¿Es mejor usar anticuerpos monoclonales o policlonales para técnicas de aglutinación y precipitación? ¿Qué anticuerpos se utilizan para técnicas de inmunofluorescencia? ¿En qué animales se producen los anticuerpos policlonales y monoclonales? ¿Cuántas inmunizaciones se necesitan para obtener anticuerpos? ¿Se obtienen los anticuerpos monoclonales del bazo del animal? ¿Sirven los anticuerpos monoclonales obtenidos en animales para todas las técnicas sin más modificaciones?

Outlines

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🧬 Introducción a las técnicas de inmunodiagnóstico y anticuerpos

El primer párrafo introduce las técnicas de inmunodiagnóstico y la importancia de los anticuerpos monoclonales y policlonales en el laboratorio de inmunología. Se describe la reacción antígeno-anticuerpo y cómo se puede utilizar para determinar concentraciones de células a través de su capacidad para dispersar la luz, causar turbidez o aglutinar. Además, se menciona la posibilidad de combinar anticuerpos con enzimas, sustancias radioactivas o fluorescentes para ampliar su uso en diferentes técnicas de inmunoensayo. Finalmente, se presenta el proceso de producción de anticuerpos en el laboratorio, incluyendo la inyección de antígenos en animales y el uso de ratones para anticuerpos monoclonales y conejos para policlonales, así como los pasos para obtener una respuesta inmunológica primaria y secundaria.

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🔬 Producción de anticuerpos monoclonales y policlonales

El segundo párrafo se centra en el proceso detallado de producción de anticuerpos monoclonales y policlonales. Se explica cómo se realiza la inmunización del animal, la obtención de sangre y su análisis para detectar anticuerpos, y la diferencia entre anticuerpos policlonales y monoclonales. Se describe el proceso de fusión de células B con células tumorales para crear hibridomas capaces de producir anticuerpos de manera continua. Seguidamente, se discute la técnica de dilución límite para identificar clones específicos que producen anticuerpos de interés y cómo se cultivan estos clones para obtener grandes cantidades de anticuerpos. Además, se menciona la posibilidad de conjugar los anticuerpos con otras sustancias para su uso en técnicas diagnósticas específicas y se presentan preguntas para evaluar el conocimiento del espectador sobre los temas tratados.

Mindmap

Keywords

💡Inmunodiagnóstico

El inmunodiagnóstico se refiere a la técnica de diagnóstico de enfermedades mediante la detección de antígenos o anticuerpos en la sangre o tejidos. Es una parte fundamental del video, ya que se centra en cómo se obtienen los anticuerpos, que son herramientas esenciales para este tipo de diagnóstico.

💡Anticuerpos monoclonales/policlonales

Los anticuerpos monoclonales son anticuerpos que provienen de una sola celda B y, por lo tanto, reconocen un solo epitopo del antígeno. Los anticuerpos policlonales, en cambio, son una mezcla de anticuerpos producidos por múltiples células B que reconocen diferentes epitopos de un mismo antígeno. El video explica cómo se producen ambos tipos de anticuerpos y su importancia en los inmunoensayos.

💡Inmunoensayo

El inmunoensayo es un método de laboratorio que utiliza la reacción entre antígenos y anticuerpos para determinar la presencia y cantidad de un antígeno específico. Es una técnica central en el tema del video y se utiliza para ilustrar cómo se aplican los anticuerpos en el diagnóstico.

💡Reacción antígeno-anticuerpo

La reacción antígeno-anticuerpo es el proceso por el cual un antígeno induce la producción de anticuerpos en el organismo. Esta reacción es clave en los inmunoensayos y se menciona en el video como la base para la detección y medición de concentraciones de células o antígenos.

💡Técnicas de aglutinación

Las técnicas de aglutinación son métodos que utilizan la propiedad de los anticuerpos para agrupar partícules o células con antígenos en su superficie. El video menciona que estas técnicas se verán en 'píldoras siguientes', lo que indica su relevancia en el diagnóstico inmunológico.

💡Enzimoensayo

El enzimoensayo es una técnica que combina anticuerpos con enzimas para amplificar la señal de detección de un antígeno. En el video, se menciona como una de las formas en que se pueden conjugar anticuerpos para ampliar su uso en el diagnóstico.

💡Hibrodomas

Los hibridomas son células resultantes de la fusión entre células B productoras de anticuerpos y células tumorales de mieloma. El video describe cómo se producen los hibridomas y su importancia en la producción de anticuerpos monoclonales.

💡Técnica de dilución límite

La técnica de dilución límite es un método utilizado para identificar y aislar clones de células B productoras de anticuerpos específicos. El video menciona esta técnica como un paso crítico para obtener clones de hibridomas que producen anticuerpos monoclonales.

💡Inmunización

La inmunización es el proceso de estimular el sistema inmunitario de un organismo mediante la inyección de un antígeno. En el video, se describe cómo se inmuniza a los animales para producir anticuerpos, primero con una inmunización primaria y luego con una secundaria para obtener una respuesta de memoria.

💡Inmunofluorescencia

La inmunofluorescencia es una técnica que utiliza anticuerpos conjugados con fluorescencias para detectar antígenos en tejidos o células. Aunque no se explica detalladamente en el video, se menciona como una de las técnicas que podrían utilizar anticuerpos producidos por los métodos descritos.

💡Conjugación

La conjugación es el proceso de unir anticuerpos con otras sustancias, como enzimas, sustancias fluorescentes o radioactivas, para mejorar su detección en inmunoensayos. El video menciona la conjugación como un paso necesario para adaptar anticuerpos a diferentes técnicas de diagnóstico.

Highlights

Profundización en técnicas de inmunodiagnóstico y herramientas clave: los anticuerpos.

Importancia del inmunoensayo en el laboratorio de inmunología.

Diferenciación entre anticuerpos monoclonales y policlonales.

Recordatorio de la reacción antígeno-anticuerpo y sus aplicaciones.

Características de las redes en la reacción antígeno-anticuerpo: dispersión de luz, turbidez y aglutinación.

Amplificación de la utilidad de anticuerpos mediante su combinación con enzimas, sustancias radioactivas y fluorescentes.

Proceso de producción de anticuerpos en el laboratorio a través de inyecciones en animales.

Selección de animales (ratón para monoclonales, conejo para policlonales) para la producción de anticuerpos.

Preparación e inyección de una suspensión de antígenos para inducir una respuesta inmunológica primaria.

Segunda inmunización para obtener una respuesta secundaria de memoria más potente.

Análisis sanguíneo para detectar presencia de anticuerpos y obtención de suero con anticuerpos policlonales.

Proceso para obtener anticuerpos monoclonales a través de la obtención del bazo del animal.

Fusión de células B con células tumorales (mieloma) para crear hibridomas capaces de producir anticuerpos.

Selección de hibridomas a través de técnicas de dilución límite y cultivo en condiciones específicas.

Identificación de clones productivos de anticuerpos monoclonales mediante inmunoensayos.

Métodos para obtener anticuerpos en grandes cantidades: cultivo de hibridomas y reinyección en animales.

Conjugación de anticuerpos para su uso en técnicas diagnósticas avanzadas.

Preguntas finales para evaluar el conocimiento sobre anticuerpos y técnicas de inmunodiagnóstico.