Fijación del Complemento

Facultad de Veterinaria Universidad de Zaragoza España

10 Apr 201816:14

Summary

TLDRLa profesora titular de enfermedades infecciosas, Mari Carmen Simón, de la Facultad de Veterinaria de Zaragoza, explica la técnica de fijación del complemento, un método altamente sensible y económico que forma parte del sistema defensivo contra agresiones externas en animales y humanos. Basado en las propiedades del complemento, este componente del suero se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos en sueros, mediante la unión a complejos inmunes, la lisis de membranas celulares y la destrucción por calor. La técnica requiere la inactivación del complemento natural en el suero a 56 grados centígrados, la titulación del complemento con suero de cobayo y la realización de una serie de diluciones y incubaciones. La reacción se lee mediante un espejo, y la presencia de hemólisis indica la presencia de anticuerpos. Los sueros con poder anticomplementario y el fenómeno de zona son también discutidos, así como su aplicación en la brucelosis, donde los animales con títulos iguales o superiores a 18 son considerados positivos.

Takeaways

🎓 Mari Carmen Simón es profesora titular de enfermedades infecciosas en la facultad de veterinaria de Zaragoza.
🧬 La técnica de fijación del complemento se basa en las propiedades del complemento, un componente del suero en animales y humanos.
🔍 El complemento tiene tres cualidades clave: unión a complejos inmunes, lisado de membranas celulares y sensibilidad a la temperatura.
🌡️ El complemento puede ser inactivado a 56 grados centígrados durante media hora para evitar falsos negativos en la prueba.
⚖️ La prueba de fijación del complemento es sensible, no requiere materiales costosos y permite analizar múltiples muestras.
🧴 El suero extraído se inactiva en un baño de agua a 56 grados centígrados para 30 a 40 minutos antes de la prueba.
🐑 El complemento para la prueba proviene del suero de cobayos, que se obtiene mediante punción intracardíaca.
📊 La titulación del complemento se hace mediante una serie de diluciones del suero de cobayo en diferentes concentraciones.
🧪 La técnica comienza con la dilución seriada del suero y la adición del antígeno, dejando algunos sin antígeno para control.
🧫 La mezcla hemolítica se forma con íes de cordero y anticuerpos antiem de carnero, y se incuba a 37 grados centígrados o a 4 grados centígrados.
🔍 La lectura de la prueba se realiza tras la incubación, observando la hemólisis para determinar la presencia de anticuerpos.
🐾 En la fijación del complemento aplicada a la brucelosis, los animales con títulos iguales o superiores a 18 son considerados positivos.

Q & A

¿Quién es la narradora de la transcripción?
-La narradora de la transcripción es Mari Carmen Simón, profesora titular de enfermedades infecciosas en la facultad de veterinaria de Zaragoza.
¿Qué es la técnica de fijación del complemento?
-La técnica de fijación del complemento es un método que se basa en las propiedades del complemento, un componente normal del suero de los animales y del hombre que forma parte del sistema defensivo ante agresiones externas.
¿Cuáles son las tres cualidades del complemento que se utilizan en la técnica de fijación del complemento?
-Las tres cualidades son: su capacidad de unirse a los complejos inmunes antígeno-anticuerpo, su capacidad de lysar la membrana celular del componente antígeno del complejo inmune si este es una célula, y su carácter proteico que es termolábil y puede ser destruido a altas temperaturas.
¿Por qué se inactiva el suero a 56 grados centígrados durante 30 o 40 minutos?
-Se inactiva el suero a esa temperatura y tiempo para destruir el complemento presente en el suero natural, lo que podría enmascarar la reacción y dar lugar a falsos negativos.
¿Qué es el suero de cobayo y cómo se obtiene?
-El suero de cobayo es el suero utilizado en la prueba de fijación del complemento. Se obtiene anestesiando al cobayo con ether y realizando una punción intracardíaca para extraer la sangre.
¿Cómo se realiza la titulación del complemento?
-La titulación del complemento se realiza mediante dilución Ada del suero de cobayo en el diluyente colmer a concentraciones decrecientes, desde 1/1 a 1/50 a un es a 1/400, y se enfrenta con volúmenes iguales de mezcla hemolítica incubada a 37 grados centígrados durante 30 minutos.
¿Qué es la mezcla hemolítica y cómo se prepara?
-La mezcla hemolítica está formada por íes de cordero lavados y suspendidos en una proporción del 2% enmer. La hemolisina son anticuerpos antiemátocitos de carnero obtenidos en conejo, diluidos a su concentración óptima. Se forma por un volumen de la suspensión de hematíes y un volumen de hemolisina, que se adiciona a cada pocillo.
¿Cómo se realizan las incubaciones en la técnica de fijación del complemento?
-La incubación puede realizarse en caliente a 37 grados centígrados durante 45 minutos o en frío a 4 grados centígrados durante 24 horas.
¿Cómo se realiza la lectura de los resultados de la prueba de fijación del complemento?
-La lectura se realiza en el reverso de la placa mediante un espejo. Si aparece hemólisis, la reacción es negativa y no hay anticuerpos. Si no hay hemólisis, aparece un pequeño botón de color rojo en el fondo del pocillo, lo que se interpreta como presencia de anticuerpos y la reacción es positiva.
¿Cuál es el título considerado para los animales afectados por brucelosis en la técnica de fijación del complemento?
-Se consideran positivos los animales que presentan títulos iguales o superiores a 1/18 en la técnica de fijación del complemento aplicada a la brucelosis.
¿Qué son los sueros con poder anticomerciales y cómo se detectan?
-Los sueros con poder anticomerciales son aquellos que presentan una cierta frecuencia en animales como búfalos, ovinos y cánidos. Se detectan en sueros muy positivos en las direcciones más bajas, donde presentan hemólisis, mientras que en las direcciones más elevadas se observa una reacción positiva normal.
¿Por qué se realizan las diluciones seriadas del suero en la técnica de fijación del complemento?
-Las diluciones seriadas del suero se realizan para determinar la concentración óptima del suero que presenta una reacción positiva en la prueba, lo que permite identificar la presencia de anticuerpos en muestras de suero sin requerir un material especialmente costoso.