Restriktionsenzyme [sticky ends; blunt ends]- Grundlagen der Gentechnik [Biologie, Oberstufe] [2/7]

TeacherToby
18 Aug 202109:01

Summary

TLDRDieses Video erklärt die Funktion von Restriktionsenzymen in der Gentechnik, die DNA-Moleküle schneiden und so neue Kombinationen erstellen. Es verdeutlicht, wie diese Enzyme spezifische Sequenzen erkennen und an ihnen schneiden, um DNA-Fragmente zu erzeugen, die dann mit anderen DNA-Fragmenten verbunden werden können. Zusätzlich wird die Rolle von DNA-Ligasen bei der Verbindung von DNA-Fragmenten und die Notwendigkeit, rekombinante DNA in lebende Zellen zu übertragen, um biologische Aktivität zu gewährleisten, erläutert. Das Video bietet auch Einblicke in die natürliche Funktion von Restriktionsenzymen in Bakterien, um Viren abzuwehren, und wie diese Mechanismen für die Gentechnik genutzt werden können.

Takeaways

  • 🧬 Restriction enzymes are crucial tools in genetic engineering, enabling the cutting of DNA molecules into smaller fragments.
  • 🔍 These enzymes recognize specific DNA sequences, known as palindromes, that can be read the same way forwards and backwards.
  • ✂️ Restriction enzymes cut DNA at specific recognition sites, often resulting in either blunt or sticky ends, which are essential for recombination.
  • 🔬 DNA ligases play a significant role in recombinant DNA technology by catalyzing the joining of DNA fragments, akin to their role in DNA replication.
  • 🧪 The process of creating recombinant DNA often aims to produce many identical copies of a gene, which can be useful for various biological applications.
  • 🏥 In medicine, recombinant DNA technology can be used to treat diseases where a vital protein, produced by a defective gene, is not available in sufficient quantities.
  • 🐄 An example of practical application is the creation of transgenic cows that produce human growth hormone in their milk, showcasing the potential of gene technology.
  • 🔄 Vectors, such as plasmids, are essential for transferring recombinant DNA into a host organism or cell, facilitating the expression of the inserted gene.
  • 🛡️ Bacteria possess restriction enzymes as a defense mechanism against bacteriophages, which are viruses that inject their DNA into bacterial cells.
  • 🔒 Bacterial DNA is protected from being cut by their own restriction enzymes due to methylation at specific sites, which prevents enzyme binding.

Q & A

  • Was ist das Hauptthema des Videos?

    -Das Video behandelt Restriktionsenzyme und ihre Rolle in der Gentechnik, insbesondere wie sie zur Erzeugung von rekombinanter DNA verwendet werden.

  • Wie funktionieren Restriktionsenzyme in der Gentechnik?

    -Restriktionsenzyme erkennen spezifische palindromische DNA-Sequenzen und schneiden die DNA an diesen Stellen, was es ermöglicht, DNA in kleinere Fragmente zu zerteilen und rekombinante DNA zu erzeugen.

  • Was sind palindromische DNA-Sequenzen?

    -Palindromische DNA-Sequenzen sind solche, die in beide Richtungen gleich gelesen werden können, wie die Wörter 'Anna' oder 'Otto'. Diese Sequenzen werden von Restriktionsenzymen erkannt und geschnitten.

  • Wie unterscheiden sich glatte Enden von klebrigen Enden beim Schneiden der DNA?

    -Glatte Enden entstehen, wenn Restriktionsenzyme die DNA genau in der Mitte der Erkennungssequenz schneiden. Klebrige Enden entstehen, wenn die Schnitte an verschiedenen Stellen auf den beiden DNA-Strängen erfolgen, was zu überlappenden, komplementären Enden führt.

  • Was ist rekombinante DNA?

    -Rekombinante DNA ist neu kombinierte DNA, die aus Fragmenten unterschiedlicher Herkunft, z.B. von verschiedenen Organismen, zusammengesetzt wird. Diese DNA kann dann in Wirtszellen eingeschleust werden.

  • Welche Rolle spielt die DNA-Ligase in der Gentechnik?

    -DNA-Ligase ist ein Enzym, das DNA-Fragmente verbindet, indem es die Phosphodiesterbindungen zwischen den Basen der DNA-Stränge katalysiert. Es spielt eine wichtige Rolle bei der Herstellung rekombinanter DNA.

  • Warum ist die Herstellung rekombinanter DNA wichtig?

    -Rekombinante DNA wird hergestellt, um Gene zu klonen, z.B. um bestimmte Proteine in großer Menge zu synthetisieren, die für therapeutische Zwecke genutzt werden können, wie z.B. das menschliche Wachstumshormon.

  • Wie verhindern Bakterien, dass ihre eigenen Restriktionsenzyme ihre DNA zerstören?

    -Bakterien schützen ihre eigene DNA durch Methylierung der Erkennungssequenzen, sodass die Restriktionsenzyme nicht an ihre DNA binden und sie zerschneiden können.

  • Welche Rolle spielen Vektoren in der Gentechnik?

    -Vektoren wie Plasmide und Viren dienen als Transportmoleküle, die rekombinante DNA in eine Wirtszelle einschleusen, wo sie repliziert und transkribiert wird.

  • Warum sind Viren als Vektoren in der Gentechnik interessant?

    -Viren können auf natürliche Weise Zellen infizieren und ihre DNA einschleusen. Dies bietet einen Vorteil gegenüber Plasmiden, da keine zusätzlichen Maßnahmen erforderlich sind, um sie in die Wirtszellen zu bringen.

Outlines

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🧬 Gentechnik und Restriktionsenzyme

Dieses Video beschäftigt sich mit der Gentechnik, einem Bereich der Biotechnologie, der sich mit Methoden und Verfahren beschäftigt, um das Erbgut von Organismen gezielt zu verändern. Es erklärt, wie DNA-Moleküle in kleinere Fragmente geschnitten werden, wie diese Fragmente rekombiniert werden und wie sie in Wirtsorganismen oder -zellen eingefügt werden. Es wird auf die Rolle von Restriktionsenzymen eingegangen, die spezifische DNA-Sequenzen erkennen und schneiden, um rekombinante DNA herzustellen. Diese Enzyme sind in Bakterien natürlich vorkommend und sind essentiell für die Herstellung von rekombinanten DNA-Molekülen.

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🐄 Anwendungen der Gentechnik in der Medizin

Der zweite Absatz des Videos konzentriert sich auf die Anwendung der Gentechnik in der Medizin, insbesondere zur Therapie von Krankheiten, bei denen betroffene Proteine aufgrund eines defekten Gens nicht in ausreichender Menge produziert werden. Es wird erläutert, wie man mithilfe der Gentechnik Proteine in Bakterien produzieren kann, die für die Behandlung dieser Krankheiten nützlich sind. Ein Beispiel dafür ist die Herstellung des menschlichen Wachstumshormons, das in der Vergangenheit aus der Hypophyse von Tieren isoliert wurde. Heute kann dieses Hormon durch transgene Kühe in ihrer Milch produziert werden. Der Absatz erklärt auch, wie rekombinante DNA in lebende Zellen eingefügt wird, um die DNA zu replizieren und die genetische Information zu transkribieren, um Proteinprodukte herzustellen. Der Einsatz von Transportmolekülen, sogenannten Vektoren, wird ebenfalls behandelt, die für das Eindringen der DNA in die Zelle notwendig sind.

Mindmap

Keywords

💡Gentechnik

Gentechnik bezeichnet die Sammlung von Methoden und Verfahren, mit denen das Erbgut von Organismen, also ihre DNA, gezielt verändert werden kann. Im Video wird Gentechnik als das Hauptthema dargestellt, das sich mit der künstlichen Veränderung von DNA befasst. Beispielsweise wird beschrieben, wie Teile des Erbguts eines Organismus mit Hilfe eines Transportmoleküls, eines sogenannten Vektors, auf einen anderen Organismus übertragen werden können.

💡Rekombinante DNA

Rekombinante DNA ist DNA, die aus verschiedenen Ursprungsquellen kombiniert wurde, um neue Kombinationen zu erzeugen. Im Kontext des Videos wird dies durch das Schneiden und Zusammenfügen von DNA-Fragmenten verschiedener Ursprungs erreicht, was für die Herstellung von Genprodukten oder die Therapie von Krankheiten relevant sein kann.

💡Restriktionssensibilie Enzyme

Restriktionssensibilie Enzyme, auch als Restriction Enzyme bezeichnet, sind molekulare Werkzeuge der Gentechnik, die spezifische DNA-Sequenzen erkennen und an diesen Stellen schneiden können. Im Video wird erklärt, dass diese Enzyme zur Herstellung von DNA-Fragmenten verwendet werden, indem sie die DNA an bestimmten Sequenzen aufspalten.

💡Sticky Ends

Sticky Ends, oder klebrige Enden, beziehen sich auf die überlappenden Basensequenzen, die nach dem Schneiden der DNA mit Restriktionsenzymen entstehen. Diese Enden ermöglichen es, DNA-Fragmente aus verschiedenen Organismen miteinander zu verbinden, was für die Erzeugung rekombinanter DNA wesentlich ist. Im Video wird dies als eine Methode beschrieben, um DNA-Fragmente verschiedener Herkunft zu verbinden.

💡DNA-Ligase

DNA-Ligase ist ein Enzym, das die Verbindung von DNA-Fragmenten katalysiert, ähnlich wie bei der DNA-Replikation. Im Video wird DNA-Ligase als ein weiteres wichtiges Werkzeug in der Gentechnik genannt, das zur Verknöpfung von DNA-Fragmenten beiträgt, um rekombinante DNA zu erzeugen.

💡Vektor

Ein Vektor ist ein Transportmolekül, das verwendet wird, um rekombinante DNA in Wirtszellen zu transportieren. Im Video wird erläutert, dass Vektoren wie Plasmide oder Viren verwendet werden können, um DNA in Wirtsorganismen oder -zellen zu integrieren, um dort repliziert und exprimiert zu werden.

💡Wirtszelle

Eine Wirtszelle, auch als Zielzelle bezeichnet, ist eine lebende Zelle, in die rekombinante DNA eingebracht wird, damit sie die DNA repliziert und die darin enthaltenen Gene exprimiert. Im Video wird die Wirtszelle als Ziel für das Einschleusen von DNA und die Produktion von Genprodukten beschrieben.

💡Methylierung

Methylierung ist ein Prozess, bei dem Methylgruppen an DNA-Basen angebracht werden, um bestimmte Sequenzen zu modifizieren. Im Video wird erklärt, dass bakterielle DNA durch Methylierung geschützt ist, sodass die Restriktionsenzyme sie nicht erkennen und schneiden, während fremde DNA, die nicht methyliert ist, von diesen Enzymen erkannt und geschnitten wird.

💡Bakteriophagen

Bakteriophagen sind Viren, die bakterielle Zellen infizieren, indem sie ihre DNA in die Zelle injizieren. Im Video wird beschrieben, wie Restriktionsenzyme das DNA-Molekül von Bakteriophagen zerschneiden können, um die Infektion zu verhindern. Dies verdeutlicht die natürliche Funktion von Restriktionsenzymen als Abwehrmechanismus gegen Viren.

💡Genprodukte

Genprodukte sind Proteine, die von Genen kodiert und synthetisiert werden. Im Video wird erläutert, dass die Vervielfältigung von bestimmten Genen und deren Produkten in der Medizin eine wichtige Rolle spielt, zum Beispiel bei der Therapie von Krankheiten, bei denen das Proteinprodukt eines defektiven Gens nicht in ausreichender Menge produziert wird.

Highlights

Das Video behandelt das Thema der Restriktion und Enzyme in der Gentechnik.

Gentechnik befasst sich mit Methoden zur gezielten Veränderung des Erbguts von Organismen.

Teile des Erbguts können mit einem Transportmoleküle, einem sogenannten Vector, auf einen anderen Organismus übertragen werden.

DNA-Moleküle werden in kleinere Fragmente geschnitten, um rekombinante DNA zu erzeugen.

Restriktionssensibilie Enzyme sind molekulares Werkzeug der Gentechnik, das rekombinante DNA herstellen lässt.

Diese Enzyme erkennen spezifische DNA-Sequenzen und schneiden an diesen Stellen.

Die Erkennungssequenzen sind palindromisch und können in beide Richtungen gelesen werden.

Restriktionssensibilie Enzyme schneiden DNA an beiden Strängen, um Doppelhelix aufzubrechen.

Es gibt verschiedene Arten von Restriktionsenzymen, die entweder glatte oder klebrige Enden erzeugen.

Klebrige Enden ermöglichen das Verbinden von DNA-Fragmenten durch Wasserstoffbrückenbindungen.

DNA-Fragmente unterschiedlichen Ursprungs können so zu rekombinanter DNA verknüpft werden.

DNA-Ligase ist ein weiteres Enzym, das die Verknöpfung von DNA-Fragmenten katalysiert.

Rekombinante DNA ist oft notwendig, um viele Kopien eines Gens zu erzeugen.

In der Medizin kann die Vervielfältigung von Proteinen, die von biologischem Nutzen sind, zur Therapie von Krankheiten beitragen.

Transgene Kühe wurden erzeugt, die das menschliche Wachstumshormon in ihre Milch ausscheiden.

Rekombinante DNA muss in eine lebende Zelle eingeschleust werden, um repliziert und transkribiert zu werden.

Transportmoleküle, sogenannte Vektoren, sind für das Einschleusen von rekombinanter DNA in Zellen erforderlich.

Plasmide sind häufig verwendete Vektoren, die rekombinante DNA transportieren können.

Bakterien haben Mechanismen, um Restriktionsenzyme nicht an ihre eigene DNA zu binden, indem sie diese methylieren.

Bakteriophagen sind Viren, die DNA in Bakterien injizieren und diese zur Virusherstellung nutzen.

Restriktionsenzyme können das DNA-Molekül von Bakteriophagen zerstören, um Bakterien zu schützen.

Viren können als Vektoren verwendet werden, da sie natürlich zur Infektion von Zellen fähig sind.

Transcripts

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dieses video zum thema restriktion

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enzyme ist eingebettet in eine video

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reihe zum themenfeld gentechnik im

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themenfeld das sich mit methoden und

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verfahren beschäftigt mit denen man das

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in einen geeigneten wirtsorganismus bzw

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in eine wirtszelle in eine zielzelle

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aussehen hier entsprechend aber als

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natürlicherweise in bakterien vor und

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sie sind in der lage spezifische dna

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schneiden genauer gesagt erkennen

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restriktion enzyme paltrow mische

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dna-sequenzen sequenzen mit einer

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spezifischen abfolge von dna basen die

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von vorne nach hinten sowie von hinten

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nach vorne gleich zu lesen sind denkt

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beispielsweise an palme wie anna oder

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otto die auch rückwärts gelesen immer

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noch anhand otto sind das restriktion

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sands eur1 schneidet dna innerhalb der

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abgebildeten spezifische erkennungs

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begrenzt wie ihr sicherlich wisst liegt

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die dna in form eines doppel strangs bzw

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einer doppelhelix also aus zwei einzel

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strengen vor um einzelne dna fragmente

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isolieren zu können ist eine solche

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erkennung sequenz an nur einem der

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beiden einzel strenge wenig hilfreich um

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die dna doppelhelix aufzubrechen und

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später einzelne dna fragmente zu

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erzeugen muss die dna an beiden einzel

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strengen geschnitten werden die tatsache

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dass es sich bei der spezifische

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erkennungs sequenz um eine pandemische

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sequenz handelt die in fünf strich 3

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strich richtung bei beiden einzel

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strengen als

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zu lesen ist gewährleistet dass das

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reaktions enzym entsprechend beide

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einzel strenge erkennen und schneiden

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kann

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restriktion sensi schneiden die dna

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immer zwischen zwei basen innerhalb

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einer spezifischen erkennung sequenz die

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meist vier bis acht basenpaare lang ist

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einige restriktionen zu beschneiden die

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dna genau in der mitte des palent roms

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und erzeugen glatte enden andere

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wiederum so auch das restriktion sun zu

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eins von escherichia coli schneidet die

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beiden dna-stränge an zwei verschiedenen

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stellen durch das versetzte schneiden

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besitzt jedes fragment ein überlappende

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cent die sogenannten klebrigen enden

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oder sticky

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entweder kleben die ursprünglichen enten

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wieder zusammenfügen sich also wieder

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zusammen oder aber und das ist

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entscheidend die sticky and verbinden

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sich über wasserstoffbrücken bindung mit

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den komplementär überhängenden basen

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anderer dna-fragmente zum beispiel mit

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den sticks eines anderen organismus hier

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dargestellt durch die unterschiedliche

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farbe für das dna fragmente des anderen

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organismus dessen basenabfolge zwar

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nicht aufgeführt ist die sich aber

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unterscheidet von der des anderen

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organismus

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auf diese weise lassen sich dna

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fragmente mit unterschiedlichen ursprung

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miteinander verbinden ein fragment

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menschlicher herkunft kann so mit einem

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fragment das von einem bakterium stammt

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verknüpft werden und rekombinante dna

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ärzte neben den restriktionen enzym

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spielt die dna die gase als weiteres

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enzym eine bedeutende rolle bei diesem

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vorgang denn sie katalysiert die

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verknüpfung von dna fragmenten ebenso

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wie sie das schon bei der verdopplung

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der dna der dna replikation macht

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mit diesen werkzeugen restriktion zügen

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und dna die gase sind wissenschaftler in

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der lage dna moleküle aus beliebiger

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quelle zu zerschneiden und neu

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zusammenzufügen warum sollte man dies

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tun ein motiv rekombinante dna

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herzustellen besteht darin ein oft ihr

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liegendes gehen zu clown ihren also

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möglichst viele identische kopien des

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gens zu erzeugen es gibt gene die die

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proteine synthetisieren die von so

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großen biologischen nutzen sind dass man

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diese gene auf eine zielzelle

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transferiert mit dem ziel eine hohe

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anzahl an kopien des gewünschten gehens

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herzustellen man sagt auch dass gegenzug

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lohn ihren die vervielfältigung eines

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bestimmten gens und dessen gen produktes

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spielt in der medizin zur therapie von

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krankheiten bei denen betroffene ein

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lebenswichtiges protein als gen produkt

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infolge eines defekten gens nicht in

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ausreichender menge produzieren könnte

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eine wichtige rolle es gibt zum beispiel

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kinder die das menschliche

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wachstumshormon als protein nur

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unzureichend synthetisieren mit der

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folge dass sie eine geringe körpergröße

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und oft auch andere anomalien aufweisen

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während man die betroffenen früher mit

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genau diesem protein behandelte dass man

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aus dem synthese ort der hypophyse von

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toten isolierte wodurch der bedarf

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natürlich nicht gedeckt werden konnte

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gelang es mit hilfe der gentechnik das

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proteinen bakterien zu produzieren und

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zwar in hoher anzahl

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mittlerweile hat man transgene kühe

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erzeugt die das menschliche

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wachstumshormon in ihre milch sanieren

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also abgeben für sich alleine hat die

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künstlich hergestellte rekombinante dna

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noch keine biologische bedeutung sie

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muss in eine lebende zelle eingeschleust

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werden welche die dna repliziert

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verdoppelt und die genetische

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information

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transkribiert und so gehen produkte

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herstellt für das einschleusen der

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rekombinanten dna in eine lebende zelle

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diese wird auch als wirtszelle oder

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zielzelle bezeichnet wird in der regel

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ein transport molekül sogenannter vector

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benötigt bakterien enthalten kleine dna

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dinge die man als plasmide bezeichnet

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die sich so modifizieren lassen dass sie

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rekombinante dna in zellen hinein

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transportieren häufig sind die zur

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übertragung verwendeten vektoren

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plasmide wobei auch wären diese aufgabe

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übernehmen können auch ein plasmid

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enthält mindestens eine erkennung

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sequenz für restriktion sands immer so

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dass das plasmid einfach geschnitten und

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die fremd dna mitsamt gehen gut

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eingefügt werden kann die frage wie

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genau die neue kombinierte dna mit hilfe

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von vektoren in einen geeigneten

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wirtsorganismus eingeschleust wird das

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gegenstand eines weiteren videos

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abschließend möchte ich noch kurz die

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fragen klären welchen nutzen

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restriktionen enzyme in bakterienzellen

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die sie produzieren haben und warum sie

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nicht die dna dieser bakterienzelle

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schneiden bakterien müssen genau wie

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jedes andere lebewesen über mechanismen

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verfügung mit denen sie feinde abwehren

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können ein feind von bakterien sind

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ihren sogenannten bakteriophagen die die

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viren an greifen indem sie ihre dna in

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die bakterienzelle injizieren und sie zu

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einer fabrik zur herstellung von viren

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verwandelt wodurch die bakterienzelle

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schließlich stirbt restriktion cime

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können das eingeschleuste dna molekül

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der bakteriophagen in kleinere fragmente

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zerschneiden und diese somit unschädlich

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machen neben diesem ausgeklügelten ab

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der mechanismus verfügen bakterien über

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ein ebenso effektiven mechanismus der

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sie davor schützt dass die restriktion

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enzyme nicht die restriktion

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schnittstellen in der eigenen dna

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erkennen diese sind methylierter sei es

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an ihnen sind sogenannte methylgruppen

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ch drei gruppen angeheftet so dass die

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reaktions enzyme nicht binden können

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ganz im gegensatz zu der nicht mit

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alliierten dna der viren die sehr

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zuverlässig erkannt und geschnitten wird

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die eigenschaft von viren zählen auf

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natürliche weise zu infizieren indem sie

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ihre dna in diese injizieren macht sie

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übrigens interessant für die nutzung als

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vektoren und bietet einen entscheidenden

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vorteil gegenüber plasmide als vektoren

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im gegensatz zu plasmide sind bei viren

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keine künstlichen maßnahmen erforderlich

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um sie in eine wirtszelle zu schleusen

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[Musik]

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