Cinética Enzimática | Diagrama de Lineweaver-Burk | Ejemplo

WissenSync

26 Jan 201803:51

Summary

TLDREn este video se analiza la cinética de una enzima mediante la ecuación de Lineweaver-Burk. Se comienza midiendo la velocidad inicial a distintas concentraciones de sustrato, para luego calcular los valores inversos y graficar los datos. A partir de la gráfica, se determina la pendiente y la intersección, lo que permite calcular la velocidad máxima (Vmax) y la constante de Michaelis-Menten (Km). Se destaca la posibilidad de obtener estos parámetros tanto de forma analítica como gráfica, ofreciendo una comprensión profunda del comportamiento enzimático.

Takeaways

📊 Se midió la cinética de una enzima en función de la concentración de sustrato.
🔬 Se utilizaron datos de velocidad inicial y concentraciones de sustrato para calcular parámetros cinéticos.
📈 Para graficar, se calculó el inverso de los datos de concentración de sustrato y velocidad inicial.
📏 Los pares de datos graficados trazan una línea recta, lo que indica una relación lineal.
✏️ La ecuación de la recta se representa como y = mx + b, donde m es la pendiente y b es la intersección con el eje y.
📐 La pendiente se calculó usando dos puntos de datos de la tabla.
🔄 La pendiente (m) resultó ser 0.2219, lo que se utilizó para calcular la intersección (b).
⚡ La velocidad máxima (Vmax) se determinó como el inverso de la intersección con el eje y, aproximadamente 45.0.
🧪 La constante de Michaelis-Menten (Km) se calculó usando la relación entre la pendiente y Vmax.
🔍 Se demostró que es posible obtener parámetros cinéticos tanto analíticamente como gráficamente.

Q & A

¿Cuál es el objetivo principal del experimento descrito en el video?
-El objetivo principal es medir la cinética de una enzima en función de la concentración de sustrato para calcular la velocidad máxima y la constante de Michaelis-Menten.
¿Qué datos se proporcionan en la tabla del experimento?
-La tabla contiene diversas concentraciones de sustrato y la velocidad inicial medida a cada una de estas concentraciones.
¿Qué ecuación se utiliza para resolver el problema de cinética enzimática?
-Se utiliza la ecuación de Lineweaver-Burk para relacionar el inverso de la concentración de sustrato y el inverso de la velocidad inicial.
¿Cómo se obtienen los valores necesarios para graficar los datos?
-Se calcula el inverso de cada uno de los datos de velocidad inicial y concentración de sustrato, creando así una nueva tabla con estos valores.
¿Qué representa la pendiente de la recta en la gráfica?
-La pendiente de la recta representa 1/V_max, donde V_max es la velocidad máxima de la reacción enzimática.
¿Cómo se calcula la pendiente de la recta?
-La pendiente se calcula utilizando dos puntos de la gráfica, aplicando la fórmula m = (y2 - y1) / (x2 - x1).
¿Qué valores se utilizan para calcular la constante de Michaelis-Menten (K_m)?
-Se utiliza el valor de la pendiente de la recta y la velocidad máxima obtenida previamente para calcular K_m.
¿Cuál es la relación entre la intersección con el eje Y y la velocidad máxima?
-La intersección con el eje Y es igual a 1/V_max, lo que permite calcular la velocidad máxima a partir de este valor.
¿Se puede calcular la K_m de forma gráfica? Si es así, ¿cómo?
-Sí, se puede calcular gráficamente observando el punto donde la recta cruza el eje horizontal, que representa -1/K_m.
¿Qué conclusión se puede extraer sobre el uso de la ecuación de Lineweaver-Burk?
-La ecuación de Lineweaver-Burk es útil tanto para cálculos analíticos como gráficos, permitiendo determinar la velocidad máxima y K_m de manera efectiva.