Técnica histológica

Facultad de Ciencias Médicas - UNL
20 Mar 202413:00

Summary

TLDREste video ofrece una introducción al estudio de la histología, abordando el proceso de creación de preparados para observación microscópica. Explicamos la técnica histológica desde la toma de muestra hasta el montaje de cortes para observación, destacando la fijación, deshidratación, aclaramiento, inclusión en parafina y cortes con el micrótomo. Además, se describe la coloración de tejidos con hematoxilina-eosina y tricrómicas, que permiten diferenciar tejidos por su morfología y coloración. La explicación se enfoca en la importancia de interpretar imágenes bidimensionales para comprender estructuras tridimensionales en el microscopio.

Takeaways

  • 🔬 Carlos Reche introduce los conceptos básicos de histología y su importancia en el estudio de tejidos y células.
  • 🧫 Explica los tipos de preparados histológicos: frescos, semipermanentes y permanentes, destacando sus usos y durabilidad.
  • 👨‍🔬 Destaca la técnica histológica como un proceso esencial para preservar y observar muestras en el laboratorio.
  • 🔍 Describe el proceso de fijación, necesario para detener los procesos celulares y conservar la estructura de las muestras.
  • 🧪 Menciona la deshidratación y el aclaramiento como pasos críticos para preparar los tejidos para la inclusión en parafina.
  • 🔪 Introduce el uso del micrótomo para cortar muestras incluidas en bloques de parafina, crucial para la preparación de láminas para el microscopio.
  • 🎨 Detalla las técnicas de coloración como la hematoxilina eosina, impregnación argéntica y coloraciones tricrómicas, utilizadas para diferenciar estructuras celulares y tejidos.
  • 🖼️ Explica la importancia de la interpretación de cortes bidimensionales para entender estructuras tridimensionales.
  • 👓 Enfatiza el uso del microscopio como herramienta fundamental para la observación detallada de las muestras teñidas.
  • 🌈 Discute cómo diferentes colorantes reaccionan con componentes celulares específicos, facilitando la identificación de estructuras como basófilas y acidófilas en las muestras.

Q & A

  • ¿Qué es la histología y cómo se relaciona con la microanatomía y la función de los tejidos?

    -La histología es el estudio de los tejidos y se refiere al análisis de la microanatomía de células y tejidos que forman los diferentes órganos. También relaciona la estructura de estos tejidos con sus funciones en el cuerpo.

  • ¿Qué tipos de preparados se pueden observar en el laboratorio de histología?

    -En el laboratorio de histología se pueden observar diferentes tipos de preparados: preparados frescos, semipermanentes y permanentes. Los preparados frescos son para observación inmediata y luego se descartan, mientras que los semipermanentes y permanentes pueden conservarse por más tiempo en el laboratorio.

  • ¿Cuál es el primer paso en la técnica histológica?

    -El primer paso en la técnica histológica es la toma de muestra, que puede ser una biopsia o una necropsia, dependiendo si el organismo donde se toma la muestra está vivo o no.

  • ¿Qué es la fijación en la técnica histológica y cuál es su propósito?

    -La fijación es el proceso que consiste en detener los procesos de las células para conservarlas de la misma manera como se obtuvieron al momento de la toma de muestra. Su propósito es evitar los metabolismos celulares y la acción de microorganismos que pueden afectar el tejido.

  • ¿Qué sucede durante la deshidratación en la técnica histológica?

    -Durante la deshidratación, se cambia el agua que es el principal componente de las células por un solvente como el etanol, sumergiendo el tejido en distintas concentraciones cada vez mayores de etanol hasta reemplazar todo el agua del tejido por etanol.

  • ¿Qué es el aclaramiento y cuál es su función en la técnica histológica?

    -El aclaramiento es el paso en el que se reemplaza el etanol por otro solvente como el silol o el benzol. Estos solventes permiten hacer la inclusión en el taco de parafina, que es esencial para la conservación y el corte de los tejidos en el microscópio.

  • ¿Cómo se realiza el corte de un tejido en la técnica histológica?

    -El corte se realiza con un micrótomo, un aparato que hace cortes muy finos de un taco de parafina con la muestra incluida en su interior. Las láminas cortadas son las que se pegan sobre los portaobjetos para la coloración y el análisis en el microscopio.

  • ¿Qué es la coloración en la técnica histológica y por qué es importante?

    -La coloración es el proceso que se realiza después del corte para destacar las características estructurales y morfológicas de las células y tejidos. Es importante porque permite diferenciar y identificar los distintos componentes de los tejidos en el microscopio.

  • ¿Qué son las coloraciones tricrómicas y cómo funcionan?

    -Las coloraciones tricrómicas utilizan tres colorantes, como la hematoxilina, la fucina y el azul de anilina o verde luz. Estas coloraciones permiten diferenciar los tejidos por sus diferentes colores, ya que ciertos tejidos tienden a retener ciertos colorantes debido a su afinidad o selectividad.

  • ¿Qué son las basofilias y acidofilias en la técnica histológica?

    -Las basofilias son las capacidades de los tejidos de colorearse con colorantes básicos, mientras que las acidofilias o eosinofilias son las capacidades de los tejidos de colorearse con colorantes ácidos. Los componentes que toman los colorantes básicos se denominan basófilos, y los que toman el colorante ácido se denominan acidófilos.

  • ¿Cómo se interpreta una estructura tridimensional a partir de imágenes bidimensionales en la técnica histológica?

    -La interpretación de una estructura tridimensional a partir de imágenes bidimensionales es clave en la técnica histológica. Se debe imaginar cómo sería un objeto tridimensional al realizar un corte fino en su interior. Esto implica entender cómo se verá el tejido dependiendo de la orientación del corte en relación a la estructura de las células y tejidos.

Outlines

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🔬 Introducción a la Histología y Preparación de Preparados

En este primer párrafo, el docente Carlos rech介绍 la histología como el estudio de los tejidos y la microanatomía de células y tejidos que componen los órganos. Destaca la relación entre la estructura y la función de los tejidos. Se mencionan diferentes tipos de preparados como los frescos, semipermanentes y permanentes, y se describe el proceso de preparación de muestras para su observación en el laboratorio de histología. Se destaca la técnica histológica, iniciando con la toma de muestra y siguiendo con la fijación de las células para conservarlas en su estado original, evitando metabolismos y la acción de microorganismos. El proceso incluye la deshidratación, aclaramiento y inclusión en parafina, culminando en el corte con el microtomo y la coloración para su observación en el microscopio.

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🔍 Interpretación Histológica y Coloración de Tejidos

Este párrafo se centra en la importancia de la interpretación histológica, donde se debe imaginar una estructura tridimensional a partir de imágenes bidimensionales. Se discuten diferentes imágenes que se pueden obtener según el plano de corte, como cortes transversales o longitudinales, y cómo afectará la percepción de la estructura celular. Además, se presenta el microscopio como herramienta fundamental para observar tejidos en el laboratorio. Se mencionan las coloraciones de rutina, como la coloración tricrómica, y se explica cómo estas coloraciones permiten diferenciar tejidos por sus colores, utilizando colorantes básicos y ácidos para destacar estructuras específicas en las células. Se discute la desaparición de ciertos componentes durante la técnica histológica y se mencionan las características estructurales y morfológicas que se pueden observar con estas coloraciones.

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🌈 Coloraciones Histológicas y sus Aplicaciones

En el tercer párrafo, se profundiza en las coloraciones histológicas, destacando la bicromática hematoxilina-eosina y su utilidad para evidenciar características estructurales y morfológicas de las células. Se describen los fundamentos de la coloración, incluyendo la reacción de colorantes básicos con estructuras ácidas de la célula y la reacción de colorantes ácidos con componentes básicos. Se introducen los conceptos de basofilia y acidofilia, que definen la capacidad de los tejidos de colorarse con colorantes básicos o ácidos, respectivamente. Además, se explica la coloración tricrómica y cómo permite diferenciar tejidos por colores, mencionando la afinidad selectiva de los colorantes por diferentes tejidos. Se mencionan las estructuras que tomarán los colorantes y cómo se verán en el microscopio, proporcionando una guía para la identificación de tejidos en base a su coloración.

Mindmap

Keywords

💡histología

La histología es el estudio de los tejidos y la microanatomía de células y tejidos que forman los diferentes órganos del cuerpo. En el video, se relaciona la estructura de los tejidos con su función en el cuerpo, siendo fundamental para entender cómo llegamos a los preparados que observamos en el laboratorio de histología.

💡preparados

Los preparados son muestras de tejidos que se obtienen para su análisis en el laboratorio de histología. Estos pueden ser frescos, semipermanentes o permanentes, dependiendo de la conservación requerida. En el video se menciona que los preparados permanentes pueden guardarse durante años y son los utilizados para observar en el microscopio.

💡técnica histológica

La técnica histológica es el conjunto de pasos que se siguen para transformar una muestra biológica en un preparado observable en microscopio. Incluye la fijación, deshidratación, aclaramiento, inclusión en parafina y corte en micrótomo. El video describe estos pasos como esenciales para conservar la estructura de las células y tejidos y permitir su análisis detallado.

💡fijación

La fijación es el primer paso en la técnica histológica que implica detener los procesos de las células para conservarlas en el estado en que se obtuvieron. Esto evita la acción de metabolismos celulares y la degradación por microorganismos, como bacterias y hongos, permitiendo una correcta observación y análisis en el laboratorio.

💡deshidratación

La deshidratación es un paso en la técnica histológica que consiste en reemplazar el agua presente en las células por un solvente, generalmente etanol, para preparar el tejido para la siguiente etapa de inclución en parafina. Este proceso ayuda a mantener la forma y estructura del tejido mientras se elimina el componente acuoso.

💡aclaramiento

El aclaramiento es una etapa en la técnica histológica que sigue a la deshidratación, en la cual se reemplaza el etanol utilizado en la deshidratación con otro solvente como el silol o benzol. Este paso es crucial para eliminar cualquier etanol restante y preparar el tejido para la inclusión en parafina.

💡inclusión en parafina

La inclusión en parafina es el proceso de incorporar el tejido deshidratado y aclarado en una matriz de parafina líquida. Una vez que la parafina se enfría, se obtiene un bloque sólido, conocido como taco, que contiene la muestra de tejido. Este paso es esencial para el corte de tejido en micrótomo y la posterior observación en microscopio.

💡corte en micrótomo

El corte en micrótomo es el proceso de recortar del Taco de parafina finas láminas de tejido utilizando un micrótomo, un aparato diseñado para realizar cortes muy delgados. Estas láminas son las que se colocarán sobre portaobjetos para la coloración y observación bajo microscopio, permitiendo el análisis detallado de la estructura y morfología de las células y tejidos.

💡coloración

La coloración es un paso esencial en la técnica histológica que implica aplicar colorantes a los cortes para destacar y diferenciar las estructuras celulares y tejidales. Las coloraciones bi e tricrómicas son las más comunes, utilizando hematoxilina y eosina, o tres colorantes para diferenciar tejidos por sus colores. Esto permite a los investigadores identificar y estudiar las diferentes partes de las células y tejidos bajo el microscopio.

💡microscopio

El microscopio es el instrumento utilizado para observar los preparados histológicos en el laboratorio. Permite ampliar las láminas de tejido cortadas y coloreadas, facilitando el análisis de su estructura y morfología. En el video, se menciona el uso del microscopio para observar los diferentes tejidos y cómo las coloraciones ayudan a diferenciarlos visualmente.

💡interpretación histológica

La interpretación histológica es el proceso de analizar y comprender las imágenes obtenidas a través del microscopio de los preparados histológicos. Es fundamental para transformar la visión bidimensional del microscopio en una comprensión tridimensional de la estructura de las células y tejidos. En el video, se destaca la importancia de esta interpretación para entender la relación entre estructura y función en los tejidos corporales.

Highlights

La histología es el estudio de los tejidos y la microanatomía de células y tejidos que forman los diferentes órganos.

En el laboratorio de histología se pueden observar distintos tipos de preparados, como preparados frescos, semipermanentes y permanentes.

La técnica histológica comienza con la toma de muestra a través de una biopsia o una necropsia.

La fijación es un paso clave para detener los procesos celulares y conservar las células en su estado original.

La deshidratación implica reemplazar el agua en las células por un solvente como el etanol.

El aclaramiento es el proceso de reemplazo del etanol por otros solventes compatibles con la parafina.

La inclusión en parafina permite conservar el tejido y facilita el corte en secciones delgados.

El micrótomo es un aparato utilizado para realizar cortes finos de los tejidos incluidos en parafina.

La coloración es un proceso esencial para visualizar las estructuras celulares y tejidas en los preparados histológicos.

Las coloraciones tricrómicas utilizan tres colorantes para diferenciar tejidos por sus colores.

La hematoxilina y la eosina son los dos colorantes más utilizados en la coloración bicrómica.

La basofilia y la acidofilia son las capacidades de los tejidos de tomar colorantes básicos o ácidos.

Las estructuras que toman colorantes básicos son basófilos, mientras que las que toman colorantes ácidos son acidófilos.

La interpretación histológica es fundamental para entender la estructura tridimensional a partir de imágenes bidimensionales.

El microscopio óptico es el instrumento principal utilizado para observar tejidos en el laboratorio de histología.

Las coloraciones de rutina en el laboratorio permiten diferenciar tejidos por sus características morfológicas y estructurales.

Los tejidos desaparecen durante la técnica histológica debido al uso de solventes y colorantes.

La coloración tricrómica permite diferenciar tejidos por colores, como tejido conectivo, epitelial y muscular.

Transcripts

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Hola Soy Carlos reche docente de la

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cátedra de biología celular histología y

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embriología médica de la facultad de

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ciencias médicas de la Universidad

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Nacional del litoral en este primer

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video vamos a ver cómo llegamos a a ser

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los preparados que vamos a observar en

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el laboratorio de histología

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Qué es la histología la histología es el

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estudio de los tejidos y hace referencia

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al análisis de la microanatomía de

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células y tejidos que forman los

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diferentes órganos y también eh la

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histología relaciona la estructura con

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la función de cada uno de los

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tejidos en el laboratorio podemos llegar

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a observar distintos tipos de

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preparados tenemos preparados en

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fresco que no son permanentes estos

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preparados se observan o se hacen para

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una observación en el momento y después

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se descartan Como por ejemplo puede ser

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un parasitológico directo un análisis

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que se hace se mira la materia fecal y

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después se descarta ese preparado porque

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es un material

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contaminante después tenemos tipos de

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preparad semipermanente donde se hace

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una fijación rápida y una posterior

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coloración eh para observar al

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microscopio y esos preparados pueden

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durar un tiempo en el laboratorio Como

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por ejemplo eh vamos a ver extendidos de

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sangre que se hacen en el laboratorio y

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podemos llegar a conservarlos un tiempo

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pero no duran mucho tiempo e Cómo son

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los preparados permanentes Estos sí los

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podemos guardar durante años mientras no

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se rompa el vidrio son estos que estamos

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viendo acá en esta

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imagen pero para llegar a esto

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tenemos que hacer una serie de pasos que

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es lo que se denomina la técnica

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histológica el primer paso siempre es la

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toma de muestra que va a ser una biopsia

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o una necropsia Depende si el organismo

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donde tomamos la muestra está vivo o no

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Entonces lo primero que hacemos después

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de la toma de muestra es la fijación la

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fijación consiste en detener los

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procesos de esas células

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Y tratar de conservarlas de la misma

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manera como las obtuvimos al momento de

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la toma de muestra entonces la fijación

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lo que va a hac evitar los metabolismos

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celulares si las células están vivas y

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eh favorecer la conservación o sea

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evitar la acción de microorganismos como

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bacterias y hongos que pueden afectar a

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ese

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tejido después seguimos con la

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deshidratación en la hidratación

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cambiamos el agua que es el principal

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componente de las células por un

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solvente como es el etanol vamos eh

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sumergiendo en distintas concentraciones

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cada vez mayores de etanol hasta

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reemplazar tod el agua del tejido por

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etanol el paso siguiente es el

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aclaramiento acá reemplazamos el etanol

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por otro solvente que puede ser el silol

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o el benzol

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estos solventes nos van a permitir

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después hacer la inclusión en el taco de

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parafina que es esto que está acá son

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solventes compatibles con la parafina

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Entonces ese tejido aclarado eh lo vamos

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a incluir o incorporar a parafina

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líquida para después cuando se enfríe

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obtenemos este Taco que está

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acá una vez que tenemos el taco viene el

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siguiente paso que es el corte con el

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micrótomo el micrótomo es un aparato que

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se usa en el laboratorio que hace cortes

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muy finos de ese taco de parafina con la

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muestra incluida en su interior y esas

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láminas que se cortan son las que vamos

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a pegar sobre los

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portaobjetos para después llegar a la

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coloración y después de la coloración

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para conservar ese corte histológico se

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hace la deshidratación

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y el montaje o sea se tapa con un

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cubreobjetos y un pegamento que puede

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ser el bálsamo de Canadá y esto nos

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permite tener estos preparados que van a

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observar ustedes en el microscopio

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eh estos planos de corte son importantes

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para tratar de imaginarnos

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cómo es algo un objeto tridimensional

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pasado

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a las dos dimensiones que es lo que

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vamos a ver nosotros en el preparado

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porque nosotros hacemos un corte muy

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fino entonces Llevamos una estructura

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tridimensional a dos dimensiones

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Entonces esto es un aspecto clave en la

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interpretación histológica eh eso es

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poder imaginar una estructura

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tridimensional a partir de imágenes

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bidimensionales entonces podemos ver en

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esta imagen como si hacemos un corte

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transversal a este grupo de células cómo

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va a ser la imagen que veríamos desde

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una vista superior de este grupo de

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células entonces podemos ver acá una

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célula redondeada con su núcleo central

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acá por donde pasa el plano de corte no

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hay núcleo Entonces vamos a ver esta

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parte de la célula y lo mismo acá vamos

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a ver este espesor de la célula con el

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núcleo en el medio para imaginarnos un

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poco lo que sucede en este grupo de

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células tenemos distintas imágenes como

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puede ser una naranja y donde pasa el

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plano de corte va a ser la imagen que

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nos va a dar ese plano de corte Lo mismo

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sucede con esta estructura cilindrica

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arqueada que según donde pase el plano

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de corte nos va a ir dando distintas

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imágenes eh otro ejemplo sería esta

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estructura cilíndrica hueca también con

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difer planos de corte y las imágenes que

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nos van dando entonces este aspecto es

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clave para la interpretación de una

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estructura tridimensional a partir de

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imágenes

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bidimensionales que vemos esto es una

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estructura cilíndrica maciza entonces en

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según el plano de corte Si es paralelo a

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la superficie o si es inclinado la

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imagen que obtenemos va a ser

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diferente

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bueno acá vemos el microscopio que va a

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ser el instrumento que vamos a usar en

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el laboratorio para observar diferentes

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tejidos como vemos en estas imágenes

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Entonces el microscopio que ustedes ya

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conocen las partes lo vimos en el curso

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de

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ingreso es el instrumento como les dije

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que vamos a usar en el

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laboratorio las coloraciones de rutina

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que se utilizan en el laboratorio

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o que utilizamos nosotros son tres o

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cuatro que podemos ver acá como se

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observa con

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hematoxilina eosina esta

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imagen esto es una coloración con

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tinciones con metales pesado o

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impregnación argéntica también se llama

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y estas dos imágenes corresponden a

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coloraciones tricrómicas como su nombre

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lo indica utilizan tres colorantes y nos

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permite diferenciar los tejidos por sus

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diferentes

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colores bueno acá vemos

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entonces los fundamentos de estas

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coloraciones eh o sea las coloraciones

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comprenden un conjunto de Procedimientos

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aplicados para preservar la estructura

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la organización y en ciertos casos la

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función de cada uno de los tejidos

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entonces la primer coloración o la más

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utilizada es la bicr

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con dos colorantes como su nombre lo

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indica la hematoxilina y la

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eosina es la más utilizada y esta

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coloración pone en evidencia las

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características estructurales y

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morfológicas de las células muchos

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componentes de los tejidos desaparecen

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durante la técnica histológica como por

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ejemplo los lípidos de los

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adipositos por la utilización de

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solventes también el glucógeno por

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ejemplo los proteoglucanos y

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glucosaminoglucanos del tejido

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conectivo también desaparecen

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eh Entonces vamos a explicar los

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fundamentos de esta coloración de

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hematoxilina de osina que usa un

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colorante básico que es la hematoxilina

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y un colorante ácido que es la eosina

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los colorantes básicos reaccionan con

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estructuras eh ácidas de la célula como

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puede ser un núcleo los ribosomas que

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pueden estar sueltos en el citoplasma o

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formando parte del retículo

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endoplasmático rugoso eh También con

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grupo sulfato de los

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glucosaminoglucanos de la matriz

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extracelular del cartílago por ejemplo y

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los colorantes ácidos eh van a

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reaccionar con componentes básicos de

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las células como Son estructuras

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membranosas

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eh organelas membranosas que puede haber

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en el citoplasma como son las

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mitocondrias el retículo endoplasmático

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liso también y con grupos amino de las

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proteínas entonces Esas estructuras van

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a tomar el colorante ácido como es la

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eosina

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eh también eh existen estructuras que al

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unirse a colorantes básicos modifican

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los colores y a eso se denomina metacom

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macia la capacidad de los tejidos de

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colorearse con colorantes básicos se

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denomina

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basofilia y la capacidad de los tejidos

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de colorearse con colorantes ácidos se

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denomina acidofilia o también

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eosinofilia entonces los

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componentes que van a tomar los

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colorantes básicos van a ser

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basófilos y los componentes que van a

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tomar el colorante ácido se van a

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denominar

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acidófilos después tenemos las

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coloraciones tricrómicas que utilizan

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tres colorantes como su nombre lo indica

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y ahí tenemos la hematoxilina la fucina

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y el azul de anilina o verde luz Existen

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varios tipos de coloraciones tricrómicas

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eh van a ver en la bibliografía que hay

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distintos nombres pero Lo importante es

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que la coloración tricrómica eh nos va a

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permitir diferenciar por colores los

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diferentes tejidos por ejemplo vamos a

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ver en color azul o verde Depende qué

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colorante usamos el tejido conectivo

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Porque estos colorantes van a tener

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cierta afinidad o selectividad por el

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colágeno Entonces el tejido conectivo se

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va a ver de color azul verde o turquesa

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como les dije dependiendo del colorante

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que usamos el tejido epitelial se va a

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ver más Violeta y el tejido muscular se

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va a ver rosado entonces con una

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coloración

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tricrómica nos

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permite

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diferenciar distintos tejidos por el

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color bueno Y acá tenemos finalizando

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estructuras ácidas que van a tomar el

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colorante básico entonces se van a ver

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de color azul como es la

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hematoxilina y estructuras BS

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que van a tomar el colorante ácido como

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es la eosina de color rosado y por eso

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están puestos así

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eh las las organelas que van a tomar o

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las estructuras que van a tomar cada uno

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de los colorantes para que nos quede

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claro de acuerdo al color

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eh Como lo vamos a ver en el microscopio

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óptico bueno Y eso es todo para esta

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primera explicación de laboratorio an

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