VÍDEO 1 PRÁCTICA BIOLOGÍA MOLECULAR

Summary

Este video guía paso a paso sobre el proceso de extracción de ADN y electroforesis, comenzando con la preparación del espacio de trabajo y el equipo necesario. Detalla la manipulación del kit de extracción de ADN, el uso del centrífuga, la preparación de gel de agarosa, la carga de las muestras en el gel y la ejecución de la electroforesis. Además, se destacan las técnicas de seguridad y la importancia de seguir el protocolo al pie de la letra para obtener resultados precisos. Finalmente, se explican los pasos para interpretar los resultados obtenidos mediante las bandas de ADN.

Takeaways

• 😀 Es fundamental desinfectar el espacio de trabajo antes de comenzar con el proceso, usando alcohol etílico al 96%.
• 😀 El kit de extracción de ADN incluye tubos de ensayo y columnas para procesar las muestras, junto con varias soluciones tampón.
• 😀 La centrifugadora debe equilibrarse cuidadosamente para evitar desequilibrios que puedan dañarla. Los tubos deben tener el mismo peso y colocarse de manera simétrica.
• 😀 Al preparar el gel de agarosa, se debe disolver el agarosa en solución tampón, calentarla hasta que se disuelva completamente y añadir bromuro de etidio para visualizar el ADN.
• 😀 Es crucial evitar la formación de burbujas al verter el gel disuelto, ya que podrían interferir con el proceso de electroforesis.
• 😀 Una vez que el gel se ha solidificado, se inserta un peine para formar los pozos donde se cargarán las muestras de ADN.
• 😀 Las muestras de ADN se mezclan con un tampón de carga antes de ser colocadas en los pozos del gel utilizando micropipetas.
• 😀 Durante la electroforesis, se debe sumergir el gel en una solución tampón que permita la correcta migración del ADN cuando se aplica una diferencia de potencial.
• 😀 Se deben conectar correctamente los cables de la caja de electroforesis: el negro al cátodo (polo negativo) y el rojo al ánodo (polo positivo).
• 😀 Al aplicar corriente eléctrica, se observa la electroforesis del ADN, lo que provoca que las moléculas de ADN se muevan a través del gel, separándose según su tamaño.
• 😀 El proceso de electroforesis permite observar las bandas de ADN después de unos 20-25 minutos, y los patrones de migración pueden ser utilizados para análisis posteriores en biotecnología.

Q & A

¿Por qué es importante desinfectar el área de trabajo antes de comenzar?

Es importante desinfectar el área de trabajo para evitar la contaminación de las muestras y asegurar que los resultados del experimento sean precisos y confiables.

¿Qué tipo de alcohol se utiliza para desinfectar el área de trabajo?

Se utiliza alcohol etílico al 96%, que es el tipo comúnmente disponible en las farmacias.

¿Para qué se utilizan las columnas en el kit de extracción de ADN?

Las columnas se utilizan para purificar el ADN, permitiendo que las muestras sean filtradas y separadas según el protocolo establecido.

¿Por qué es crucial equilibrar los tubos en la centrífuga?

Es crucial equilibrar los tubos en la centrífuga para evitar que la máquina se desestabilice debido a un desequilibrio en el peso, lo que podría causar daños o errores en el proceso.

¿Qué sucede si no se colocan los tubos de manera simétrica en la centrífuga?

Si los tubos no se colocan de manera simétrica, la centrífuga podría volverse inestable y podría dañarse, afectando la eficiencia del proceso de separación.

¿Qué es el gel de agarosa y para qué se utiliza?

El gel de agarosa es un polímero utilizado en la electroforesis para separar moléculas de ADN según su tamaño. Se disuelve en un tampón y luego se solidifica para formar una matriz donde se cargan las muestras.

¿Por qué es necesario calentar el gel de agarosa?

Es necesario calentar el gel de agarosa para disolver completamente el polvo y asegurar que se forme una solución homogénea, lo que permite una migración adecuada de las moléculas de ADN durante la electroforesis.

¿Qué es el bromuro de etidio y para qué se utiliza?

El bromuro de etidio es una sustancia utilizada para visualizar el ADN en geles de agarosa. Se une al ADN y emite fluorescencia cuando se expone a luz ultravioleta, permitiendo observar las bandas de ADN.

¿Por qué es importante evitar la formación de burbujas al verter el gel?

Es importante evitar las burbujas porque pueden interferir con el paso de las moléculas a través del gel, afectando la resolución de las bandas durante la electroforesis.

¿Cómo se cargan las muestras en el gel de agarosa?

Las muestras se cargan en los pocillos (o 'wells') del gel utilizando micropipetas. Es importante hacerlo con cuidado para no romper el gel ni generar burbujas.