Electrophorèse Capillaire #Electrophorèse#Capillaire

Summary

L'électrophorèse capillaire est une technique séparative qui permet de séparer des composés dans un tube capillaire sous l'effet d'un champ électrique. Le processus inclut l'activation du capillaire, l'application d'un champ électrique et la détection des composés séparés à l'aide d'un détecteur spécifique. L'échantillon à analyser, souvent un mélange, est injecté dans le capillaire où il est séparé selon la mobilité électrophorétique et l'écoulement électro-osmotique. Après l'analyse, un électrophérogramme est généré, montrant des pics correspondant à chaque composé. L'utilisation d'un logiciel pour contrôler l'appareil et l'injection des échantillons est également expliquée.

Takeaways

• 😀 L'électrophorèse capillaire est une technique séparative qui utilise un champ électrique pour séparer des composés dans un capillaire rempli d'électrolyte.
• 😀 Le capillaire utilisé est fait de silice vierge et est protégé par un film polymère pour éviter toute contamination.
• 😀 Le montage expérimental inclut un détecteur placé à la sortie du capillaire, un carrousel pour les échantillons et les électrolytes, et des flacons contenant ces derniers.
• 😀 Avant l'analyse, le capillaire doit être activé par une solution de soude pour charger négativement sa paroi, influençant ainsi l'écoulement électro-osmotique.
• 😀 L'écoulement électro-osmotique est responsable du déplacement du solvant dans le capillaire sous l'effet du champ électrique.
• 😀 Les composés se déplacent selon leur charge et taille, et peuvent se séparer en fonction de leur mobilité électrophorétique et de l'écoulement électro-osmotique.
• 😀 Les cations migrent vers la cathode, influencés par l'écoulement électro-osmotique et leur mobilité électrophorétique.
• 😀 Les anions migrent également, mais leur déplacement est opposé par l'écoulement électro-osmotique, ce qui ralentit leur mouvement.
• 😀 L'expérience nécessite la préparation d'une solution d'activation, de solutions électrolytiques, et d'un échantillon à analyser, comme un mélange de DMF, phénylethylamine et parabènes.
• 😀 L'injection de l'échantillon dans le capillaire se fait en appliquant une tension, et le processus est contrôlé via un logiciel qui gère les paramètres de l'expérience, comme le voltage et la durée d'analyse.

Q & A

Qu'est-ce que l'électrophorèse capillaire ?

L'électrophorèse capillaire est une technique séparative où les composés sont séparés sous l'action d'un champ électrique dans un tube capillaire en présence d'un électrolyte.

Quel est le rôle du capillaire dans l'électrophorèse capillaire ?

Le capillaire sert à séparer les composés dans un échantillon lorsqu'un champ électrique est appliqué, ce qui provoque un écoulement électro-osmotique permettant la séparation des molécules.

Pourquoi le capillaire doit-il être activé avant l'analyse ?

Le capillaire doit être activé avec une solution de soude (0,1 mol/L) pour charger négativement sa paroi, facilitant ainsi l'écoulement électro-osmotique et la séparation des composés.

Qu'est-ce que l'écoulement électro-osmotique ?

L'écoulement électro-osmotique est un mouvement de liquide dans le capillaire généré par un champ électrique. Ce mouvement permet de transporter les composés à séparer.

Quelles sont les principales contributions qui influencent le déplacement des composés dans le capillaire ?

Les deux principales contributions sont l'écoulement électro-osmotique et la mobilité électrophorétique des espèces, qui dépendent de leur charge et de leur taille.

Comment les cations se déplacent-ils dans l'électrophorèse capillaire ?

Les cations se déplacent sous l'effet de l'écoulement électro-osmotique et de la mobilité électrophorétique, dans la même direction, avec les plus chargés migrent en premier et les plus petits plus rapidement.

Pourquoi les anions migrent plus lentement dans un capillaire ?

Les anions sont soumis à deux forces opposées : l'écoulement électro-osmotique et la migration électrophorétique. Ces forces opposées ralentissent leur mouvement.

Comment prépare-t-on l'échantillon pour l'analyse ?

L'échantillon est préparé en le diluant avec un électrolyte, comme le borax, après avoir été prélevé et mis dans un flacon. La solution est ensuite homogénéisée à l'aide d'un vortex.

Quelles étapes sont nécessaires pour l'initialisation du système d'électrophorèse capillaire ?

Pour initialiser le système, il faut d'abord lancer le logiciel, sélectionner la méthode à utiliser, puis préconditionner le capillaire avec des solutions de soude et d'électrolyte.

Comment l'injection des échantillons est-elle réalisée ?

L'injection des échantillons se fait en appliquant un voltage sur le capillaire, ce qui permet d'injecter l'échantillon à l'entrée du capillaire pendant une durée spécifique (par exemple, 5 secondes avec 5 kV).