Transformación genética de plantas por Agrobacterium – Parte 2
Summary
TLDREn este video, se explica la estrategia de Agrobacterium para transformar células vegetales y generar plantas genéticamente modificadas en el laboratorio. Se detalla cómo se debe modificar Agrobacterium tumefaciens, adaptando su plásmido para crear un vector binario que permita la inserción de transgenes en las plantas. Además, se discuten los marcadores de selección, como los genes de resistencia a antibióticos y herbicidas, y el uso de promotores constitutivos, como el 35S, para asegurar la expresión de los genes de interés. Finalmente, se reflexiona sobre las implicaciones y controversias de estas tecnologías.
Takeaways
- 😀 Se debe curar *Agrobacterium tumefaciens* para eliminar su capacidad de producir tumores y opinas antes de usarlo para la transformación genética.
- 😀 Para transformar plantas, se utiliza un vector binario modificado que incluye genes de interés y un marcador de selección.
- 😀 Los vectores binarios deben tener un origen de replicación compatible tanto con *Agrobacterium* como con *Escherichia coli*.
- 😀 Es necesario utilizar genes de resistencia a antibióticos (como kanamicina) o herbicidas (como basta) para identificar las plantas transformadas con éxito.
- 😀 Los promotores constitutivos, como el 35S del virus del mosaico de la coliflor, son comúnmente usados para asegurar la expresión constante de los genes en todas las partes de la planta.
- 😀 Aunque el promotor 35S es efectivo en plantas, su actividad en otros organismos, como bacterias o levaduras, ha sido objeto de controversia.
- 😀 Los genes reporteros, como los que codifican proteínas fluorescentes, son útiles para detectar fácilmente las plantas transgénicas.
- 😀 El uso de selección mediante herbicidas (como basta) permite identificar las plantas que han sido exitosamente transformadas sin dañar a las plantas transgénicas.
- 😀 Es posible usar métodos alternativos para eliminar o segregar los marcadores de selección una vez que la planta ha sido transformada.
- 😀 La ingeniería genética en plantas sigue siendo un tema de debate científico, especialmente en cuanto a la seguridad y la transferencia horizontal de genes.
- 😀 Es importante fomentar debates informados y basados en datos dentro del campo de la biotecnología y la ingeniería genética de plantas.
Q & A
¿Qué es la estrategia Agrobacterium utilizada para transformar células vegetales?
-La estrategia Agrobacterium se utiliza para transformar células vegetales mediante la modificación genética, aprovechando la capacidad de la bacteria *Agrobacterium tumefaciens* para insertar material genético en las células de las plantas.
¿Por qué se debe curar o desarmar *Agrobacterium tumefaciens* antes de usarla en el proceso de transformación?
-Es necesario curar o desarmar *Agrobacterium tumefaciens* para eliminar su capacidad de producir tumores y opinas, lo que permite usarla de manera controlada para transferir genes específicos sin generar tumores indeseados.
¿Qué es un vector binario y por qué es importante en la transformación genética de plantas?
-Un vector binario es un plásmido modificado que se utiliza para transportar genes de interés en el proceso de transformación. Es importante porque permite la transferencia de genes a las plantas sin los elementos no deseados, como los genes de biosíntesis de fitohormonas y opinas.
¿Qué funciones deben tener los elementos en un vector binario para que funcione correctamente en *Agrobacterium*?
-El vector binario debe tener un origen de replicación para que se mantenga en *Agrobacterium* durante su división, un gen de resistencia a antibióticos para facilitar la selección y secuencias que permitan la transferencia eficiente del material genético a la planta.
¿Por qué se necesita usar *Escherichia coli* en el proceso de transformación genética de plantas?
-Se utiliza *Escherichia coli* como intermediario para manejar los plásmidos, ya que tiene un origen de replicación compatible y permite la manipulación del ADN antes de ser transferido a *Agrobacterium* para su uso en las plantas.
¿Qué son los marcadores de selección y por qué se utilizan en la ingeniería genética de plantas?
-Los marcadores de selección son genes que confieren resistencia a antibióticos o herbicidas, lo que permite identificar fácilmente las plantas que han sido exitosamente transformadas, facilitando el proceso de selección de eventos positivos.
¿Cuál es el propósito de utilizar un promotor constitutivo en la expresión de genes en plantas transgénicas?
-El promotor constitutivo, como el promotor 35S, asegura que el gen de interés se exprese de manera continua en todos los tejidos de la planta durante todas sus etapas de desarrollo, sin depender de factores externos.
¿Qué es el promotor 35S y cómo se utiliza en la ingeniería genética de plantas?
-El promotor 35S proviene del virus del mosaico de la coliflor y se utiliza como un promotor constitutivo en plantas transgénicas. Su función es asegurar la expresión constante de los genes de interés en todas las partes de la planta.
¿Qué diferencia a un promotor inducible de un promotor constitutivo?
-Un promotor inducible solo activa la transcripción de genes en condiciones específicas, como en un tejido determinado o en respuesta a un estímulo ambiental, mientras que un promotor constitutivo promueve la transcripción de manera continua y en todos los tejidos de la planta.
¿Cuáles son algunos de los genes de resistencia más comunes utilizados como marcadores de selección en plantas transgénicas?
-Los genes más comunes son el gen *nptII*, que confiere resistencia a kanamicina, el gen *hpt*, que otorga resistencia a la herbacida hygromicina B, y el gen *bar*, que otorga resistencia al herbicida basta.
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