Preparación medios de cultivo - Microbiología
Summary
TLDREste script detalla el proceso de preparación de medios de cultivo, esenciales para el crecimiento y multiplicación de microorganismos en laboratorios. Se discuten diferentes tipos de medios, incluyendo los líquidos y sólidos, y cómo se utilizan para aislar y estudiar bacterias específicas. Los medios se clasifican como sintéticos o naturales, simples o enriquecidos, y selectivos o diferenciales, cada uno con usos y preparaciones específicas. El procedimiento práctico incluye cálculos para la cantidad de medio a preparar, la esterilización y el servicio de los mismos en diferentes recipientes como cajas Petri y tubos de vidrio. La esterilización es crucial y se realiza en un autoclave, con medidas de seguridad y control de presión y temperatura. Finalmente, se describe la transferencia y manipulación de los medios a una cabina de flujo laminar para evitar la contaminación y asegurar la calidad del cultivo.
Takeaways
- 🌱 Los medios de cultivo son sustrato o solución de nutrientes donde crecen y se multiplican microorganismos en laboratorio.
- 🔬 El objetivo es aislar y identificar diferentes especies bacterianas y realizar estudios complementarios.
- 🍲 Los medios de cultivo pueden ser líquidos o sólidos, y el agar es una sustancia polisacáridos que proporciona solidez.
- 🧪 Los medios sintéticos están compuestos por productos químicos conocidos y se usan para estudios metabólicos.
- 🌿 Los medios naturales o no definidos se preparan con sustancias naturales, como de origen animal o vegetal.
- 📈 Los medios simples tienen los requisitos nutricionales básicos para el desarrollo de bacterias.
- 📒 Los medios enriquecidos se añaden elementos tales como sangre, suero, huevo, glucosa y vitaminas.
- 🚫 Los medios selectivos contienen compuestos químicos nocivos para bacterias indeseadas.
- 🔍 Los medios diferenciales permiten observar propiedades de crecimiento específicas para diferenciar especies bacterianas.
- ⚖️ La preparación de los medios de cultivo requiere cálculos precisos para el volumen deseado.
- 🔥 La esterilización es un proceso crucial que implica el uso de un autoclave para matar todas las bacterias presentes.
- 🧊 Una vez esterilizados y solidificados, los medios se refrigeran y se almacenan para su uso posterior.
Q & A
¿Qué es un cultivo microbiológico y para qué se utilizan?
-Un cultivo microbiológico es un sustrato o solución de nutrientes en los que crecen y se multiplican los microorganismos en el laboratorio. Se utilizan con el objetivo de aislar diferentes especies bacterianas con el fin de identificarlas y realizar estudios complementarios.
¿Cómo se clasifican los medios de cultivo según su consistencia?
-Los medios de cultivo se clasifican en líquidos, que contienen nutrientes y a veces sustancias que mantienen el pH estable, y sólidos, que se obtienen debido a la presencia de agar, un polisacáridos que se obtiene de algas marinas.
¿Qué son los medios sintéticos o químicamente definidos?
-Los medios sintéticos o químicamente definidos son aquellos compuestos por productos químicos conocidos y se utilizan para realizar estudios metabólicos específicos.
¿Cuáles son algunos ejemplos de medios naturales o químicamente no definidos?
-Algunos ejemplos de medios naturales o químicamente no definidos incluyen la leche, el papa zanahoria y otros sustraños que provienen de origenes animales o vegetales.
¿Qué son los medios enriquecidos y para qué se utilizan?
-Los medios enriquecidos son aquellos que son simples o comunes pero a los que se les añaden ciertos elementos como sangre, suero, huevo, glucosa, vitaminas, etc., lo que permite el aporte de factores de crecimiento o sustancias que neutralizan agentes inhibidores del crecimiento en bacterias exigentes nutricionalmente.
¿Cómo se consiguen los medios selectivos?
-Los medios selectivos se consiguen añadiendo compuestos químicos nocivos para algunas bacterias cuyo crecimiento no es de interés o mediante una alteración de las condiciones físicas del medio.
¿Qué son los medios diferenciales y cómo funcionan?
-Los medios diferenciales son aquellos que contienen sustancias que permiten que sólo crezcan ciertas bacterias y, al actuar sobre algunas de las sustancias adicionadas, permiten observar ciertas propiedades de crecimiento que ayudan a diferenciar sus colonias de otras especies.
¿Cómo se almacenan los medios de cultivo y qué información es crucial en su etiqueta?
-Los medios de cultivo se almacenan en frascos plásticos con una etiqueta que contiene información sobre el medio, como su composición, fecha de vencimiento, pictogramas de peligro y la fórmula de preparación, que es crucial para el cálculo del volumen deseado a preparar.
¿Cómo se realiza el cálculo de los gramos necesarios para preparar un volumen específico de medio de cultivo?
-Se utiliza la fórmula de la regla de 3, teniendo en cuenta el volumen que se desea preparar y la cantidad de medio necesaria para mil mililitros, para calcular la cantidad de medio necesaria para el volumen deseado.
¿Qué pasos se siguen para preparar los medios de cultivo?
-Se pesa el medio en papel aluminio, se disuelve en agua destilada, se calienta y se agita continuamente hasta el primer hervor, se retira del calor y se repite el proceso tres veces, se tapa y se esterILIza en autoclave.
¿Cómo se realiza la esterilización de los medios de cultivo en autoclave?
-Se verifica el nivel del agua, se conecta la autoclave, se ajusta la temperatura y la presión, se mantiene en condiciones de presión y temperatura por 20 minutos, se espera a que la presión baje, se abre la válvula de control de aire y se saca la carga esterilizada.
¿Cómo se sirven los medios de cultivo en las cajas Petri y tubos?
-Se abren las cajas Petri y los tubos cerca del mechero, se flamea la boca del tubo de inyección, se sirve el medio y se dejan solidificar. Una vez solidificados, se cierran y se refrigeran.
Outlines
🔬 Preparación de Medios de Cultivo
Este párrafo aborda la preparación de medios de cultivo, que son sustrato o solución de nutrientes donde los microorganismos crecen y se multiplican en laboratorio. Se describen los diferentes tipos de medios, incluyendo los líquidos y sólidos, y se mencionan ejemplos como el caldo nutritivo y el agar. Además, se clasifican los medios en sintéticos y naturales, y se destacan los medios simples, enriquecidos y selectivos. Finalmente, se explica el proceso de cálculo para la preparación de los mismos, teniendo en cuenta la cantidad de medio y agua necesaria para cada volumen deseado.
🧪 Proceso de Peso y Mezcla de los Medios
Este párrafo detalla el proceso de peso y mezcla de los distintos medios de cultivo. Se describe cómo se pesan los diferentes medios en papel aluminio y se disuelven en agua destilada según las fórmulas proporcionadas. Se menciona la necesidad de tapar bien los medios para su almacenamiento y se destaca la importancia de agitar constantemente con una varilla de vidrio durante el calentamiento hasta el primer hervor para evitar el rebote. Además, se describe el proceso de esterilización en autoclave para los medios que se utilizarán en cajas y tubos, incluyendo la preparación y el control de la presión y temperatura.
🔥 Esterilización de los Medios de Cultivo
Este párrafo se enfoca en el proceso de esterilización de los medios de cultivo. Se describe la verificación del nivel de agua en el autoclave, la conexión a la corriente eléctrica y la configuración de la temperatura y presión adecuadas. Se mencionan los pasos para asegurar que el autoclave esté correctamente sellado y se explica cómo se lleva a cabo la esterilización durante 20 minutos. Después de este tiempo, se detalla cómo se debe proceder para disminuir la presión y temperatura y se indica cómo se abren los seguros y se extraen los medios esterilizados. Finalmente, se describe el proceso de enfriamiento y el almacenamiento de los tubos y cajas en la cabina de flujo laminar.
🧫 Preparación y Empaque de los Medios para Refrigeración
Este párrafo cubre la preparación final de los medios de cultivo y su empaque para el almacenamiento en refrigeración. Se describe cómo se abren los medios de cultivo y se sirven en cajas Petri, el procedimiento de esterilización de las cajas y su posterior manipulación en la cabina de flujo laminar. Se destaca la importancia de realizar estos procedimientos cerca del mecher y se menciona cómo se deben empacar y etiquetar los medios una vez solidificados. Finalmente, se describe cómo se observan los medios sólidos, líquidos y semisólidos una vez listos.
Mindmap
Keywords
💡Cultivo
💡Medios de cultivo
💡Agar
💡Medios líquidos
💡Medios sintéticos
💡Medios naturales
💡Medios enriquecidos
💡Medios selectivos
💡Medios diferenciales
💡Esterilización
💡Caja Petri
Highlights
Preparación de medios de cultivo es fundamental para el crecimiento y la multiplicación de microorganismos en laboratorio.
Los medios de cultivo permiten la identificación y clasificación de diferentes especies bacterianas.
Existen medios líquidos y sólidos, siendo el agar una sustancia polisacáridos obtenida de algas marinas que proporciona solidez.
Los medios sintéticos o químicamente definidos están compuestos por productos químicos conocidos y son útiles para estudios metabólicos.
Los medios naturales o no definidos se preparan con sustancias naturales, como la leche o la zanahoria, y son adecuados para el desarrollo bacteriano.
Los medios simples proporcionan los nutrientes básicos para el crecimiento general de las bacterias.
Los medios enriquecidos incluyen elementos adicionales como sangre, suero, huevo o glucosa para apoyar a bacterias nutricionalmente exigentes.
Los medios selectivos contienen compuestos químicos o condiciones físicas alteradas que inhiben el crecimiento de ciertas bacterias no deseadas.
Los medios diferenciales contienen sustancias que permiten la observación de propiedades de crecimiento específicas para diferenciar especies bacterianas.
El cálculo preciso del volumen y peso de los medios de cultivo es crucial para su preparación adecuada.
La regla de 3 es una técnica utilizada para calcular las cantidades necesarias de los medios de cultivo.
El almacenamiento adecuado de los medios de cultivo es esencial, utilizando frascos plásticos con información completa sobre el medio.
La esterilización en autoclave es un paso esencial para la preparación de los medios de cultivo, asegurando la eliminación de contaminación.
Los tubos de cultivo deben estar parcialmente tapados para permitir el escape de aire durante la esterilización.
La cabina de flujo laminar es un entorno controlado utilizado para manipular los medios de cultivo estériles.
El procedimiento de servir los medios de cultivo debe realizarse cerca de una fuente de llama para evitar la contaminación.
Los medios de cultivo solidos, líquidos y semisólidos requieren observación y manejo específico una vez solidificados.
El proceso completo de preparación, esterilización y servicio de los medios de cultivo debe seguirse meticulosamente para garantizar la calidad y la integridad del medio.
Transcripts
bienvenidos al vídeo preparación de
medios de cultivo un cultivo es un
sustrato o solución de nutrientes en los
que crecen y se multiplican los
microorganismos en el laboratorio con el
objetivo de aislar diferentes especies
bacterianas con el fin de identificarlas
y realizar estudios complementarios
clasificación por la consistencia pueden
ser líquidos que contienen nutrientes a
los cuales se les adiciona sustancias
con la capacidad de mantener estables el
ph entre ellos podemos encontrar el
caldo nutritivo y el caldo personal
sólidos se obtienen debido a la
presencia de agar una sustancia de tipo
polisacáridos que se obtiene de algas
marinas este se agrega un medio líquido
determinado al tener un medio sólido nos
facilita obtener colonias bacterianas
aisladas emisores son similares a los
medios sólidos la única diferencia es
que a esto se les disminuye la cantidad
de agar lo que permite la observación y
registro de bacterias móviles según su
origen los medios de cultivo se dividen
en medios sintéticos o químicamente
definidos son medios compuestos por
productos químicos conocidos y se
utilizan para realizar estudios
metabólicos
por ejemplo el caldo nutritivo agar
encina azul de metileno entre otros los
medios naturales o químicamente no
definidos son aquellos medios que se
preparan a partir de sustancias
naturales ya sean de origen animal o
vegetal por ejemplo
leche papa zanahoria entre otros por la
composición y utilización pueden ser
medios simples los cuales poseen los
requisitos nutricionales que permiten el
desarrollo bacteriano general por
ejemplo hagan nutritivo caldo nutritivo
entre otros
también pueden ser medios enriquecidos
los cuales son medios simples o comunes
a los que se les añade ciertos elementos
como sangre suero huevo glucosa
vitaminas etcétera lo que permite el
aporte de factores de crecimiento o
sustancias que neutralizan agentes
inhibidores del crecimiento en bacterias
exigentes nutricionalmente entre ellos
encontramos en la gare sangre aagaard es
tóxico lato lactosa enriquecido con
lactosa ibex tóxico late medios
selectivos se consiguen añadiendo
compuestos químicos nocivos para algunas
bacterias cuyo crecimiento no es de
interés o también mediante una
alteración de las condiciones físicas
del medio entre algunos ejemplos tenemos
en la garma con kit que contiene cristal
violeta el caldo lactosa bilis verde
brillante en donde la bilis inhibe el
crecimiento de bacterias gram positivas
medios diferenciales a estos medios en
la tradición las sustancias para que
sólo crezcan ciertas bacterias y éstas
al actuar sobre algunas de las
sustancias adicionadas permiten observar
macroscópicamente ciertas propiedades de
crecimiento que ayudan a diferenciar sus
colonias de otras especies diferentes
entre algunos ejemplos encontramos pagar
esos zinc azul de metileno o agar mb
diferencia colonias de e.coli color
verde metálico brillante de colonias de
enterobacter aero genes color rosado
consistencia mucosa y crecimiento
abundante agar sangre diferencia
variedades de streptococcus pyogenes y
estreptococos beta hemolítico de
estreptococos alfa hemolítico
procedimiento práctico
los medios de cultivo se almacenan en
este tipo de frascos plásticos tienen
una etiqueta donde está toda la
información sobre el medio como la
composición fecha de vencimiento
pictogramas de peligro y la fórmula de
preparación la cual es cruciales para el
cálculo del volumen deseado a preparar
para la preparación de los medios de
cultivo seleccionados para esta práctica
primero vamos a realizar el cálculo de
los gramos necesarios para el volumen
que deseamos preparar teniendo en cuenta
que a cada caja petri se le agrega
aproximadamente 20 mililitros de cada
medio y a cada tubo de vidrio se
adiciona 12 mililitros del medio los
cálculos se realizan con la fórmula de
regla de 3 comenzaremos con caldo
nutritivo la fórmula nos indica que para
preparar mil mililitros se necesitan 13
gramos del medio en este caso vamos a
preparar 100 mililitros y por regla de 3
nos da un total de 1.3 gramos es decir
que se resolverán 1.3 gramos de caldo
nutritivo en 100 mililitros de agua
destilada
en el caso del medio sin sulfuro indoor
movilidad la fórmula nos indica que para
preparar mil mililitros se necesitan
36.23 gramos del medio en este caso
vamos a preparar 100 mililitros por
regla de 3 nos da un total de 3.6 gramos
es decir que se disolverán 3.6 gramos de
medio sin en 100 mililitros de agua
destilada posteriormente para el agar
nutritivos la fórmula nos indica que
para preparar mil rostros se necesitan
23 gramos del medio en este caso vamos a
preparar 300 mililitros y por regla de 3
nos da un total de 6.9 gramos es decir
que se disolverán 6.3 gramos de agar
nutritivo en 300 mililitros de agua
destilada continuamos con el agar mb la
fórmula nos indica que para preparar mil
mililitros se necesitan 37.46 gramos del
medio en este caso vamos a preparar 300
mililitros
y por regla de tres nos da un total de
11.2 gramos es decir que se disolverán
11.2 gramos de agar mb en 300 mililitros
de agua destilada y por último el agar
jejeje la fórmula nos indica que para
preparar mil mililitros se necesitan 40
gramos del medio en este caso vamos a
preparar 300 mililitros y por regla de 3
nos da un total de 12 gramos es decir
que se disolverán 12 gramos de agar hgc
en 300 mililitros de agua destilada con
los datos calculados vamos a pesar cada
media
se coloca papel aluminio en la balanza y
sentar a 0 destapamos en el medio de
cultivo
[Música]
se quita el tapón de seguro el cual
evita la hidratación del medio
[Música]
y agregamos el medio al contenedor de
aluminio hasta llegar al valor calculado
en este caso 12 gramos de medio gc
[Música]
tus hijos
[Música]
se debe tapar el medio muy bien para
almacenarlo
[Música]
se agrega el medio a un inmediato
se pesa un poco más del valor deseado
debido a que quedan restos en el papel
aluminio
y se marca con el nombre del mail
[Música]
este mismo procedimiento se realizó con
los demás medios
acaba en el mejor se le agrega el valor
correspondiente de agua destilada en
este caso para el medio 100 se agrega
100 mililitros
[Música]
[Música]
posteriormente se lleva calentamiento y
agitamos continuamente con una varilla
de vidrio
[Música]
como se puede observar al inicio el
medio es turno
se continua mezclando hasta que llegue
al primer hervor y se debe retirar del
calor debido a que estos medios pueden
rebotar
se realiza este mismo procedimiento tres
veces más
[Música]
i
[Música]
los medios que se servirán en cajas p 3c
los tapa con papel aluminio y estarán
listos para la esterilización en
autoclave
al final el medio se vuelve más
cristalina
[Música]
por el contrario los medios que se van a
servir en tubos con el medio si no se
mide el volumen agregar con una se mide
el volumen agregar que es de 12
milímetros con una probeta limpia y
espere y se agrega a cada tubo
[Música]
1
los tubos no se tapan por completo la
tapa debe quedar floja
se los coloca en un recipiente plástico
que sea resistente al calor y se lleva a
esterilizar en auto plástico
esterilización de medios de putin
primero se debe verificar que el nivel
del agua toque la reja de metal
esto se debe hacer antes y después de
esterilizar o descartar material el
nivel del agua no debe estar por debajo
una vez conectada a la autoclave a la
corriente eléctrica se enciende
se lleva la perilla del termostato hasta
el nuevo
[Música]
se colocan los medios en el recipiente
interno de aluminio
posteriormente se toma la tapa del mango
superior y se introduce en el tubo de
escape del aire en la pestaña que se
encuentra en el recipiente interno de
aluminio y se tapa el autoclave se debe
verificar que la distancia entre la tapa
y la base sea igual en todos los lados y
se colocan los seguros ajustando en
parejas opuestas
[Música]
i
[Música]
se verifica que esté bien ajustado
de lo contrario el aire se escapa y no
se logrará el proceso de esterilización
y por último se cierra la válvula de
control de aire como se observa la
presión comienza a subir cuando suba
hasta 15 libras de presión y los 121
grados centígrados se baja la perilla
del termostato hasta 5 y se mantiene en
estas condiciones de presión y
temperatura por 20 minutos para ello
giramos el cronómetro y cuando termine
el tiempo sonará una campana
al terminar los 20 minutos se baja la
perilla del termostato hasta a cero y se
apaga el autoclave
se debe esperar hasta que la presión
baja a 5 libras
igualmente la tempera pasado este tiempo
se levanta la válvula de control de aire
[Música]
posteriormente se abren los seguros en
parejas opuestas
2
y se quita la cama
sacamos los elementos con los medios y
se llevarán a la cabina de flujo laminar
[Música]
también sacamos el recipiente con los
tubos y debemos cerrarlos por completo y
colocarlos en una gravilla para
llevarlos a refrigeración
[Música]
esterilización de cajas pedret
envolvemos las cajas petri con papel
kraft de esta forma
[Música]
i
[Música]
[Música]
2
[Música]
y se llevarán al horno para
esterilización a 20 grados centígrados
por dos horas
[Música]
e
[Música]
pasado este tiempo se sacan del horno
basta
2
la mente
se apaga el equipo y se llevan en la
cabina de flujo la meta una vez ubicados
en la cabina de flujo laminar se sacan
las cajas petric con mucho cuidado del
empaque y se colocan sobre la mesa
una vez que tengamos estériles los
medios y las cajas petre se procede a
servir los medios así se abre con
cuidado el medio de cultivo
[Música]
se toma la caja pétriz in abril se
flamea la boca del gmail se abre la caja
petric y se sirve el medio todo este
procedimiento se debe realizar cerca del
mechero
bajamos la caja petri a la mesa y
dejamos solidifica se realiza el mismo
procedimiento con el resto de medios de
cultivo
una vez solidificado se empacan con bing
y pelé
[Música]
y se marcan con el nombre del medio y se
llevan a refrigeración al final del
proceso el medio sólido se observará a
sí
en medio líquido se observará así
[Música]
y el medio semisólidos se observará a sí
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