PCR. Cómo se Hace. Reacción en Cadena de la Polimerasa. Amplificación de ADN. Biología Bachillerato

Clases Manuel de las Heras

10 Aug 202311:40

Summary

TLDREste video explica la técnica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), utilizada en biología molecular para amplificar fragmentos específicos de ADN. A través de tres etapas principales—desnaturalización, templado y extensión—la PCR permite crear millones de copias de una pequeña cantidad de ADN, lo que facilita su análisis. Se destaca su desarrollo por Kary Mullis en 1986 y su amplia aplicabilidad en campos como la medicina, la investigación forense, la biología evolutiva y el diagnóstico de infecciones. Además, se explica el equipo necesario y los reactivos involucrados en el proceso.

Takeaways

😀 La PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) es una técnica molecular utilizada para amplificar fragmentos específicos de ADN.
😀 Fue desarrollada en 1986 por el estudiante de doctorado Kary Mullis, quien recibió el Premio Nobel por su invención.
😀 La PCR permite obtener millones de copias de un fragmento de ADN a partir de una sola molécula, facilitando su análisis.
😀 El proceso de PCR consta de tres etapas: desnaturalización, unión de cebadores (templado) y extensión.
😀 La desnaturalización se lleva a cabo a 94°C, donde las dos cadenas de ADN se separan.
😀 En la etapa de templado, a temperaturas entre 50 y 65°C, los cebadores se unen al ADN y proporcionan un extremo para la síntesis de la nueva cadena.
😀 Durante la extensión (a 72°C), la polimerasa sintetiza una nueva cadena de ADN utilizando los cebadores como punto de partida.
😀 La PCR se repite en ciclos múltiples, lo que duplica la cantidad de ADN en cada ciclo, logrando una amplificación exponencial.
😀 Los tubos de PCR deben contener reactivos esenciales como la polimerasa termostable (como Taq), cebadores, nucleótidos y un tampón de solución.
😀 La PCR tiene aplicaciones en diagnóstico de enfermedades genéticas, pruebas forenses, investigación de infecciones y estudios evolutivos.
😀 Además de su uso médico, la PCR también se emplea en campos como la arqueología, la paleontología y la seguridad alimentaria.

Q & A

¿Qué significa PCR?
-PCR significa Reacción en Cadena de la Polimerasa, una técnica utilizada para amplificar fragmentos específicos de ADN.
¿Quién desarrolló la técnica de PCR y cuándo?
-La técnica de PCR fue desarrollada por Kary Mullis, un estudiante de doctorado, en 1986.
¿Por qué se le otorgó el Premio Nobel a Kary Mullis?
-Kary Mullis recibió el Premio Nobel por el desarrollo de la técnica de PCR, que tiene múltiples aplicaciones en biología molecular.
¿Qué se necesita para realizar una PCR?
-Para realizar una PCR, se necesita una polimerasa termostable, cebadores, desoxinucleótidos trifosfato (dNTPs), cloruro de magnesio, el ADN de interés y una solución buffer.
¿Cuáles son las tres etapas principales de una PCR?
-Las tres etapas principales de la PCR son: desnaturalización (separación de las hebras de ADN a alta temperatura), templado (unión de cebadores al ADN) y extensión (síntesis de nuevas cadenas de ADN).
¿Qué ocurre durante la etapa de desnaturalización de la PCR?
-Durante la desnaturalización, la temperatura se aumenta a 94°C, lo que provoca que las dos hebras del ADN se separen debido al rompimiento de los puentes de hidrógeno.
¿Qué función tienen los cebadores en la PCR?
-Los cebadores son fragmentos de ARN que se unen a los extremos del ADN molde, proporcionando un grupo hidroxilo en el extremo 3' para que la polimerasa inicie la síntesis de nuevas cadenas.
¿Qué temperatura se utiliza durante la etapa de extensión de la PCR?
-Durante la etapa de extensión, la temperatura es de aproximadamente 72°C, lo que permite que la polimerasa sintetice nuevas cadenas de ADN utilizando nucleótidos.
¿Qué papel desempeña la polimerasa en la PCR?
-La polimerasa es la enzima encargada de enlazar los nucleótidos para sintetizar nuevas cadenas de ADN a partir del molde proporcionado por las hebras separadas.
¿Cuáles son algunas aplicaciones de la PCR?
-La PCR se utiliza en estudios evolutivos, diagnóstico de enfermedades genéticas, pruebas de paternidad, investigaciones forenses, y diagnóstico de infecciones causadas por virus y bacterias, como el coronavirus.