Técnicas básicas de Microbiología: Cómo hacer diluciones seriadas.

Summary

En este video se explica el proceso de dilución seriada para el aislamiento de microorganismos a partir de suelo. Se comienza con la resuspensión de 10 g de suelo en 90 mL de agua estéril, seguido de diluciones sucesivas en tubos con agua estéril. Cada dilución se siembra en placas Petri, donde se extiende el cultivo para permitir el crecimiento bacteriano. Tras cinco días de incubación, se cuentan las colonias, eligiendo aquellas con un número significativo entre 30 y 300. Finalmente, se calcula el número de unidades formadoras de colonias por gramo de suelo, teniendo en cuenta los factores de dilución aplicados.

Takeaways

• 😀 Se explica cómo realizar diluciones y aislar microorganismos a partir de suelo.
• 💧 Se utiliza 10 g de suelo en un matraz con 90 ml de agua estéril.
• 🔄 Se agita la mezcla durante media hora para resuspender los microorganismos.
• 🧪 Se toman 1 ml de la suspensión y se añaden a un tubo con 9 ml de agua estéril para diluciones seriadas.
• 🔄 Este proceso de dilución se repite en una serie de tubos.
• 🍽️ Se siembran 100 microlitros de cada dilución en placas Petri con medio de cultivo.
• 🔥 Se utiliza un asa de de gransky flameada para extender la suspensión en las placas.
• 📝 Cada placa se rotula con la dilución correspondiente para su identificación.
• ⏳ Las placas se incuban en una estufa para permitir el crecimiento de las colonias bacterianas.
• 🔍 Se busca una placa con un número estadísticamente significativo de colonias (entre 30 y 300) para el recuento final.

Q & A

¿Cuál es el objetivo de realizar diluciones en este procedimiento?

El objetivo es aislar microorganismos a partir de un sustrato, en este caso, el suelo.

¿Qué cantidad de suelo se utiliza para la dilución inicial?

Se utilizan 10 gramos de suelo.

¿Con cuánta agua estéril se mezcla el suelo en el matraz?

Se mezcla con 90 ml de agua estéril.

¿Por cuánto tiempo se agita la mezcla de suelo y agua?

Se agita durante aproximadamente media hora.

¿Qué se hace después de agitar la suspensión de suelo?

Se toma 1 ml de la suspensión y se añade a un tubo con 9 ml de agua estéril para realizar la dilución.

¿Qué cantidad de la suspensión se siembra en las placas Petri?

Se siembran 100 microlitros de cada dilución en las placas Petri.

¿Qué tipo de medio se utiliza para el cultivo de microorganismos en las placas?

Se utiliza un medio de cultivo específico para microorganismos.

¿Cuánto tiempo se incuban las placas para observar el crecimiento de las colonias?

Se incuban durante 5 días.

¿Cómo se determina la placa que contiene un número significativo de colonias?

Se busca una placa donde el número de colonias esté entre 30 y 300.

¿Cuál es la fórmula para calcular las unidades formadoras de colonia por gramo de suelo?

Se multiplica el número de colonias contadas por el factor de dilución y por el volumen que se sembró, ajustando por la dilución inicial del suelo.