Preparación de un medio de cultivo

UPM

11 Nov 201505:06

Summary

TLDREste vídeo explica el proceso para preparar el medio de cultivo in vitro para plantas. Se detalla la mezcla de sales y compuestos orgánicos del medio MS, incluyendo la adición de sacarosa como fuente de carbono. Se describen los pasos para preparar 150 ml de medio sin reguladores y otro con tito quinina. Se ajusta el pH, se añade agar y se autoclavan. Finalmente, se distribuye el medio en placas petri estériles en una cámara de flujo laminar.

Takeaways

🌿 Se describe el proceso para preparar el medio de cultivo in vitro para plantas.
🧪 Se utilizan dos tipos de medios: uno sin reguladores de crecimiento y otro con tiurina.
📏 Se prepara una mezcla con 30 gramos de sacarosa por litro como fuente de carbono.
💧 Se prepararán 150 mililitros de cada tipo de medio.
📦 Se utilizará una mezcla comercial que contiene las sales y compuestos orgánicos necesarios.
🔬 Se añadirán sales y vitaminas a una concentración de 4.4 gramos por litro.
🍬 Se añadirán 45 gramos de sacarosa en el medio sin reguladores y 45 gramos más en el otro.
💊 Se agregará regulador de crecimiento (tiurina) a una concentración de 0.5 miligramos por litro.
🔮 Se ajustará el pH del medio a un valor entre 5.7 y 5.8 utilizando hidróxido de potasio y ácido clorhídrico.
🌡 Se agregará agar a una concentración de 7 gramos por litro para dar consistencia al medio.
🔥 Se autoclave el medio durante 20 minutos a 120 grados centígrados para esterilizarlo.
🧑‍🔬 Se realizará todo el proceso en una cámara de flujo laminar para mantener la esterilidad.

Q & A

¿Qué es el medio MS para cultivo in vitro de plantas?
-El medio MS es una mezcla de sales y compuestos orgánicos desarrollada por Murashige y Skoog en 1962, utilizada para el cultivo in vitro de plantas.
¿Cuál es la fuente de carbono utilizada en este procedimiento?
-En este procedimiento se utiliza sacarosa como fuente de carbono, a una concentración de 30 gramos por litro.
¿Cuánto volumen de medio se prepara en el video?
-Se prepara 150 mililitros de cada tipo de medio, uno sin reguladores de crecimiento y otro con tito quinina.
¿Cuál es la concentración de tito quinina en el medio MS con reguladores de crecimiento?
-La concentración de tito quinina es de 0.5 miligramos por litro.
¿Cómo se prepara la solución de regulador de crecimiento?
-La solución de regulador de crecimiento se prepara a una concentración de 0.1 miligramos por mililitro.
¿Cuál es la cantidad de agua destilada que se añade al medio?
-Se añade 75 mililitros de agua destilada, que es la mitad del volumen final deseado.
¿Cuál es la concentración de sales y vitaminas en el medio?
-Las sales y vitaminas se añaden a una concentración de 4.4 gramos por litro.
¿Cuántos gramos de sacarosa se añaden al medio?
-Se añaden 45 gramos de sacarosa al medio.
¿Cómo se ajusta el pH del medio?
-El pH se ajusta a un valor entre 5.7 y 5.8 utilizando soluciones de hidróxido de potasio y ácido clorhídrico.
¿Cuántos gramos de agar se añaden al medio?
-Se añaden 7 gramos de agar por litro, lo que resulta en 105 gramos de agar para los 150 mililitros de medio.
¿Cómo se esteriliza el medio antes de su uso?
-El medio se autoclave durante 20 minutos a una presión de 1 atmósfera y a 120 grados centígrados.
¿Dónde se distribuye el medio una vez esterilizado?
-El medio se distribuye en placas Petri estériles en una cámara de flujo laminar.